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成脂培养液与成骨培养液的配制方法

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成脂培养液与成骨培养液的配制方法成脂诱导液 ◆溶质混合液 ★成脂诱导液终剂量需要多少混合液(即“◆溶质混合液”溶入多少DMEM中) ▲溶质 ●溶剂 ◆混合液终浓度 1ml DMEM 50ml DMEM 100ml DMEM 150ml DMEM 250ml DMEM ①吲哚美辛 甲醇 200μmol/ml 5μl 250μl 500μl 750μl 1250μl ②IBMX DMSO 0.5mmol/ml 10μl 500μl 1000μl(1ml) 1500μl 2500μl ③胰岛素 2mol盐酸 10μg/ml 2μl 100μl 200μ...

成脂培养液与成骨培养液的配制方法
成脂诱导液 ◆溶质混合液 ★成脂诱导液终剂量需要多少混合液(即“◆溶质混合液”溶入多少DMEM中) ▲溶质 ●溶剂 ◆混合液终浓度 1ml DMEM 50ml DMEM 100ml DMEM 150ml DMEM 250ml DMEM ①吲哚美辛 甲醇 200μmol/ml 5μl 250μl 500μl 750μl 1250μl ②IBMX DMSO 0.5mmol/ml 10μl 500μl 1000μl(1ml) 1500μl 2500μl ③胰岛素 2mol盐酸 10μg/ml 2μl 100μl 200μl 300μl 500μl ④地塞米松 去离子水 1μmol/ml 1μl 50μl 100μl 150μl 250μl 溶质分子量大的大小 ★成脂诱导液终剂量需要多少溶质(即“▲溶质的质量”溶入多少DMEM中) ①吲哚美辛 357.79g/mol ②IBMX 222.24 g/mol ③胰岛素 ④地塞米松 391 g/mol 配液步骤: 1,​ 领物品:无血清培养液,胎牛血清,(①吲哚美辛混合液,②IBMX混合液,③胰岛素混合液,④地塞米松混合液)。 2,​ 抽取30ml无血清培养液,加入小培养瓶中,加入①吲哚美辛混合液,再加入②IBMX混合液,再加入③胰岛素混合液,最后加入④地塞米松混合液。注:①②③④添加顺序不能变。 3,​ 将上步30ml混合液测PH浓度,并通过NaOH溶液调整至PH7.2---7.3左右。 4,​ 将30ml混合液用针头滤器过滤后加入最终的无血清培养液中,添加血清至所需的血清浓度。 备注:第二步中顺序不能变。 配液成功颜色偏黄,纯液体。配液失败出现絮状沉淀,类似果粒橙。 成骨诱导液 成分 配制浓度 溶质 溶剂 β-甘油磷酸钠(两种分子量) 无血清DMEM 306.11g/mol 216.04g/mol 溶质 溶剂 地塞米松 无血清DMEM 溶质 溶剂 Vc 无血清DMEM
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