·中药及天然药物·
赤芍与白芍的化学成分含量比较研究
周红涛!,骆亦奇",胡世林!,李润锴",刘虎威",冯学峰!(!#中国中医研究院中药研究所,北京!$$%$$;"#北京大学化学与分子
工程
路基工程安全技术交底工程项目施工成本控制工程量增项单年度零星工程技术标正投影法基本原理
学院,北京!$$&%!)
摘要:目的 通过对不同产地赤芍和白芍主要化学成分的含量测定及比较,进一步完善芍药野生品与栽培品药材的质量控制
标准
excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载
。方法 采用高效毛细管电泳法(’()*)的胶束电动色谱(+*,))分离模式,测定了!-个产地"$个赤、白芍样品中的.
个有代
表
关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf
性的活性成分:芍药苷、苯甲酸、!/儿茶素和没食子酸,并比较各成分之间的比例关系。结果 !野生芍药根(赤芍)
中芍药苷含量大于-0,!/儿茶素含量高于$#$10。未加工的栽培芍药根中芍药苷含量小于-0,未检测到!/儿茶素。在同
样条件下,加工后的栽培芍药根(白芍)中芍药苷含量下降了2%0"1-0,仍未检测到!/儿茶素,苯甲酸的变化最大,下降达
&20"3"0。#内蒙古多伦赤芍与大、小兴安岭所产赤芍在化学成分的种类和含量上存在差异。$不同产地、特别是道地与
非道地的白芍药材之间,化学成分的比例有所不同。结论 运用’()*技术,可以快速准确地对野生与栽培芍药根的活性成
分差异进行定量分析。从而为区别同为芍药来源的赤芍和白芍的临床应用提供实验依据。
关键词:芍药;赤芍;白芍;高效毛细管电泳法
中图分类号:4"&.#! 文献标识码:5 文章编号:!$$!6".3.("$$2)$36$-1.6$.
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基金项目:国家自然科学基金重点资助课题(L:#23%2$1$$)
作者简介:周红涛,女,硕士研究生 PJE:($!$)-.$!..!!/"3&2,K>\:($!$)-.$!233- */S>AE:D=X%"%Z>D::#T:S#T;
赤芍和白芍都是临床常用中药,其主流商品均为芍药
()*$’/7/2&’+7*0/(>EE#)的干燥根部。一般认为,芍药野生
品的根直接干燥就是赤芍,而栽培品的根去皮水煮后即为白
芍[!""]。赤芍传统道地产区为内蒙古多伦县附近;白芍主产
于浙江,安徽等地[2".]。以往采用的芍药苷含量测定标准,
不仅对栽培和野生芍药根难以区分,而且难以对道地与非道
地的赤、白芍质量加以控制[1]。已有国内外学者运用高效毛
细管电泳(’()*)技术探讨了药材或成药中芍药苷等成分的
测定方法[-"3]。本研究采用 ’()* 的胶束电动色谱
(+*,))分离模式,同时测定了!-个产区的赤芍和白芍样
品中芍药苷、没食子酸、!/儿茶精(赤芍精)、苯甲酸等多种活
性成分,通过分析比较,进一步明确同一物种来源的赤、白芍
药材之间,不同产地赤芍或不同产地白芍之间的成分差异,
进而为完善赤、白芍质量控制标准提供科学依据。
·.1-· ,-’$<-/04D,EFFGH)I&)4B)0,J*7"GKL*"M 中国药学杂志"$$2年3月第2&卷第3期
万方数据
! 仪器与试药
仪器:!"#$%&高效毛细管电泳仪(美国安捷伦公司),配
有二极管阵列检测器。熔融石英毛细管,’(!)(*$),#+’
!)(,$),总长度’’-),有效长度./0’-)(河北永年光导纤
维厂)。
试剂和材料:芍药苷对照品、没食子酸对照品(中国药品
生物制品检定所),苯甲酸对照品(北京化学试剂公司),!1儿
茶精对照品(234)5公司)。硼酸、氢氧化钠、甲醇(北京化工
厂),十二烷基硫酸钠(67895公司)。实验中配制缓冲液和样
品溶液所用的水为:次去离子水。实验样品经中国中医研
究院胡世林研究员鉴定为芍药("#$%&’#(#)*’+(%,#"5770)的野
生品或栽培品的干燥根,全部直接采自原产地。
" 方 法
"0! 电泳条件
"0!0! 背景缓冲液 #());7·<=>2$21#());7·<=>硼酸1
>’?甲醇,用浓@5,!调A!至>(0(,缓冲液使用前用(0.’
