离子色谱法测定熟肉制品中溴酸根_亚硝酸根_硝酸根含量

离子色谱法测定熟肉制品中溴酸根_亚硝酸根_硝酸根含量 ?206?No(4药学研究?JournalofPharmaceutical,esearch2015Vol(34， 离子色谱法测定熟肉制品中溴酸根、亚硝酸根、硝酸根含量 王小兵，李俊婕，刘春霖于海英，李启艳， (山东省食品药品检验研究院，山东济南250101) 摘要:目的 建立了离子色谱法测定熟肉制品中溴酸根、亚硝酸根、硝酸根含量的方法。方法 样品经超声波 提取后，经阳离子交换树脂柱净化、超滤器离心后，以IonPacAS19阴离子柱进行分离，采用AS,S3004,mm阴离 ,1 1 子抑制器，电导检测器检测， 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 曲线法定量。结果3种离子在0(1,5(0mg?L的范围内线性关系良好，相关 0(2、0(2mg?kg,1，0(6、亚硝酸根、硝酸根的检出浓度分别为0(5、系数皆大于0(999;溴酸根、定量浓度分别为1(5、0(6mg?kg,1，82(0%,88(1%、78(6%,81(0%。结论回收率分别为83(2%,88(7%、度高，适用于基质复杂的熟肉制品中3种阴离子的测定。 关键词:离子色谱;溴酸根;亚硝酸根;硝酸根中图分类号:TS251(7 文献标识码:A 文章编号:2095,5375(2015)04,0206,004 本方法净化效果好，灵敏 DOI:10.13506/j.cnki.jpr.2015.04.007 AnionchromatographymethodtoanalyzethecontentsofBrO3 ,， NO3,incookedmeatproductsNO2,， YUHai-ying，LIQi-yan，WANGXiao-bing，LIJun-jie，LIUChun-lin(ShandongInstituteforFoodandDrugControl，Jinan250101，China) Abstract:Objectiveods ToestablishamethodforthedeterminationofBrO3,，NO2,，NO3,incookedmeatproducts(Meth- 2 Thesampleswerepreparedbyultrasonicextractionandpurifie dwithcationexchangeresincolumn，thenseperatedby Thecalibrationcurveshadgoodlinearitywithin0(1,5(0mg?L,1，r,0(999(Thelimits The IonPacAS19column(AS,S3004,mmanioninhibitorandconductivitydetectorwereused(Standardcurvemethodwasusedforquantitativeanalysis(,esults ofdetectionwere0(5，0(2，0(2mg?kg,1andthelimitsofquantitationwere1(5，0(6，0(6mg?kg,1forBrO3,，NO2,，NO3,(Therecoveriesofeachanionwere83(2%,88(7%，82(0%,88(1%，78(6%,81(0%，respectively(Conclusionmethodwassimple，sensitivity，andcanbeusedtoanalyzethreeanionsincookedmeatproducts( Keywords:Ionchromatography;BrO3,;NO2,;NO3, 特食品中的溴酸盐及亚硝酸盐具有致癌隐患，别是溴酸盐已被国际癌症研究机构定为2B级的潜在致癌物 ,1, 品中溴酸根测定的相关报道。本研究所建立的离子 色谱测定溴酸根、亚硝酸根、硝酸根含量的方法，可以实 3 现3种离子的同时测定，且操作简单、适用性强。