精浆弹性硬蛋白酶(PMN-Elastase)精浆弹性硬蛋白酶是检测炎症的手段之一,
精浆弹性硬蛋白酶可作为静止型生殖道感染的诊断及愈后检测指标。临床上主要用于检查男性生殖道感染。
精浆弹性硬蛋白酶检测原理
包被于固相载体的抗弹性硬蛋白酶单抗可与精浆中弹性硬蛋白酶相结合,结合的待测物再与特异性酶标记物反应,最后通过底物显色,其吸光度大小与精浆标本中弹性硬蛋白酶浓度相关。
检测步骤
(1)准备适当数量的包被微孔。标准品、稀释标本加样量均为100μl/孔。五个标准品浓度依次为3000、1500、750、375 和0ng/ml(以标本稀释液作为0 标准)。(2)用封片膜封板。以孵育振荡器(350 ~400rpm)室温(18 ~28℃)反应60min。(3)弃去封板膜。洗板:以洗涤液注满微孔,每次浸泡1min,共洗板5 次。扣干。(4)每孔加酶结合物100μl。用封板膜封板。以孵育振荡器(350 ~400rpm)室温(18 ~28℃)反应45min。(5)弃去封板膜。洗板:以洗涤液注满微孔,每次浸泡1min, 共洗板5 次。扣干。(6)每孔加显色液100μl, 室温避光反应20min[显色液临用前配制。
方法
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是:显色剂A: 显色剂B按体积比40: 1混合(如显色剂A 400μl + 显色剂B 10μl),显色液配制后30min 内使用]。(7)每孔加终止液100μl,充分混匀。15min 内上酶标仪双波长450/630nm 比色。
判断标准
判断标准数值:< 290ng /ml, 隐性感染: 290 ~1000ng/ml, 确证感染: > 1000ng/ml。急性炎症时, 弹性硬蛋白酶复合物浓度迅速从正常水平升高超过290ng/ml, 直到炎症被治愈, 否则还是保持高水平。当临床上检查到有微生物感染, 炎症即可被诊断。
精浆生化学
对精浆进行生物化学检测。精浆主要由附属性腺(前列腺、精囊腺、尿道球腺)和附睾的分泌物组成,因此精浆生化检查对评估附属性腺的功能以及研究附属性腺对男性生育的影响有重要意义。常用的精浆生化检查如下。精浆锌测定锌是人体内多种酶的辅酶,参与多种代谢活动。前列腺是体内含锌量最多的器官之一。正常人精浆内锌含量平均为2.1毫克分子/升(1.2~3.8毫克分子/升),为血浆中含量的100倍。这反映精浆锌对维持精子功能活动的重要性。锌含量的测定也反映前列腺的功能。采用比色法测定。精浆锌浓度正常值为一次射精精浆中含锌≥2.4微摩尔。精浆酸性磷酸酶测定酸性磷酸酶作用是催化磷酸酯键水解,它存在于全身各组织,前列腺含量尤为丰富。精浆中酸性磷酸酶几乎全部来自前列腺。前列腺发生病变时,此酶活性可有明显改变。因此,精浆酸性磷酸酶活性是前列腺疾病诊断的实验室指标之一。测定原理,依据精浆中酸性磷酸酶在酸性条件下催化对硝基苯酚磷酸酯水解,使之释放出对硝基苯酚。后者在碱性条件下呈黄色,可用比色法测定。精浆中酸性磷酸酶活性正常范围为80~1000国际单位/毫升。精浆柠檬酸测定精浆中柠檬酸含量较高,几乎全部来源于前列腺。柠檬酸参与维持精浆的渗透压,与精子存活有关。此外它与血清睾酮相关,它的含量也反映血清睾酮水平。精浆中柠檬酸含量测定对检测前列腺功能和男子性功能有一定参考价值。可用紫外比色法测定。一次射精精浆中柠檬酸浓度正常值≥52微摩尔。精浆果糖测定在精液中供精子利用的糖类是果糖。而精浆果糖是由精囊
腺分泌的,受血中睾酮水平的影响。因此精浆果糖测定可用于监测精囊和睾丸间质细胞的功能,还有助于无精症病因的诊断。测定果糖的方法有多种。较为简单且灵敏度高、特异性强的是间苯二酚显色法。其原理是果糖在90℃,酸性环境中与间苯二酚保温,形成一种有色复合物,其颜色深浅与果糖含量成正比。精浆果糖含量正常值为70~500毫克/100毫升。
\果糖
男性不育很多原因都体现在精液方面,所以男性不育患者精液是必查项目,其中精液的检查项目中有一项是精浆中的果糖含量。这一结果对临床诊断有什么意义呢?精浆中的果糖是由精囊腺分泌的,它是供精子利用的主要糖类物质。精囊分泌果糖受血液中睾酮刺激的影响。测定精浆中果糖含量,其目的在以下四个方面:
一、衡量精囊腺的功能,精囊腺炎症时,果糖含量下降;如果糖为零,应考虑精囊腺缺如。
二、鉴别无精子症的病因,目前主要用于鉴别单纯性输精管阻塞和输精管、精囊腺缺如引起的无精子症。前者若精囊腺功能正常,在精浆中仍可测到一定含量的果糖。因为果糖分子量小,尽管输精管阻塞,但小分子果糖仍可通过。而后者精浆中几乎测不到果糖。
三、间接反映睾丸间质细胞分泌睾酮的功能。
四、精浆中果糖是由血液中葡萄糖在精囊转变而成的,如精浆中果糖含量明显高于正常,则应注意排除患者有无糖尿病
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