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保健食品功效成份检测方法粗多糖的检测方法.doc

保健食品功效成份检测方法粗多糖的检测方法

fanguohui141
2018-09-07 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《保健食品功效成份检测方法粗多糖的检测方法doc》,可适用于社会民生领域

粗多糖的检测方法、方法提要中国药品保健食品网wwwchndrugcom    食品中相对分子质量>×的高分子物质在乙醇溶液中沉淀与水溶液中单糖和低聚糖分离用碱性二价铜试剂选择性地从其他高分子物质中沉淀具有葡聚糖结构的多糖用苯酚硫酸反应以碳水化合物形式比色测定其含量其显色强度与粗多糖中葡聚糖的含量成正比以此计算食品中粗多糖含量。中国药品保健食品网wwwchndrugcom、主要仪器中国药品保健食品网wwwchndrugcom()分光光度计。中国药品保健食品网wwwchndrugcom()离心机(rmin)。中国药品保健食品网wwwchndrugcom()旋转混匀器。中国药品保健食品网wwwchndrugcom、试剂 中国药品保健食品网wwwchndrugcom   本方法所用试剂除特殊注明外均为分析纯所用水为去离子水或同等纯度蒸馏水。中国药品保健食品网wwwchndrugcom()乙醇溶液():mL水中加入无水乙醇mL混匀。中国药品保健食品网wwwchndrugcom()氢氧化钠溶液(gL):称取g氢氧化钠加水溶解并稀释至L加入固体无水硫酸钠至饱和备用。中国药品保健食品网wwwchndrugcom()铜试剂储备液:称取gCuSO·HOg柠檬酸钠加水溶解并稀释至L混匀备用。中国药品保健食品网wwwchndrugcom()铜试剂溶液:取铜试剂储备液mL加水mL混匀后加入固体无水硫酸钠g并使其溶解。临用新配。中国药品保健食品网wwwchndrugcom()洗涤剂:取水mL加入mL铜试剂溶液、mL氢氧化钠溶液混匀。中国药品保健食品网wwwchndrugcom()硫酸溶液():取mL浓硫酸加入到mL左右水中混匀冷却后稀释至L。中国药品保健食品网wwwchndrugcom()苯酚溶液(gL):称取精制苯酚g加水溶解并稀释至mL混匀。溶液置冰箱中可保存个月。中国药品保健食品网wwwchndrugcom()葡聚糖标准储备液:准确称取相对分子质量×已干燥至恒重的葡聚糖标准品g加水溶解并定容至mL混匀置冰箱中保存。此溶液 mL含mg葡聚糖。中国药品保健食品网wwwchndrugcom()葡聚糖标准使用液:吸取葡聚糖标准储备液mL置于mL容量瓶中加水至刻度混匀置冰箱中保存。此溶液mL含葡聚糖mg。中国药品保健食品网wwwchndrugcom、测定步骤中国药品保健食品网wwwchndrugcom()样品处理:中国药品保健食品网wwwchndrugcom     a、沉淀粗多糖:准确吸取液体样品mL置于mL离心管中加入无水乙醇mL混匀min后以rmin离心min弃去上清液反复操作~次。残渣用水溶解并定容至mL混匀后供沉淀葡聚糖。 中国药品保健食品网wwwchndrugcom    b、沉淀葡聚糖:准确吸取b项终溶液mL置于mL离心管中加入gL氢氧化钠溶液mL铜试剂溶液mL沸水浴中煮沸min冷却以rmin离心min弃去上清液。残渣用洗涤液数毫升洗涤离心后弃去上清液反复操作次残渣用(体积分数)硫酸溶液mL溶液并转移至mL容量瓶中加水稀释至刻度混匀。此溶液为样品测定液。中国药品保健食品网wwwchndrugcom()标准曲线的绘制:准确吸取葡聚糖标准使用液、、、、、、mL(相当于葡聚糖、、、、、、mg)分别置于mL比色管中准确补充水至mL加入gL苯酚溶液mL在旋转混匀器上混匀小心加入浓硫酸mL于旋转混匀器上小心混匀置沸水浴中煮沸min冷却后用分光光度计在nm波长处以试剂空白溶液为参比cm比色皿测定吸光度值。以葡聚糖浓度为横坐标吸光度值为纵坐标绘制标准曲线。中国药品保健食品网wwwchndrugcom()样品测定:准确吸取样品测定液mL置于ml比色管中加入gL苯酚溶液mL在旋转混匀器上混匀小心加入浓硫酸mL于旋转混匀器上小心混匀置沸水浴中煮沸min冷却至室温用分光光度计在nm波长处以试剂空白为参比cm比色皿测定吸光度值。从标准曲线上查出葡聚糖含量计算样品中粗多糖含量。同时做样品空白实验。中国药品保健食品网wwwchndrugcom、结果计算中国药品保健食品网wwwchndrugcom   (mm)×V×V×V中国药品保健食品网wwwchndrugcomX=       中国药品保健食品网wwwchndrugcom    m×V×V×V式中  中国药品保健食品网wwwchndrugcomX样品中粗多糖含量(以葡聚糖计)(mgg)      中国药品保健食品网wwwchndrugcomm样品测定液中葡聚糖的质量(mg)      中国药品保健食品网wwwchndrugcomm样品空白液中葡聚糖质量(mg)  中国药品保健食品网wwwchndrugcomm样品质量(g)      中国药品保健食品网wwwchndrugcomV 样品提取液总体积(mL)      中国药品保健食品网wwwchndrugcomV沉淀粗多糖所用样品提取液体积(mL)      中国药品保健食品网wwwchndrugcomV 粗多糖溶液体积(mL)      中国药品保健食品网wwwchndrugcomV沉淀葡聚糖所用粗多糖溶液体积(mL)      中国药品保健食品网wwwchndrugcomV样品测定液总体积(mL)      中国药品保健食品网wwwchndrugcomV测定用样品测定溶液体积(mL)。中国药品保健食品网wwwchndrugcom、准确度与精密度在不同食品中进行不同浓度的加标回收实验回收率为~不同实验室对同一样品进行次测定结果的相对标准偏差为。

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