【doc】与利它素分泌相关的桑蚕雌蛾性附腺超微结构研究

【doc】与利它素分泌相关的桑蚕雌蛾性附腺超微结构研究 与利它素分泌相关的桑蚕雌蛾性附腺超微 结构研究 0 . :s三Vol19.N032000—06 文章编号:1000—6281(2000)03—0385—0392 与利它素分泌相关的桑蚕雌蛾 性附腺超微结构研究 业兰目土f.2, ?29)/. (浙江大学军蕊电厩葫31 摘要: 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 文甩扫描电镜和透射电镜对与野蚕黑卵蜂识别刊它素分泌相关的桑蚕雌蛾性附腺分泌部 进行了详细的研究.袁明附腺分泌部中柱形朦上皮分泌细胞的超微结构与其功能具有非常好的一致 性太量发育良好的粗面内质网,南尔基复合体厦具包膜的囊泡袁明这些臃上皮分泌细胞是阿其蛋 白质合成密切相关的,同时太t存在的线拉体和微蛾毛袁明由腺上皮分泌细胞中粗面内质隔合成的 蛋白质在此北分泌入腺腔并分泌很话跃.根据遗射电镜对一系列切片的观察蛄果碧制了附臃分泌郝 腺上皮分泌细胞的超微结构模式目. 关?词:利它素f超微结构:附腺分泌部;桑蚕;野蚕黑卵蜂 分类号:Q336文献标识码;A 利它素是一种在寄生蜂搜寻,识别和接受寄主中起重要作用的化学信息物质.已有研究表明 野蚕黑卵蜂(TelenomustheophHae),一种重要的桑园害虫野桑蚕 (Theophilamandarina)的卵期 寄生蜂,能成功地识别并接受寄主(了1mandarina)卵或人工繁育时的替代寄主(Bombyxmori) 卵,研究发现寄主卵上存在着一种来源于相应雌蛾性附腺分泌物中的利它素能引诱野蚕黑蜂识 别并接受寄主,桑蚕雌蛾性附腺分泌物在蚕种生产中特有的作用,对其性质方面的研究已有报道 (笠井隆善?平泽德荣,1933;有泽宜新,1990),证实为非糖蛋白的蛋白质.高其康和胡萃(1995) 对该利它素的理化特性进行研究发现是附腺分泌蛋白中的一种.性附腺是全变态昆虫中蛹期和 成虫期特有的一种腺器官(Kaulenas,1991~Buning,1994),不同昆虫种类之间性附腺的结构和功 能变化很大,如Fausto(1997)对白蛉(Phlebotomusperniciosus)的雌性性附腺的超微结构进行研 究发现分泌细胞中存在与蛋白合成相关的结构,Noirot和Quennedey(1974)认为有些极性有机 化台物的合成与腺体分泌细胞中诸如滑面内质网等特殊细胞结构有关.尽管对桑蚕雌蛾性附腺 分泌细胞的超微结构未见详细的研究报道,对其性附腺生长发育的组织水平研究已早有描述(铃 术,1937;Omura,1938;迁田,1948)本文用扫描电镜和透射电镜的 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 详细研究野蚕黑卵蜂人 工繁育时的替代寄主桑蚕雌蛾性附腺分泌部细胞的超微结构,以探明与利它素蛋白合成,分泌相 关的细胞结构,为进一步进行利它素蛋白的免疫电镜学研究打下基础 材料与方法 1.材料:具分泌活性的丰交54A桑蚕品种由本校蚕学系提供,不具分泌活性的巴格达(Bagdad) 品种由中国科学院蚕业研究所提供,所需雌蛾性附腺均由初羽成虫在冷的生理盐 水中解剖得到 2.方法:切下从解剖得到的附腺枝状分泌部,在2.5(pH7.0)的戊二醛和1锇酸中进行 双固 定后,部分按常规扫描电镜制样方法进行脱水,cO临界点干燥,把已干燥的附腺分 泌部分枝折 断,令其攒断面朝上粘于扫描样品台上,用IB一5型离子溅射仪喷镀金钯台金,在 KYKY1000B 基盒硪目:浙江省自鼎科学基金和国家自然科学基金资助项日 386电子显微第L9卷 图版】 固1桑蚕附腺分泌部分枝基部横断面的SEM删片,SC:分泌细胞;C:角质层IL:腺 腔;BM:基底膜 Fig-1SEMmicrographofthebasalcrossbreakingp]aneofsecretoryportionbranchoffemale accessorygland 第3期高其康等:与利它素丹泌相关的桑蚕雌蛾性附腺超微结掏研究387 ofB.mori.SC:SecretoryCell;C:Cuticlelayer}I:Iurflem 图2桑蚕附腺近基底膜的分泌细胞区域,*示分泌细胞膜内褶,BM:基底膜. Fig.2RegionofthesecretorycellnearthebasementmembraneoffemaleaccessoryglandofB mori.