维生素C的定量测定53560
实验一 维生素C的定量测定
一、实验目的
1、学习维生素C定量测定法的原理和
方法
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2、熟悉、掌握微量滴定法的基本操作技术
二、实验原理
维生素C具有较强的还原性。本实验即利用维生素C的这一性质，使其与2，6一—二氯酚靛酚作用，2，6——二氯酚靛酚钠盐的水溶液呈蓝色;在酸性环境中为玫瑰色，当其被还原时，则脱色。
根据上述反应，利用2，6—二氯酚靛酚在酸性环境中滴定含有维生素C的样品溶液。开始时，样品液中的维生素C立即将滴入的2，6—二氯酚靛酚还原脱色，
，6—二氯酚靛酚就不再被还原脱当样品液中维生素C全部被氧化时，再滴入的2
色而呈玫瑰色。故当样品液用2，6—二氯酚靛酚
标准
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液滴定时，溶液出现浅玫瑰色时表明样品液中的维生素C全部被氧化，达到了滴定终点。此时，
记录
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滴定所消耗的2，6—二氯酚靛酚标准液量，按下述公式计算出样品液中还原型维生素C的含量。
计算公式: (V—V)? S AB
维生素C mg数/100g样品, ?100
W
式中:V为滴定样品提取液所用的2，6—二氯酚靛酚的平均mL数; A
V为滴空白对照所用的2，6-二氯酚靛酚的平均mL数。 B
S 为1mL 2，6—二氯酚靛酚溶液氧化维生素C的mg数。
10mL样品提取液中含样品的g数。 W 为
三、实验用品
1、器材
(1)研钵 (2)吸量管(10mL) (3)容量瓶(50mL) (4)锥形瓶(50mL) (5)微量滴定管(5mL) (6)漏斗
(7)纱布 (8)滤纸 (9)药物天平
2、试剂和材料
(1)绿豆芽 800g (2)10,盐酸溶液 1500mL (3)2，6—二氯酚靛酚溶液 2000mL
称取9.21g碳酸氢钠，0(26g2，6—二氯酚靛酚溶于 250mL蒸馏水中，稀释至1000mL。过滤，装入棕色瓶内，置冰箱内保存，不得超过3天。使用前用新配制的标准抗坏血酸溶液标定。取5mL标准抗坏血酸镕液加入5ml偏磷—醋酸溶液， 然后用2，6—二氯酚靛酚溶液滴定，以生成为微玫瑰红色持续15秒钟不退为终点。计算2，6—二氯酚靛酚溶液的浓度，以每mL 2，6—二氯酚靛酚溶液相当于抗坏血酸的mg数来表示。
(4)标准抗坏血酸溶液
准确称取纯抗坏血酸结晶50mg溶于偏磷酸-醋酸溶液 定容到250mL。装入棕色瓶;贮于冰箱内。
(5)偏磷酸—醋酸镕液
称取偏磷酸15g，溶于40mL冰醋酸和450mL蒸馏水所配成的混合液中。过滤。贮于冰箱内，此液保存不得超过10天。
(6)酸化蒸馏水:每10mL蒸馏水加入10%HCl 1 滴。
四、实验操作
1、制备含维生素C的样品提取液。
称取30g绿豆芽(37?发芽3—7天)置研钵中研磨，放置片刻(约10分钟)，用2层纱布过滤，将滤液(如混浊可离心)滤入50mL容量瓶中。反复抽提2—3次，将滤液并入同一容量瓶中。最后，用酸化的蒸馏水定容，混匀，备用。 2、量取样品提取液10mL于锥形瓶中。用微量滴定管以2，6—二氯酚靛酚溶液滴定样品提取液，呈微弱的玫瑰色，持续5秒钟不退为终点，记录所用2，6—二氯酚靛酚的mL数。整个滴定过程不要超过2分钟。另取10ml用10,盐酸酸化的蒸馏水做空白对照滴定。
样品提取液和空白对照各做三份。计算结果。
思 考 题
试述本实验介绍的2，6—二氯酚靛酚滴定法的优缺点。
浙公网安备 33021202002483