!)滤膜过滤,并用超声波脱气。
"0!0" 进样条件 ’B>(=+"5B>(C,分析电压:(9D,检测
波长:((E),参比波长.’(E),毛细管温度#’F。
"0" 溶液制备
"0"0! 供试品溶液 精密称样品粉末(-:4,加入甲醇>(
)<,冷浸一夜,超声提取(0’G,#(((H·)3E=>离心>()3E,
移取上清液,残渣加入甲醇>()<,重复超声提取,合并上清
液,低温浓缩,加入甲醇定容至:)<,摇匀,通过(0.’!)滤
膜过滤,并用超声波脱气后直接进样。
"0"0" 对照品溶液 精密称取芍药苷(I):((0()4,!1儿
茶素(J):/0K)4,苯甲酸(%)>(0+)4,没食子酸($)>K0/
)4,分别置于>()<量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,摇
匀,作为对照品溶液。
"0# 线性范围
分别精密吸取一定量的对照品溶液I,J,%,$,用甲醇
稀释成/个不同浓度的混合对照品溶液。每个浓度测定.
次。以峰面积对浓度()4·)<=>)进行线性回归分析,见表
>。
表! 芍药苷、!1儿茶素、苯甲酸及没食子酸的定量回归方
程、相关系数和线性范围0&L/
$%&! MN4HNCC3ONNP85Q3;EC,HN75Q3ON-;NRR3-3NEQ5ES73EN5H
H5E4NC;RA5N;E3R7;H3E,!1-5QN-G3E,TNEU;3-5-3S5ES45773-5-3S0&
L/
化学成分 回归方程 相关系数 线性范围/)4·)<=>
芍药苷 .L>K.-K/V>’-. (0WWW+ >0((">(0((
!1儿茶素 .L>K.(-./=>:-( (0WWW’ ’0#’B>(=:">0(+
苯甲酸 .L>K:’-#/V’-K (0WWK> >0(+B>(=:"(0’>
没食子酸 .L>#K+-(/V/-+ (0WWW> W0#(B>(=#"(0W#
"0’ 精密度
将同一浓度的混合对照品溶液在相同的测定条件下重
复进样/次,.个对照品的M2$值分别为:芍药苷:0:.?,
!1儿茶素>0’.?,苯甲酸>0#:?,没食子酸#0+’?。
"0( 重复性
精密称取同一样品粉末.份,按照“:0:0>”项下的方法
制备供试液,.个待测成分的峰面积的M2$值分别为:芍药
苷.0#K?,!1儿茶素#0(>?,苯甲酸#0W:?,没食子酸
+0:.?。
"0) 加样回收率
取已知含量的样品粉末#份,各(0>4,分别精密加入不
同量的.种对照品,按照“:0:0>”项下的方法制备供试液,分
别测定并计算.个对照品在不同浓度下的加样回收率及
M2$值,见表:。
表" 芍药苷、!1儿茶素、苯甲酸及没食子酸的加样回收率
结果0&L#
$%&" MN-;ONH3NC;RQGN5CC5XR;HA5N;E3R7;H3E,!1-5QN-G3E,
TNEU;3-5-3S5ES45773-5-3S0&L#
化学成分 水平 测定量/)4 加入量/)4 回收率/? M2$/?