-Stars showtheinfoldingofsecretorycellrfleItibrane. 图3巴格达品种的附腺近基底膜的分秘细胞区域,BM:基底膜. Fig3Regionofthesecretorycellne~trthebasementmembraneoffemaleaccessoruyglandof Bagdadrace. BM:Basementmembrane.. 图4分泌细胞中粗面内质网(ER),高尔基复台体(G)和具包膜囊孢(V)三者之间的 关系.箭头示两分泌细胞问 的间隙,M:线粒体. Fig.4Therelationshipofroughendoplasmicreticulum(ER)tGolgicomplexes(G)andmemb ranebounded vesiclesinsecretorycel1.Arrowsshowtheintercellularspace.M:mitoehondria. 图5巴格达品种分泌细胞中部区域,:核. Fig5MiddleregionofsecretorycelloffemaleaccessoryglandofBagdadrace.N:nucleus 图6两分泌细胞间的内质网(ER)和高尔基复台体(G)及各形分散的线牲体(M),N: 核 Fig.6Roughendoplasmieretieulum(ER),Golgicomplexes(G】 andvarytypesofmitochondria(M)between twosecretorycells.N:nucleus 圈7桑蚕附腺分泌部分枝横断面的SEM照片,示凝固的柱形分泌物(SM/上的锥状 突起(箭头),lJ:腺腔;SC: 分泌细胞 Fig.7SEMmicrographoftheel-ossbreakingplaneofsecretorycellbranchtwhichshowsthea wl—shaped protubrance(arrowsonthecolumnarcoagulatedofsecretorymaterialsinlumen.L:lumen;S C: secretorycel1. 图8图7的放太,示锥状突起(箭头),SM:分泌物?1腺腔;sc:分泌细胞. Fig.8Partialviewoffig.7inahighermagnification.Arrowsshowawl— shapedprotubrance.SM{secretory materials;L:lumenFSC:secretorycel1. 图版中Bar=500nm(障注明外) 中观察,拍照,加速电压20kV.其余按透射电镜制样方法进行脱水,Epon812包埋,用 UhracutE 型超薄切片机进行系列切片,醋酸铀和柠檬酸铅双染,JEOL一1200EX透射电镜观 察,加速电压 60kV 结果 桑蚕(B.mot/)雌蛾性附腺由其蛹的石渡 后腺发育分化来的,是蛹期和成虫期特有的腺 体,全长约3cm,由一对端部呈树枝状的分泌部 和基部呈管状的贮藏部组成,两贮藏部在基部 合二为一,开口于中输臂,贮藏部中的分物 质随产卵时一起排出(图1).从分泌部分枝折 断后的扫描电镜观察(图版I一1)中可看出,每 一 臂状分枝从外到内分别由近血淋巴侧的一 层基底膜,单层柱状的上皮细胞和近腺腔的一 层较厚角质层组成.具分泌活性的附腺柱状分 泌细胞.其细胞膜在近基底膜内侧形成大量内 褶结构.并与基底膜形成一定的间隙,近内褶 图1桑蚕雌蛾性附腺. F/g.]AccessoryglandoffemaleBomb.H 388电子显微第19卷 的细胞膜处常伴有大小.形状不同的由单层膜包围的囊状体结构,其中可见均一的电子致密物质 (图版I一2),不具分泌活性的巴格达品种.