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vero细胞毒素酶联免疫分析.doc

vero细胞毒素酶联免疫分析

壹個人孤單落寞
2019-02-25 0人阅读 举报 0 0 0 暂无简介

简介:本文档为《vero细胞毒素酶联免疫分析doc》,可适用于医药卫生领域

vero细胞毒素酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。检测范围:                            Tpgmlpgml使用目的:本试剂盒用于测定相关液体样本中vero细胞毒素含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中vero细胞毒素水平。用纯化的vero细胞毒素抗体包被微孔板制成固相抗体往包被单抗的微孔中依次加入vero细胞毒素再与HRP标记的vero细胞毒素抗体结合形成抗体抗原酶标抗体复合物经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的vero细胞毒素呈正相关。用酶标仪在nm波长下测定吸光度(OD值)通过标准曲线计算样品中vero细胞毒素浓度。试剂盒组成倍浓缩洗涤液ml×瓶终止液ml×瓶酶标试剂ml×瓶标准品(pgml)ml×瓶酶标包被板孔×条标准品稀释液ml×瓶样品稀释液ml×瓶说明书份显色剂A液ml×瓶封板膜张显色剂B液ml×瓶密封袋个      标本要求.标本采集后尽早进行提取提取按相关文献进行提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验可将标本放于℃保存但应避免反复冻融.不能检测含NaN的样品因NaN抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。pgml号标准品μl的原倍标准品加入μl标准品稀释液pgml号标准品μl的号标准品加入μl标准品稀释液pgml号标准品μl的号标准品加入μl标准品稀释液pgml号标准品μl的号标准品加入μl标准品稀释液pgml号标准品μl的号标准品加入μl标准品稀释液   加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样μl待测样品孔中先加样品稀释液μl然后再加待测样品μl(样品最终稀释度为倍)。加样将样品加于酶标板孔底部尽量不触及孔壁轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置℃温育分钟。 配液:将倍浓缩洗涤液用蒸馏水倍稀释后备用洗涤:小心揭掉封板膜弃去液体甩干每孔加满洗涤液静置秒后弃去如此重复次拍干。加酶:每孔加入酶标试剂μl空白孔除外。温育:操作同。洗涤:操作同。显色:每孔先加入显色剂Aμl再加入显色剂Bμl轻轻震荡混匀℃避光显色分钟终止:每孔加终止液μl终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标OD值为纵坐标在坐标纸上绘出标准曲线根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度再乘以稀释倍数或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式将样品的OD值代入方程式计算出样品浓度再乘以稀释倍数即为样品的实际浓度。注意事项.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡分钟后方可使用酶标包被板开封后如未用完板条应装入密封袋中保存。.浓洗涤液可能会有结晶析出稀释时可在水浴中加温助溶洗涤时不影响结果。.各步加样均应使用加样器并经常校对其准确性以避免试验误差。一次加样时间最好控制在分钟内如标本数量多推荐使用排枪加样。.请每次测定的同时做标准曲线最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值)请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×)。.封板膜只限一次性使用以避免交叉污染。.底物请避光保存。.严格按照说明书的操作进行试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期.试剂盒保存:℃。.有效期:个月

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