【最新word论文】山萸肉饮片中黄曲霉毒素B1含量及限度的研究【药学专业论文】
山萸肉饮片中黄曲霉毒素B1含量及限度的研究
作者:许闽，张振凌，吴筱菁，李朋丽，李琪玲
【摘要】目的测定山萸肉饮片中黄曲霉毒素B1(AFB1)的含量并建立限度标
准。方法间接竞争酶联免疫吸附法(ELISA)。结果山萸肉饮片均有不同程度的污
染黄曲霉毒素B1(AFB1)，炮制后降低，但都在国家规定的食品类AFB1限度范围
之内。结论山萸肉饮片中黄曲霉毒素B1的含量限度标准初步确定为?5μg/kg，
与国家食品类限度标准相同。
【关键词】山萸肉;酶联免疫吸附法;黄曲霉毒素
Abstract:
ObjectiveToassaythecontentofAFB1incutcrudedrugofFructuscornisoastoestablishthestandardlimitation.MethodsEnzymeLinkedImmunosobent(ELIA).ResultsThereisaniso-degreecontaminatedbyAFB1incrudedrugofFructuscorni,butprocessingdrugscoulddegradethecontentofAFB1,thecontentofAFB1stillremainedwithinnationratedfoodstuffconvarietyAFB1circumscription.ConclusionThestandardofAFB1content’
slimitationincutcrudedrugofFructuscorniisinitialdetermined?5μ
g/kg.Itisidenticaltothenationfoodstuffconvarietylimitationstandard.
Keywords:Fructuscorni;Enzymelinkedimmunosorbentassay;AFB1
黄曲霉毒素是目前致癌物质中危害较大的一种。1982年，国家颁布规定用薄
层层析法测定食品中AFB1允许量的标准,1,。酶联免疫吸附法(ELISA)是近10,
20年出现的一种新技术，具有特异性强、分析时间短的特点，而且其灵敏度与TLC
或HPLC相当或更高，样品制备简单,2,。本研究采用文献报道的间接竞争酶联免
疫吸附法,3,对河南地区不同产地的山萸肉进行测定，并在检测结果的基础上初
步确定河南产区山萸肉的黄曲霉毒素B1的限度标准。
1仪器与试药
1.1仪器EAB1-2000黄曲霉毒素测定仪、BS210S型电子天平、LDZX-40SCI型
高压灭菌器，H11B11—600BS电热恒温培养箱、GS101-2D电热风干燥器。
1.2试剂黄曲霉毒素酶联免疫试剂盒(按试剂盒常规配置，无锡市艾赛生物
技术有限责任公司，批号20051206);黄酒(濮阳亚光制药厂)。
1.3药材山萸肉为河南不同产地产品，购自郑州市航海路药材市场，经河南
中医学院鉴定教研室陈随清教授鉴定为山茱萸科山茱萸
CornusofficinalisSieb.etZucc的干燥成熟果肉。
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1.4样品前处理
1.4.1山萸肉的制备取山萸肉原药材检净，去核及果梗，80?低温干燥，打成粗粉，过筛，备用。
1.4.2山萸肉常压制品的制备取山萸肉生品，加入黄酒，闷润，蒸透取出，烘干，打粉，过筛，备用。
1.4.3山萸肉加压酒制品的制备取山萸肉生品，加入黄酒，闷润，高压蒸制，取出，烘干，打粉，过筛，备用。
2方法与结果
2.1样品液的制备取不同产地、不同炮制山萸肉肉饮片粗粉5.0g，置100ml具塞瓶中，准确加入25.0ml水(1?1)溶液，振摇15min，过滤，弃去1/4的初滤液，即得。将试剂盒平衡至室温，用洗涤液洗板2次，洗液不得溢出，每次间隔1min，在吸水纸上拍干，1,3号孔为标准对照孔，其余为样品孔，按所列依次加入配制好的溶液及待测样品稀释液。放置30min，取出反应板，用E洗涤液洗
μl底物液F(a)G板5次，洗液不得溢出，间隔2min/次，拍干。每孔加入50
(b)摇匀，37?放置15min，目测法测定。
表
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1样品液加入黄曲霉素酶联免疫试剂盒操作情况(略)
,3孔颜色，若3号最深，2号次之，1号孔接近无色，2.2结果判断先比较1
说明标准准确，比较样品孔与2号孔的颜色，若浅者，则为阳性，若深者，则为阴性。
2.3仪器法测定每孔分别加入终止液50μl，然后用酶标测定仪在450nm波长处测定各孔的吸光度A值。结果河南产区山萸肉均不有同程度的黄曲霉毒素B1污染，其含量在0.217,7.406μg?kg-1范围内，除实验室陈品中黄曲霉毒素B1含量略高外，其余均在5μg?kg-1以下。
3讨论
3.1山萸肉是茱萸和果实经去核以后的果肉及果皮部分，富含糖类成分。产地加工常用手工和自然干燥方法，加上贮藏保管不当，常常引起发霉。作为贵重药的山萸肉，临床应用或者制备六味地黄丸等中成药生产常常打成粉末应用，因此建立山萸肉饮片的黄曲霉毒素限量标准有一定意义。
3.2山萸肉AFB1定性及含量测定结果表时，山萸肉中含有一定量的AFB1，样品吸光度值超过阳性吸光度值，说明山萸肉中AFB1含量均小于5μg/kg，此限度标准是国家食品标准，因此山萸肉AFB1限度标准可与食品标准通用，即AFB1的含量限度标准初步确定为?5μg/kg，与食品AFB1限度相同。
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3.3山萸肉中黄曲霉毒素B1生品含量和酒炙品含量有一定差别，并且炮制后含量降低，说明炮制对山萸肉中黄曲霉毒素含量有一定影响。但是因为黄曲霉毒素B1是一种耐高温的毒素，一般的炮制方法对其没有彻底破坏作用，因此炮制品中黄曲霉毒素B1的仍有一定含量。
【参考文献】
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,2,宓晓黎，成恒嵩，黄曲霉毒素分析方法研究进展,J,.粮食与饲料工业，1994，10:41.
,3,杜平华，杨晓峰.间接竞争酶联免疫吸附法分析检测中药中黄曲霉毒素B1的研究,J,.药物分析杂志，1995，15(2):34.
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