其分泌细胞中无上述结构(图版I3)具分泌活性的 另一特征结构是整个细胞的大部分细胞质中分布着大量的粗面内质网.有的双层膜扩大成囊泡 状,囊泡大小不定,近高尔基复合体时变成最大.其内可见均,的电子致密物质(图版I4);巴达 品种内质网很少.退化呈囊泡状(图版Ij),具分活性的桑蚕品种丰交54A还含有大量的线 粒体,高尔基复合体丰富.多分布于柱形细胞两侧,即两柱形细胞相接处,整个高尔 基复合体呈球 形,周围被内质网所包围.并形成粗面内质网和高尔基复合体的联合体,以完成蛋 白质肽段的进 一 步修饰和分泌(图版I4.6);在粗面内质网丰富区域线粒体呈分散分布状态,且形态 各异在 近基底膜侧的两分泌细胞之间常有间隙存在.且其中也可见电子致密物(图版I4). 从腺附横断面中人为断裂时在腺 腔中留下的分泌物来看,分泌部区的分 枝其腺腔并不是简单的管状结构.而是 一 个与每一分泌细胞有进一步联系的 分枝状腺腔组成.图版(I一7,8)提供了 上述假设的证据,我们可发现腺腔中因 固定而凝固收缩的分泌物外表面具有 大量柱形剌突,且基部较端部粗透射 电镜对该部位系列超薄切片的进一步 观察发现,柱状分泌细胞在近腺腔一侧 的区域内存在与蛋白质从细胞内向细 胞外分泌有关的独特结构,大量存在的 线粒体群及丰富的微绒毛(图版I1; 而巴格达品种在该区域线粒体很少,未 见微绒毛(图版?2).具分泌活性的丰 交54A的分泌细胞中由大量微绒毛所 围成的贮液囊中也可观察到与囊泡中 相似的,均一的电子致密物质透射电 镜观察中发现丰交54A的分泌细胞腺 腔分枝的端部与微绒毛相接区域不存 在角质层(图版I3),随着切片从腺腔 分枝的端部向其基部进行,腺腔壁逐渐 形成,但角质化程度不高(图版?5),但 在接近腺腔分枝基部时,腺腔壁突然加 厚,角质化程度很高(图版?一4),腺腔基 部的横切面除了腺腔分枝内径增粗外. 角质层没有进一步增厚(图版I一6),图 罔2桑蚕雌蛾性附腺分秘细胞的超微结构模式. Fig.2Ultrastructuralmodelofsecretorycellofaccessory glandof~'emale上i.morf 第3期高其康等:与利它素分秘相关的桑蚕雌蛾性附腺超微结构研究389 图版I 图1分泌细胞贮液囊区域中大量的线粒体M)和微缴毛(M】] FL.1Manymitochondria(M)andmicroviilirMI)inreservo[1reiqonofsecretorycel 390电子显微第19卷 国2巴格达品种分招细胞贮藏囊区域,M线粒体. Fig.2ReservoirregionofsecretorycellofBagdadFaceM:mitochondr[a. 图3分泌细胞贮液囊内腺腔分技(BL)端部与微绒毛(MI).SM:分物R:贮渍囊= Fig.3Topofbranchedlumen(BL)andm[crovilli(MI)inreservoirofsecretorycel1.SM:secre torymaterials; R:reservior 图4分泌细胞的腺腔分枝(BL)颈部横切面,c;角质层;SM:分泌物;M:线粒体;L:腺腔. Fig.4Thecrosssectionofcervicalpartofbranchedlumen(BI)ofsecretorycel1.C:Cuticlelay er}SM:ecretory materials;M:mitochondria;L:lumen. 图5分泌细胞中腺腔分枝(BL)端部和颈部之间的横切面,R:贮渣囊;MI:微绒毛. Fig5TheCROSSsectionofbetweenapicalandcervicalpartofbranchedlumeninsecretoryce l1.R:reservior; MI.microvilli. 图6分泌细胞中腺腔分枝基部的横切面,c:角质层:BL:腺腔分枝{SM:分泌物 Fig.6Thecrosssectionofbasalpartofbranchedlumeninsecretorycel1.C:cuticlelayer;BL{b ranchedlumen: SM{secretorymaterials. 