1 材料与方法 1.1仪器DionexICS,5000离子色谱仪(配Di-onexAS自动进样器、四元梯度分析泵、淋洗液发生AS,S3004,器、检测器/色谱单元、电导检测器、mm抑制器、Chromeleon6.80S,9色谱工作站，Ther-moFisher公司);Milli,Q超纯水机(美国密理博公司); MettlerToledoMS105DU分析天平(十万分之一，瑞士梅特勒,托利多公司);Universal320,高速冷冻离心机(德国Hettich公司);KQ,500DE型数 。溴酸盐是自来水采用臭氧进行杀菌 ,2, 消毒过程中溴化物与臭氧发生反应的产物之一， 熟肉制品在加工过程中使用的水可能引入溴酸盐。 在食品加工过程中常用硝酸盐、亚硝酸盐作为另外， 鱼、肉加工品的发色剂，从而引入硝酸盐、亚硝,3, 酸盐。 《GB2760,2011食品安全国家标准食品国标 添加剂使用标准》中规定熟肉制品中硝酸钠(或硝 ,1 酸钾)的最大使用量为0(5g?kg，亚硝酸根的残 ,1留量(以亚硝酸钠计)小于等于30mg?kg，而并未规 4 定溴酸盐的检查项目及限值，且尚未见熟肉制 E,mail:myhy12@163.com女，主管药师，研究方向:药品检验，作者简介:于海英， No(4药学研究?JournalofPharmaceutical,esearch2015Vol(34，?207? 控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);离心 过滤装置(美国密理博公司);H型阳离子交换树脂Ag型阳离子交换树脂柱(艾杰尔)。柱、 1.2材料与试剂禽类熟肉(10批)、畜类熟肉(18批，市售);水中溴酸根溶液标准物质(GBW186761208，1000μg?mL,1，中国计量科学研究院);亚硝1000酸根单元素标准溶液(GSB04,2839,2011， ,1 μg?mL)、硝酸根单元素标准溶液(GSB04,1772,2004，1000μg?mL,1，国家有色金属及电子材料分析测试中心);KOH淋洗液(EGC?KOH淋洗液储济南德洋特种气罐，美国Dionex公司);N2(99.99%， 体有限公司);超纯水(电阻率为l8.2MΩ?cm)。1.31.3.1 实验方法 色谱条件色谱柱为IonPacAS19阴离子 柱(4mm×250mmI.D.);保护柱为IonePacAG19(4mm×50mmI.D.);淋洗液为KOH，流速:0.8mL?min,1， 5 淋洗液发生装置在线产生梯度淋洗液如 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 1所示;抑制器为AS,S3004,mm，抑制电流100mA;检测器为电导检测器;氮气流速(压力):5psi;柱温为30?;进样量为25μL。 表1 时间(min) 07(317(022(027(032(0 在线淋洗液梯度表 梯度曲线 555555 KOH浓度(mmol?L,1) 101040401010 0.5、1.0、准溶液。准确移取混合标准溶液0.05、 1.5、2.0、2.5mL，分别置10mL容量瓶中，加水定容1、2、3、4、5mg?L,1的混合至刻度，得浓度为0.1、系列标准溶液。1.3.4 选取熟肉样品制备低、中、高3个 浓度的加标样品，每一浓度进行6样品分析，根据标 回收率 准曲线，分别计算加标样品的测得浓度，求得方法的回收率。22.12.1.1 结果和分析色谱条件的优化 色谱柱的选择本实验所采用的淋洗液为 6 氢氧根体系，因此可以考虑的色谱柱有IonPac系列 AS11,HC、AS18、AS19等。AS11、AS11的AS11、,HC、AS18可以实现亚硝酸根、硝酸根的同时测定，但是不能用于溴酸根的测定，且柱容量低。Ion-PacAS19是一款高容量氢氧根体系阴离子交换色谱柱，可以用来检测各种样品中卤氧化物和无机阴离子，包括氟离子、亚氯酸盐、溴酸盐、氯化物、亚硝酸盐、氯酸盐、溴化物、硝酸盐、硫酸盐等，其最大优点是能检测饮用水中痕量溴酸盐。