宁波市北仑区
柴桥医院血库
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操作程序
文件名
聚凝胺交叉配血试验
文件编号
CQXK-005
版本号
2006版
1. 原理:红细胞
表
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面存在Zeta电位,该电位使红细胞之间有排斥作用,凝聚胺技术首先利用低离子溶液(LIM)降低红细胞表面的Zeta电位,促进红细胞与血清中的抗体结合。其后加入凝聚胺(Polybrene)溶液,它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂,溶解后能产生很多正电荷,使红细胞产生非特异性的凝集。最后加入悬浮液(Resuspending),悬浮液具有中和凝聚胺的作用,使正常红细胞的非特异性凝集散开,试验结果为阴性。如果红细胞被相应的抗体致敏,则会被凝聚胺凝集,凝集就不会散开,试验结果为阳性。
2. 试剂来源:聚凝胺试剂由珠海贝索生物技术有限公司生产。具有三证。
3. 测定方法:聚凝胺交叉配血试验,具体操作如下:
1、 取两支试管标好主次侧,主侧加受血者血清二滴后再加供血者3—5%经细胞悬液1滴,次侧加供血者血清二滴后再加受血者3-5%红细胞悬液1滴。
2、 各加LIM 0.6ml,混均后再加Polybrene溶液二滴,再混均后3200 rpm离心15秒,把上清液倒掉但不能沥干,让管底残留约0.1ml液体。
3、 轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重做。
4、 最后加入Resuspending 二滴,轻轻转动试管混合并同时观察结果。如果在30秒内凝集散开,说明是非特异性凝集,配血结果相合,如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体特异性的反应,配血结果不相合,如反应可疑,可进一步倒在玻片上用显微镜观察。
4. 参考值:凝集散开为阴性,不散开为阳性。
5. 临床意义:用于临床交叉配血,用此法配血可发现盐水法不能发现的抗原抗体反应。
6. 注意事项:
1、 若病人血清(血浆)含肝素,如洗肾患者,须多加4—6滴polybrene 溶液以中和肝素。
2、 在冬天室温极低的情况下,某些病人血清中可能含有冷凝集素等因素,而导致假阳性的结果,建议在最后滴入Resuspending时立即将试管置入37度水浴箱中,轻轻转动试管混合,并在30秒内观察结果。
编写人
审核人
批准人
生效日期
李永新
史苗年
史苗年
2006年6月1日