...纤维素的测定------比色法纤维素由葡萄糖基组成，它是组成植物细胞壁的基本成分。其含量的多少关系到植物的机械组织是否发达，作物抗倒伏、抗病虫害的能力是否较强，并且影响到粮食作物、纤维作物和蔬菜作物等的产量和品质。在各种粮食中纤维素的含量各不相同，与籽粒皮层厚薄成正比。同种粮食中，原粮纤维素维素含量最高，加工粗加工精度越高，纤维素含呈越少，如小麦
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粉约O．7％．稻谷约9.0％，糙米约1.0％，白米约04％。因此，根据纤维素的含量的测定，可以判别籽粒皮层的厚薄，粮食加工精度高低和营养价值评估。纤维素的测定方法有酸碱醇醚法、酸性洗涤剂法、碘量法及比色法。第一个是国标法，但比较繁琐，后者操作比较简单。一、方法原理纤维素是由葡萄糖基组成的多糖，在酸性条件下加热使其水解成葡萄糖。然后在浓硫酸作用下，使单糖脱水生成糠醛类化合物。利用蒽酮试剂与糠醛类化合物的蓝绿色反应即可进行比色测定。二、仪器和试剂1．主要仪器恒温水浴、冰罐、电炉、玻璃坩埚、漏斗、定时钟、分光光度计等。2．试剂60％H2SO4溶液、浓H2SO4。2％蒽酮试剂：2g蒽酮溶解于100rnl乙酸乙酯中，贮置于棕色试剂瓶中。纤维素标准液：准确称取100mg纯纤维素，放入100Inl量瓶中，将量瓶放入冰浴中，然后加冷的60％H2SO460—70ml，在冷的条件下消化处理20—30min，然后用60％H2SO4稀释至刻度，摇匀。吸取此液5．0ml放入另一50ml量瓶中，将量瓶放入冰浴中，加蒸馏水稀释刻度，则每毫升含100μg纤维素。三、操作步骤1．绘制纤维素标准曲线（1）取6支小试管，分别放入0、0.40、0.80、1.20、1.60、2.00ml纤维素标准液。然后分别加入2.00、1.60、1.20、0.80、0.40、0ml蒸馏，摇匀。则每管依次含纤维素0、40、80、120、160、200μg。（2）向每管加0．5ml％蒽酮试剂，再沿管壁加5．0ml浓H2SO4，塞上塞子，微微摇动，促使乙酸乙酯水解，当管内出现蒽酮絮状物时，再剧烈摇动促进蒽酮溶解，然后立即放入沸水浴中加热10min，取出冷却。（3）在分光光度计上620urn波长下比色，测出各管消光值。（4）以所测得的消光值为纵坐标，以纤维素含量为横坐标，绘制纤维素标准曲线。2.样品的测定（1）准确称取风干的样品100mg，放入100rnl量瓶中，将量瓶放入冰浴中，加冷的60％H2SO4。60—70ml，在冷的条件下消化处理半小时，然后用60％H2SO4。稀释至刻度，摇匀，用玻璃坩埚漏斗过滤。（2）吸取上述滤液5．0ml，放入5ml量瓶中，将量瓶置于冰浴中，加蒸馏水释至刻度，摇匀。（3）吸取上液2.0ml，加0.5ml2％蒽酮试剂，再沿管壁加5．0ml浓H2SO4，盖上塞子，以后操作同纤维素标准液，测出样品在620urn波长下的消光值。四、结果计算以样品测定消光值，在标准曲线上查出相应的纤维素含量，然后均按下式计算样品中纤维素含量：X=A*10-6*C*100B式中：A——在标准曲线上查得的纤维素含量值（μg）；B——样品重（g）10-6——将μg换算成g的系数C——样品稀释倍数X——样品中纤维素含量（％）五、说明1．此法需用纯纤维素样品作标准曲线。2．纤维素加60％H2SO4时，一定要在冰浴条件下进行。参考文献：作物品质分析农业出版社主编：牛森如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！精品精品精品
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