该色谱柱可同时测定溴酸根、亚硝酸根、硝酸根，因此，本实验采用IonPacAS19色谱柱进行色谱分离。 2.1.2淋洗液OH,浓度的选择熟肉制品中含有多种阴离子，组成复杂。采用等度洗脱难以使各种阴离子达到良好的分离，特别是和出峰时间特别接近。因此，本实验建立了梯度洗脱程序，同时考察了3种待测离子与可能影响实验结果的F,、Cl,、Br,、 ,SO23种待测离离子的分离情况。实验结果显示，4 子出峰时间适中，色谱峰对称，与其他阴离子分离良 1.3.21(3(2(1 样品前处理提取 准确称取粉碎的熟肉约2.5g，置 25mL具塞比色管中，加高纯水至刻度，涡旋20s，4000rpm离心20min，超声提取20min，取上清液备用。1(3(2(2 7 取上清液过滤，滤液过经活化的 ,1 H/Ag阳离子交换树脂柱，流速:2mL?min，弃去 净化 好，分离度皆大于3 。 前3mL流出液，收集其后2mL流出液进行下一步净化。1(3(2(3 超滤法去除样品中水溶性大分子将上 一步收集液经0.22μm的水膜过滤后注入超滤器 样品杯中，于9000rpm下离心30min进行超滤，超滤液直接进行色谱分析。1.3.3 标准溶液配制 , , 准确量取水中BrO3溶液 , 图17种阴离子分离情况 NO3单元素标准NO2单元素标准溶液、标准物质、 溶液2mL，置100mL容量瓶中，以水定容至刻度。 ,1, NO2,、NO3,混合标得浓度为20μg?mL的BrO3、 8 2.1.3 抑制器电流的选择抑制器电流的大小直 接影响背景电导值。通常来说，背景电导值在1μS 以下才能获得满意的色谱分析结果。因此，本实验 ?208?No(4药学研究?JournalofPharmaceutical,esearch2015Vol(34， 在设定的淋洗液梯度条件基础上，考察了电流强度 60、80、100、110mA时背景电导值的大小。为40、 实验结果显示，抑制器电流为100mA时，背景电导值即可降到1μS以下。2.2 熟肉制品是以鲜(冻) 畜、禽肉为主要原料加工制成的，加工过程中需加入 样品处理方法的优化 0.2、0.2mg?kg，信噪酸根的检出浓度分别为0.5、 比等于10(S/N=10)计算定量浓度分别为1.5、0.6、0.6mg?kg,1。2.4 回收率及精密度选取熟肉样品一批制备低、中、高3个浓度的加标样品，每一浓度进行6样品分 ,1 + 食盐等佐料，会引入大量的Na等，干扰被测离子的测定，特别是溴酸根的测定。因此，本实验采用IC 9 析，根据标准曲线分别计算溴酸根、亚硝酸根、硝酸 根的测得浓度，求得方法的回收率分别为83.2%,88.7%、82.0%,88.1%、78.6%,81.0%，结果见表2。同时选取一个加标水平连续6次测定，考察日内精密度为0.82%;连续5d测定，考察日间精密度为3.4%，见表2。 表2 BrO3,、NO2,、NO3,3种离子加标回收率结果(n=6) ,SD(%)4(03(53(93(44(93(63(84(54(7 离子类型本底值(μg)加入量(μg)测得量(μg)回收率(%) BrO3, 000 NO2, 0021(2 NO3, 21(221(2 2562(51002562(5100142030 20(855(488(720(552(088(132(237(445(1 83(288(688(782(083(288(178(681(079(7 ,H、IC,Ag柱去除样品中的金属离子及氯离 ,4,8, 10 ，子实验结果显示该处理方法能够有效去除氯离子等离子的干扰，如图2所示 。 2.5 样品测定结果对28批市售禽畜熟肉制品进 行测定，检验结果见表3。 