芍药苷 > (0W#.W >0((.( W#0>> /0>W
: :0(/>: :0(:(( >(:0(. ’0+#
# #0(/+( #0(>(( >(>0KW /0(+
!1儿茶素 > (0>>#: (0>(+> >(’0+: .0#:
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# (0##(> (0#(.> >(K0’. :0WW
苯甲酸 > (0>((+ (0>(+> W#0WK :0.>
: (0>W#. (0:>(’ W>0K/ #0K/
# (0:W/# (0#(.> W+0.’ :0’W
没食子酸 > (0(W.. (0(W#: >(>0:’ .0+(
: (0>..( (0>.KK W/0+. /0+’
# (0:#K# (0::#: >(/0+K +0:#
"0* 样品中芍药苷、!1儿茶素、苯甲酸、没食子酸峰指认与
峰纯度检测
在以往的色谱研究中,一般依据保留时间采用加入标准
物质增高法来指认分析对象的峰位置。这种方法在两种物
质迁移时间一样的情况下可能出现误差。本实验采用二极
管阵列检测器($I$),可以记录每个峰在全波长(>W("/((
E))范围内的吸收光谱图。因此我们应用迁移时间和$I$
紫外光谱图这两个指标来确保样品测定中指认峰的可靠性。
当两者均与对照品相符时,才判断为所需的分析对象。
另外,我们还对样品谱图上的指认色谱峰做了峰纯度检
验,.种化合物的峰纯度因子分别为:WWK0/+,WW+0K>,
WWW0/W,W++0’’。说明本实验采用的缓冲体系可以对样品中
芍药苷、!1儿茶素、苯甲酸、没食子酸进行完全的分离。
"0+ 样品测定
按照“:0:0>”项下制备不同产地的野生和栽培芍药根供
试液,每个样品溶液测量#次,将各组份的平均峰面积分别
代入线性回归方程,计算含量。
# 结 果
不同产地芍药样品中主要成分的含量见表#,其中产地
为黄龙,亳州,缙云,磐安的芍药苷与不加工相比,分别下降
了./0’?,.>0/?,’/0.?,#+0#?。
#0! 赤芍与白芍药材的含量差异
主流商品药材的赤、白芍虽然来源于同种植物的同一入
药部位,但因为生长环境及加工方法的不同,两者在化学成
分上存在很大差异。野生的赤芍中含有(0:/?的!1儿茶
·’’/·中国药学杂志:((#年W月第#K卷第W期 01’&"1#,23,45567$8*$29$,,:%(-6;<%-=
万方数据
表! 不同产地赤芍、白芍样品含量测定结果
"#$! !"#$%#$&"’(")*"#%#$&+#!"#$%&"#’"(&)(",,%($%-
’.")-+’’%.%#$/.%/&
编号 芍药产地(收集时间)
主要成分含量/0
芍药苷 *1儿茶素 苯甲酸 没食子酸
赤芍(野生,直接干燥的芍药根)
2 多伦,内蒙古2334,3 565724 762895 76274: 767;97
8 喀喇沁旗,内蒙古2333,3 56257< 7687:7 767579 7678:5
< 克什克腾旗,内蒙古2334,5368<87 7694:9 767;<5 767852
9 克山,黑龙江2334,22 276<25< 762:73 7627<4 未测出
; 黑河,黑龙江2333,3 :692<: 76:724 767<<2 未测出
: 桦南,黑龙江2334,4 :6:559 7688<: 76227; 未测出
5 白城,吉林2333,27 5673;8 76;859 767:27 未测出
4 西丰,辽宁2334,4 56;;7: 767;2; 768278 767828
3 隆化,河北2333,3 465847 762<<7 767<32 未测出
27围场,河北8777,3 :65745 768<98 767943 76797<
22崇礼,河北2334,27 :6:95: 767:79 7675<2 未测出
28怀来,河北8777,3 56:;73 769<<5 7672:5 未测出
2<黄龙,陕西2334,22 562;9; 762:75 7679;: 76284<
生白芍或“赤芍”(栽培,直接干燥的芍药根)
29 亳州,安徽8777,3 <62994 未测出 76749: 7675;8
2; 缙云,浙江8777,4 <63584 未测出 762244 7675:3
2: 磐安,浙江8777,; :672:; 未测出 762;;; 767353
白芍(栽培,去皮水煮的芍药根)
25 黄龙,陕西2334,3 <64<28 未测出 76758; 767:32
24 亳州,安徽8777,3 264<59 未测出 76722:2)767;:9
23 缙云,浙江8777,4 265<74 未测出 7677372)767573