图7腺腔分枝基部的近纵切面,示漏斗状的腺腔分枝(BL),L:腺腔{c:角质层}sM:分泌物;M:线粒体 Fig7Thenearlongitudinalsectionolbasalpartofbranchedlumen,whichshowthefunnel—formbranched lumen(BL).I:lumenlC:cuticlelayer{SM:secretorymaterials:M:mitochondria. 囝8附腺分枝中腺腔的一部分,sM:分秘韧;c:角质层. Fig.8Partoflumenofsecretoryportionbranchoffemaleaccessorygland.SM:secretorymate rials;C:cuticle layer. 图版中Bar=500rim(除注晴外) 版(?一7)是腺腔分枝基部的近纵切面,整个腺腔分枝似基部粗,端部细的柱形漏斗状结构,其角 质层在漏斗及近颈部较厚.其厚度与腺腔壁一致角质层从厚到薄之间的变化是陡然的,这与攒 切面观察到的变化吻合.同时也发现腺腔中分泌物固定包埋后与腺腔壁分离,这也就是在扫描电 镜观察中能看到腺腔中残留的柱状具刺突凝固的分泌物,正好似从模具中复制出来一样.从总的 电镜观察中.可发现无论是由膜包围的囊泡内物质和贮液囊中的物质,还是最终腺腔中的分泌物 (图版?一8)都是均一的,电子致密程度较一致的物质,这预示着附腺分泌物是同一类性质物质. 讨论 在桑蚕品系中,存在粘着卵品系(附腺具分泌功能)和不粘着卵品系(附腺分泌功能退化)本 研究中丰交54A是附腺发育良好且能分泌大量粘着物质的桑蚕品种,而巴格达则是附腺发育不 好,分泌细胞退化,明显萎缩并基本不分泌的桑蚕品种.这对我们对附腺分泌细胞进行比较性研 究提供了很好的材料,本研究证实这两品系的附腺分泌细胞的超微结构存在很大差异.粗面内质 网,高尔基复合体,线粒体群等在巴格达品种中很难观察到(图版I3),从反面进一步证实了结 构和功能的密切关系.在近基底侧的分泌细胞膜形成大量内褶及分泌细胞问产生的空隙能增加 分泌细胞与血淋巴中有用物质的接触面,有利于短时间内的大量吸收,为附腺分泌细胞在合成分 第3期高其康等:与利它紊分泌却1关的桑蚕雎蛾性咐腺超微结构研究39J 泌物时,需从血淋巴中吸取大量的氨基酸t有泽宜幸等.1990;姚祥等.1993)提供lr形态上的佐 汪对附腺分泌物质的性质 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 发现这一分泌物是由不同分子量大小的蛋白质组成(有泽宜幸 等,I990),附腺的蛋白质的合成,分泌是与卵巢发育产卵密切相关的由于桑蚕产卵历程的短暂. 要求附腺分泌细胞在较短时间内要台成大量蛋白质供卵牯着用,有泽宜幸(1990)发现桑蚕附腺 贮藏部的蛋白质含量羽化当天是化蛹后6天的28倍,所有的这些仅在4天中完成-这些就是整 个附腺分泌细胞中存在大量粗面内质网和高尔基体的原因 在柱状腺分泌细胞近腺腔的1/3区域,存在大量线粒体和微绒毛这些结构预示着从粗面内 质网合成,经高尔基复台体再加工修饰后的蛋白质在此处进行着极其活跃的细胞分泌活动-大量 的线粒体提供了分泌所需的能量.微绒毛的存在大大扩展r细胞膜的表面积.使得在短时期内台 成的大量蛋白质及时分泌人腺腔成为可能深A分泌细胞中的腺腔分枝进一步扩展了分泌收集 贮藏的功能. 综合以上结果,笔者对桑蚕雌蛾性附腺分泌细胞的超微结构进行了分析和归纳.绘成了如图 2所示的附腺分泌细胞超微结构模式图.它体现附腺分泌物的吸收,合成和分泌相适应的整体 显微结构. 有关利它素的分泌台成的细胞免疫胶体金标记定位目前正在进行中.已进一步明确利它素 台成和分泌与分泌细胞超微结构的关系 参考文献 [1]笠井隆普?平泽德荣.蚕丝,l933,l5(9). 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Keywords}kairomone{ultrastructure{accessorygland,Bombya,Telenomustheophilae