表3 样品 样品中被测离子测定结果 样品测定结果(mg?kg,1)测定结果(mg?kg,1)编号溴酸根亚硝酸根硝酸根编号溴酸根亚硝酸根硝酸根 2(123(711(466(715未检出未检出2345 未检出未检出未检出未检出未检出未检出未检出未检出未检出未检出未检出未检出未检出 0(71(00(91(10(81(1未检出5(90(70(91(11(40(9 32(750(829(417(011(821(257(922(019(421(331(160(719(7 16171819202122232425262728 未检出未检出4(2未检出未检出未检出未检出未检出3(1未检出未检出未检出未检出 0(81(01(01(03(51(00(8未检出未检出未检出0(9未检出未检出 11 18(634(736(554(551(625(624(250(715(715(617(2未检出未检出 图2样品处理前后色谱图 67891011121314 A(经阳离子交换柱处理;B(未经净化处理 另外，熟肉制品在加工过程中会水解出部分水 若不去除会对色谱系统，特别是色谱溶性的蛋白质， 柱造成污染及损伤，严重影响使用寿命。因此，样品IC,Ag柱后，在经过IC,H、又经过超滤管过滤去除水溶性的大分子物质。 2.3标准曲线及检出限将标准系列按照色谱条 ,1 件依次进样分析，以酸根离子的浓度(mg?L)为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线，溴酸根、亚硝酸根、硝酸根的线性方程依次为Y=0.078X,0.007、Y=0.230X,0.012、Y=0.177X,0.009，相0.9992、0.9993。选取具关系数r分别为0.9992、 有代表性的空白样品和空白加标样品，按照确定的样品前处理方法处理后，进样检测分析。以空白加标样品信噪比等于3(S/N=3)计算，溴酸根、亚硝酸根、硝 3结论 本实验采用离子色谱法同时测定熟肉制品中溴 12 硝酸根的含量，前处理方法能够有酸根、亚硝酸根、效去除样品中的无机阴、阳离子及有机成分的干扰， 操作简单、快速，测定结果准确。本研究为熟肉制品中溴酸根、亚硝酸根、硝酸根的测定提供了依据，具有一定的使用价值。 (下转第243页) No(4药学研究?JournalofPharmaceutical,esearch2015Vol(34，在教师指导下进行文献查阅、综述撰写等活动，在此过程中，提出科学问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 并进行实验设计，最后完成实验并进行总结。这种导师与学生间开放式互动的模式对导师正确处理理论教学、实验教学与科研活动之间关系，同时提高学生的实践能力和创新意识，具有双赢的效果2 ,7, ?243? 生基础医学创新论坛暨实验设计大赛，获得学校大学生课外学术科技作品大赛奖项20余项，近五年来指导大学生发表 论文 政研论文下载论文大学下载论文大学下载关于长拳的论文浙大论文封面下载 30余篇，申请发明专利2项。 在培养大学生科研实践能力的过程中，我们也注意到对其科研能力和创新意识的培养不能操之过急，应分层次逐步推进学生参与科研活动。培养低年级学生的科研兴趣是在学生中开展科研活动的前提条件，以学研结合的形式来推动学生 13 科研活动是培养学生科技创新能力的有效途径。同时，也要注意应该为学生参与科研活动建立保障措施，比如建立大学生科研基金、制定相关政策吸引优秀教师的参与、将学生科研活动的开展编入教学 计划 项目进度计划表范例计划下载计划下载计划下载课程教学计划下载 等。 实践证明，科技创新是激励大学生成才的动力，而鼓励大学生参与科研实践是培养大学生科技创新能力的有效途径。只有将大学生的兴趣吸引到科技创新上来，鼓励他们参与到科研实践活动中并对其加以合理指导，才能激发他们积极探索的科研精神，培养出创新型的药学人才。