87 磐安,浙江8777,5 <6559; 未测出 7678;3 7675;<
注:2)超出校准范围
="$%:2)">$"’(/,+?./$+"#./#@%
精,56:80的芍药苷,7675;0的苯甲酸,以及7678<0的没食
子酸。同样条件下,由栽培芍药根加工成的白芍中未检测到
儿茶精,芍药苷含量为86530,没食子酸含量为767:40,苯
甲酸仅有767830。上述9个成分在赤、白芍中不仅含量差
别大,而且比例关系也不同。以苯甲酸为基准,赤芍中芍药
苷的含量是苯甲酸的29569:倍,儿茶精是它的:6<<倍,没
食子酸只为其76<4倍。而白芍中芍药苷的含量是苯甲酸的
273倍,没食子酸却是它的<674倍。
!6% 野生与栽培芍药根的含量差异
在本实验条件下,测得的野生来源的芍药根中芍药苷的
含量大于:690,*1儿茶精的含量高于767;0,没食子酸的
含量(除黄龙外)小于767;0,苯甲酸含量低于76820。与
之不同,药用栽培来源的芍药根中没有检测到*1儿茶精,芍
药苷的含量小于:670,没食子酸的含量大于76750,苯甲
酸含量低于762;0。芍药野生品的醇提部分化学成分丰富,
总含量高。而药用栽培品的化学成分单一,总含量低。因
此,野生状态下生长的芍药根与大规模药用种植条件下生长
的芍药根有明显差异,若以后者充“赤芍”用,恐难达疗效。
!6! 不同产地赤芍药材的含量差异
野生来源的赤芍中,单从芍药苷看,黑龙江克山所产含
量最高(276<0)。但从没食子酸和 *1儿茶精的组成配比
看,内蒙古多伦、喀喇沁旗、克什克腾旗等地所产的赤芍中两
个成分的含量均较高。相比之下,大、小兴安岭一带(黑河、
克山、桦南)所产赤芍中均未检测到没食子酸。辽宁西丰产
的赤芍中*1儿茶精的含量最低(767;0)。所以依据多组分
评价体系可以看出,传统道地药材“多伦赤芍”与大、小兴安
岭主产的赤芍在化学成分上存在一定差异。
!6& 加工前后及不同产地白芍药材的含量差异
对比同一产地栽培芍药根加工前后的化学成分变化发
现,去皮水煮后,芍药苷的含量下降了<50!;:0,没食子酸
含量只下降了40!8;0,苯甲酸的变化最大,下降达4<6<0
!38690。因此,经过产地加工处理,苯甲酸几乎消失,芍药
苷与苯甲酸的含量比从<:倍上升到2:;倍,没食子酸与苯
甲酸的含量比也由7658倍上升到568;倍。从组分配比还
可以看出,不同产地、特别是道地与非道地的白芍药材之间,
化学成分有所不同。在道地产区,芍药苷含量是苯甲酸的
2:;倍,没食子酸含量是苯甲酸的;688倍;在非道地产区,前
者只有;8649倍,后者仅为763;倍。
& 讨 论
&6’ 如何为同一来源(芍药),而功效大不相同的中药赤芍
(野生芍药居群)和白芍(栽培芍药群体)制定切实可行的质
量标准是亟待解决的问题。本研究发现栽培群体未检出具
有活血化淤作用的成分*1儿茶精,部分地解释赤、白芍药性
的区别,建议将*1儿茶精列为芍药来源的赤芍的鉴别检项。
&6% 在中国药典中,芍药苷是区分同一物种来源的赤芍和
白芍药材的唯一定量指标。2337年版和233;年版药典中采
用薄层色谱法,只规定了赤芍含芍药苷不得少于8670,而对
白芍则未规定芍药苷的含量[27!22]。8777年版药典采用高
效液相色谱法,规定芍药苷的含量在赤芍中不得低于2640,
在白芍中不得少于7640[2]。然而,从本实验获得的大范围、
多产地代表样品的测定数据来看,赤、白芍中芍药苷的含量
普遍比药典规定的高,如果以芍药苷含量90为界,可以对二
药加以区分。虽然由于检测手段、采收时节、加工方法的不
同,赤、白芍药材中芍药苷含量的测量值不尽相同,但大多数
的文献记载与本实验的结果趋势一致。比较不同作者对不
同生长期、不同规格的杭白芍、亳白芍和川白芍中芍药苷的
含量测定结果,如用薄层色谱法均小于26;0[28!29];如用高
效液相色谱法不超过90[2;!25]。而用高效液相色谱法在完
全相同的条件下测得的野生赤芍中芍药苷的含量大多为;0
!50[2;!2:]。由此看来,现行药典标准存在两个问题:"芍
药苷的药理活性主要表现在活血化淤、解痉止痛方面,与赤
芍的功效相吻合。而药典中赤芍的芍药苷含量标准偏低,难
以发挥质量控制的作用。#白芍的主要功效是补血滋阴,与
赤芍有所不同。而药典中白芍的芍药苷含量只有下限,没有
上限,就会与赤芍的含量标准相重叠,难以体现赤芍和白芍
的临床疗效差异。因此,建议适当提高赤芍的芍药苷含量标
准,同时将白芍中芍药苷的含量控制在一定范围。
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含量测定及比较["]!中国中药杂志,#$$’,#$(C):D&%!
