东莞常平医院
临床检验实验室
文件编号:
DGCPH-CL-SOP-07-02
血红蛋白测定[ Hgb ]
版序:2005-1
页码:第1 页,共2 页
[测定原理]
血红蛋白被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白,再与氰离子(cn-)结合,生成稳定的氰化高铁血红蛋白(hemiglobim cyanide,简写HiCN) 。氰化高铁血红蛋白在波长540nm处有吸收峰,可用校准确的高精度分光光度计进行直接定量测定,或用HiCN参考液进行比色法测定。
[试剂及仪器]
1,试剂:
HiCN试剂的配法:
氰化钾 50mg
高铁氰化钾 200mg
无水磷酸二氢钾 140mg
Triton X-100 1.0ml
蒸馏水 加至1000ml
纠正pH至 7.0-7.4
此液为淡黄色透明溶液,用蒸馏水调零,比色杯光径1.000cm,波长540nm处的吸光度应为零。贮存在棕色有塞玻璃瓶中,放4°C冰箱保存.一般可用数月。
2,仪器:
(1) 一次性微量吸管。
(2) 721型分光光度计。
[
标准
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品]
人标准血红蛋白液(卫生部临床检验中心)
[质控品]
COULTER ACT 4C PLUS全血质控品。(血液细胞自动化
分析
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仪介绍)
[标本采集]
未梢血或静脉血用EDTA-K2 抗凝。
凝集,血量小于0.4 ML或抽血时间超过四小时为不合格标本,拒收。
[操作步骤]
⒈取充分混匀的全血20ul,标准品分别加到5mlHiCN试剂中,充分混和,静置5min。
⒉分光光度计 (常规测定时带宽应小于6 nm),波长540nm处,光径 (比色杯内径) 1.0 cm,以HiCN试剂或蒸馏水调零,测定吸光度(A)。
东莞常平医院
临床检验实验室
文件编号:DGCPH-CL-SOP-07-02
血红蛋白测定[ Hgb ]
版序:2005-1
页码:第2 页,共2 页
[计算结果]
1,血红蛋白(g/L)=测定管吸光度×64458×251/44000
=测定管吸光度×367.7
2,血红蛋白(g/L)=(测定管吸光度/标准管吸光度)×标准浓度(g/L)
[质量控制]
1. 每天检测工作前后,清洁仪器表面,确保仪正常进行。
2. 每天利用三水平质控品与标本同步进行室内质控一次,及时查找失控原因并纠正。
3. 在工作中,当发现标本某些检测结果项出现倾向性结果时,必须重新进行一次室内质控制,找出和排除原因。
4. 抽查微量吸管质量,确保采样准确。
5. 定期更新标准品,检测标准品质量。
6. 操作人员必须经过培训,能熟练掌握各操作步骤。
[参考范围]
男:120-160g/L
女:110-150g/L
[临床意义]
血红蛋白浓度测定(HGB)临床意义与红细胞的基本相同,一般情况下红细胞数与血红蛋白浓度之间有一定的比例关系,但在部份贫血患者,二者数值的比值与正常人的比值有一定的差异,这些差异对贫血诊断和鉴别诊断有帮助。