参考文献: ,1,黄国琼(生命科学发展前沿对医学教育的影响,J,(医 2014，35(1A):18,学与哲学(人文社会医学版)，20，30( ,2,陈澜，王黎辉(大学生课外科技活动对创新能王明强， J,(合肥工业大学学报(社会科学版)，力培养的作用,2004，18(5):137,140( J,(中国,3,龚晓林(学生课外科技活动与创新人才培养, 2011，8:68,69(高校科技， ,4,马新飞，王九龙，吴皓，等(药学专业大学生科技创新 (中国中医药现代远程教育，工作的实践与思考,J,2009，7(12):72,73( 14 ,5,董琳，张彩芳，等(药学专业大学生科技创新权洪峰， J,(华章，2012，33:189,190(工作的探索, ,6,田喜洲(论大学生科研能力的培养,J,(重庆大学学报 (社会科学版)，2006，8(6):128,129( ,7,齐艳，姚继红，等(论综合实验中心对大学生彭金咏， (药学教育，2015，科技创新能力培养的推动作用,J,31(1):67,70( ,8,赵振富，“挑战杯”汪安泰，等(以为契机推动刘志刚， (中国高等大众化教育阶段大学生创新能力培养,J,2012，12:29，32(医学教育， ,J,(环境化学，2001，20(5):507,516( ,5,叶明立，王一琦(离子色谱样品预处理技术施青红， ,J,(现代科学仪器，2004，2:49,53( ,6,冯伟科，熊珺，罗佳玲，等(离子色谱法同时测定牛奶 及其制品中的亚硝酸盐、硝酸盐、硫酸盐和硫氰酸盐,J,(现代食品科技，2011，27(9):1157,1159(,7,崔晓青，姜芳，等(离子色谱法检测牛奶亚硝酸姚超， J,(轻工科技，2013，9:13,14(盐与硝酸盐, ,8,贾艳侠，孙元社，唐涛，等(抑制型离子色谱法测定面 15 J,(现代科学仪器，2010(5):77,78(粉中溴酸盐, 。 以开放式实验室体系提供科研平台 建立开放的实验室体系，以药学综合实验中心和教师科 研实验室作为学生科研活动基地，为大学生科研活动提供科《大连医科大学实验室开放管理规定》研平台。在的指导下鼓励学有余力的优秀本科生到实验室利用课余时间进行科研实践。学生可以针对理论课中感兴趣的某一点或教师科研课题中的某一问题进行补充性或探索式研究，可在开放实验室自主完成设计实验。同时，也鼓励对科研有兴趣的同学提前进入实验室做毕业论文的研究工作。通过学生自行设计实验，激发了学生的科研兴趣，使学生初步掌握科学研究的基本程序和方法，培养学生的自学能力与创新能力。3 鼓励学生以科研小组形式参与教师的科研项目 实行学生自主管理，以大学生科研活动小组为载体，在教师指导下参与科研实践，可以激发学生求知欲望，发掘学生的创新潜能。科研小组结合课堂所学知识，在实践应用中寻找课题，搜集前沿的研究信息和资料并开展实验研究，同时通过自行组织学习交流会和论文报告会的形式进行科学的思考。在这一过程中，学生的团队意识、集体荣誉感、合作精神、组织协调和沟通能力得到了明显增强;与此同时，学生的文献收集整理、文字表达、外语应用能力也能得到进一 16 步提升4实践基础 大学生对科研活动存在好奇心理，内心充满热情，参与挑战竞争的积极性非常高，因此，我们一直鼓励学生在教师指导下开展科技创新项目、参加课外学术科技作品竞赛，如、“挑战杯”全国大学生基础医学创新论坛暨实验设计大赛 大学生课外学术科技作品竞赛等。由于科技竞赛具有创造性与综合性的特征，使学生变被动接受为主动学习，跟随指导教师一起去探索科研问题，学生在不断的实践和思考中学会了如何利用理论知识来解决现实问题，激发了学生探索未知领域的兴趣，同时在竞争机制下也享受到了科研的乐趣。“挑战杯”几年来，我院学生有3项作品在国家、省大学生课2个项目入选第三届全国大学外学术科技作品竞赛中获奖， ,8, 。 积极组织学生参加各项科技竞赛是开展学生科研活动的 (上接第208页) 参考文献: ,1,刘勇建，牟世芬(离子色谱法在测定饮用水中痕量溴 J,(环境化学，2002，21(2):酸盐标准方法中的应用, 203,204( ,2,徐莉，卓海华，等(离子色谱法测定海产品中吴淑良， (河南工业大学学报(自然科溴酸盐含量的研究,J, 17 2009，30(1):42,44(学版)， ,3,杜雅南，冯波(腌腊肉制品亚硝酸盐残留量的史春云， J,(肉类工业，2004，11:38,40(检验与分析,,4,丁晓静，牟世芬(离子色谱中的样品前处理新技术 百度搜索“就爱阅读”,专业资料,生活学习,尽在就爱阅读网92to.com,您的在线图书馆 18