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中苷类和苯甲酸的含量["]!中国药科大学学报,#$%$,&A(D):
#D$!
[&"] 胡世林,付桂兰,冯学锋,等!不同产地和部位赤芍中芍药苷的
含量测定["]!中国中药杂志,&AAA,&B(#&):J#’!
[] 王强,俞祥生,张留纪,等!不同规格白芍中有关化学成分的
(GKF分析["]!中药材,#$$&,#B(J):D#!
(收稿日期:&AA&LAJLDA)
高效液相色谱法测定中药枇杷叶中熊果酸的含量
鞠建华,周亮,郑瑞霞,王春兰,杨峻山(中国医学科学院L中国协和医科大学药用植物研究所,北京#AAA$’)
摘要:目的 建立中药枇杷叶[4/(&5&"/6#7#8&’(9#(M:.*?!)K1*+6!]中抗炎镇咳有效成分熊果酸的含量测定方法。方法 N)L
O,L>,0F#%(D!$==P#BA==,’"=)色谱柱,流动相为乙腈L甲醇L水L醋酸胺(CAQ#’Q&%QA!C),流速为#=K·=1*R#,检测波长为
B*=。结果 熊果酸在’!&&!$!%B"S范围内呈良好线性关系,回归方程为:TB;&BP#AB
计划
项目进度计划表范例计划下载计划下载计划下载课程教学计划下载
,中药现代化研究与产业化开发项目—常用中药化学成分及其有效成分的研究(N)!$$R$&$
RA#RD’) 作者简介:鞠建华,男,博士,副研究员 M;6:(A#A)C&%$$JD$
+,-,./012-031345.63708280901!"#$%$&"’()(*$+#,(:;<=>?2127;606
"X"1,*L:.,,Y(ZXK1,*S,Y([N\H.1LI1,,E5N\F:.*L6,*,]5N\".*L8:,*(=’>"("?"!&@A!*(9(’#$%$#’"B!C!$0
&81!’",-.(’!>!39#*!16&@A!*(9#$D9(!’9!>#’*%!E(’2F’(&’A!*(9#$-&$$!2!,G!(7(’2#AAA$’,-.(’#)
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枇杷叶系蔷薇科H)8,<;,;枇杷属植物枇杷4/(&5&"/6#
7#8&’(9#(M:.*?!)K1*+6!的干燥叶,是一种常用中药,收载于
历版中国药典供中医临床使用。为了探寻其药效作用的物
质基础,我们对其进行了化学成分和药理活性研究,结果表
明,熊果酸具有很强的抗炎活性和止咳作用,其抗炎活性强
于阿司匹林对照组,是与该中药功能主治相吻合的主要有效
成分[&]。中国药典&AAA年版未收载枇杷叶的含量测定方
法,我们对枇杷叶中含量较高的熊果酸进行了(GKF含量测
定方法研究,为其质量标准的制定提供参考。
& 仪器、药品、试剂
美国E,3;@8CAA型高效液相色谱仪,二极管阵列检测
器,&A#A数据处理软件;甲醇和乙腈为色谱纯,水为重蒸蒸馏
水,氯仿和乙酸胺为分析纯。
熊果酸对照品系从植物枇杷叶中提取纯化得到,经aH,
·JBC·中国药学杂志&AAD年$月第D%卷第$期 -.(’%.#/1,,HIIJD!8"!15!/,K&$;JLM&;N
万方数据