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双水相萃取技术在分离_纯化中的应用.pdf

双水相萃取技术在分离_纯化中的应用

贼爱飞
2011-10-07 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《双水相萃取技术在分离_纯化中的应用pdf》,可适用于工程科技领域

第卷第期化工技术与开发VolNo年月TechnologyDevelopmentofChemicalIndustryAug综综述述与与进进展展双水相萃取技术在分离、纯化中的应用谭志坚李芬芳邢健敏(中南大学化学化工学院湖南长沙)摘要:双水相技术是一种新型的液液萃取技术由于其条件温和、易操作等特点目前已广泛应用于物质的分离、纯化。本文综述了双水相形成原理、工艺流程和特点、体系类别、影响双水相分配的因素及其在分离纯化中的应用并针对其未来发展趋势进行了展望。关键词:双水相萃取分离纯化应用中图分类号:TQ文献标识码:A文章编号:()基金项目:国家自然科学基金(项目编号:)通讯联系人:李芬芳()女湖南邵阳人教授博士生导师研究方向:植物活性成分提取及分离纯代Email:lfflggmailcsueducn收稿日期:与传统的分离技术相比双水相技术作为一种新型的分离技术因其体积小处理能力强成相时间短适合大规模化操作等特点已经越来越受到人们的重视。Beijeronck在年将琼脂水溶液与可溶性淀粉或明胶水溶液混合发现了双水相现象。双水相萃取(Aqueoustwophaseextraction,ATPE)技术真正应用是在世纪年代年瑞典伦德大学的Albertsson将双水相体系成功用于分离叶绿素这解决了蛋白质变性和沉淀的问题。年德国Kula等人将双水相萃取分离技术应用于生物酶的分离为以后双水相在应用生物蛋白质、酶分离纯化奠定了基础。迄今为止被成功应用于生物医药工程天然产物分离纯化金属离子分离等方面~。因其广泛的应用性已经发展成为一种相对成熟的技术但仍有很大潜在的价值等待我们去开发。双水相的形成双水相的形成机理将种不同的水溶性聚合物水溶液(或聚合物与一定浓度的盐溶液)混合时当聚合物浓度(或盐的浓度)达到一定值体系会自然分成互不相溶的两相这就是双水相体系。双水相体系的形成主要是由于高聚物之间的不相溶性一般认为只要两聚合物水溶液的憎水程度有所差异混合时就可发生相分离且憎水程度相差越大相分离倾向也就越大。双水相体系的特点双水相萃取与传统的水有机溶剂萃取时一样的都是利用物质在两相间的分配系数不同来实现分离的。但是与传统萃取相比双水相有其独特之处~:()两相的溶剂都是水上相和下相的含水量高达~(ww)不存在有机溶剂残留问题。条件很温和常温常压操作不会引起生物活性物质失活或变性()两相界面张力小仅为~Nm(普通体系为~Nm)双水相的两相差别(如密度、折射率)相差很小萃取时两相能够高度分散传质速度快但也引起乳化现象()溶剂对目标组分选择性强大量杂质能与所有固体物质一同除去使分离过程简化易于工业放大和连续操作()分相时间短常温常压下自然分相时间一般为~min()目标产物的分配系数一般大于大部分情况下目标产物的收率较高()聚合物的浓度、无机盐的种类和浓度以及体系的pH值等多种因素都可以对被萃取物质在两相的分配产生影响因此可以利用多种手段来使反应达到最佳条件()该体系可以处理以固体微粒形式出现.化工技术与开发第卷的样本。因其大多是由一定量的聚乙二醇和盐构成因此也比较经济。双水相的种类最常见的双水相体系是聚乙二醇(PEG)葡聚糖(Dextran)和PEG无机盐(硫酸盐、磷酸盐等)体系。双水相按组成一般分为:聚合物聚合物聚合物低分子量组分聚合物无机盐高分子电解质高分子电解质以及新出现的研究比较热门的温度诱导表面活性剂等双水相体系~详见表。表常见双水相萃取溶液体系的类型Tablecommonaqueoustwophaseextraction类型上相组成下相组成聚合物聚合物聚乙二醇聚丙二醇聚蔗糖甲基纤维素聚乙烯醇葡聚糖甲基聚丙二醇聚乙烯醇葡聚糖葡聚糖羟丙基葡聚糖葡聚糖聚合物低分子量组分葡聚糖丙醇聚丙烯乙二醇磷酸钾等聚合物无机盐聚乙二醇铵磷酸钾硫酸钾硫酸镁硫酸高分子电解质高分子葡聚糖硫酸钠羧甲基葡聚糖钠盐羧甲基纤维素钠盐电解质羧甲基纤维素钠盐离子液体双水相水性离子液体BMImCl、HMImCl、OMImCl、BPyCl、TBACl等KPO、KHPO、NaHPO、(NH)SO、KCO等温度诱导双水相EOPO等KHPO、NaHPO等表面活性剂双水相阳离子TTAC、CPC、CNE等阴离子SDBS、SDS等双水相的萃取原理工艺流程及其影响因素双水相的萃取原理双水相体系萃取分离原理与基本的液液萃取是一样的是基于物质在双水相体系中的选择性分配。当物质进入双水相体系后在上相和下相间进行选择性分配这种分配关系与常规的萃取分配关系相比表现出更大或更小的分配系数。当物质进入双水相体系后由于表面性质、电荷作用和各种力(如憎水键、氢键和离子键等)的存在和环境的影响使其在上、下相中的浓度不同。其分配规律服从Nernst分配定律即K=CtCb其中分别为上相和下相的浓度K为分配系数。各种物质的分配系数K是不一样的因而双水相体系对生物物质的分配具有很大的选择性。工艺流程考虑到双水相技术用于分离纯化以及回收再利用方面我们大概将其工艺流程分为个方面:目的产物的萃取PEG的循环无机盐的循环。以分离细胞中蛋白质为例其工艺流程图见图。PEG盐萃取液ATPE上相(产物)下相(废料)ATPE上相(PEG、杂蛋白)下相(目标产物)PEG循环反应器+盐图双水相萃取工艺流程图FigThetechnicalprocessofaqueoustwophaseextraction()目标产物的萃取。把细胞的匀浆液倒入由PEG和(NH)SO组成的双水相体系中然后让其静置分层等体系稳定后蛋白质将分配到上相即PEG相。而细胞碎片、核酸、纤维素等分配到了下相即(NH)SO相然后把上下相分离。接着是把目标蛋白质转移到盐相方法是在上相中加入盐形成新的双水相体系从而将蛋白质与PEG分离以利于使用超滤或透析将PEG回收利用和目标产物的进一步加工处理。()PEG的循环。在进行工业上大规模分离纯化操作时要特别注意原料的回收利用这样既有利于环保又节约了成本。PEG的回收有两种方法:一种是加入盐使目标蛋白质转入富盐相来回收另一种是将PEG相通过离子交换树脂用洗脱剂先洗.谭志坚等:双水相萃取技术在分离、纯化中的应用第8期去PEG再洗出蛋白质。常用的方法是将第一步萃取的PEG相或除去部分蛋白质的PEG相循环利用。()无机盐的循环。将盐相冷却结晶然后用离心机离心进行分离回收。其它方法有电渗析法、膜分离法回收盐类或除去PEG相的盐。影响双水相平衡的主要因素~影响双水相萃取平衡的主要因素有:组成双水相体系的高聚物类型、高聚物的平均分子量和分子量分布、高聚物的浓度、成相盐和非成相盐的种类、盐的离子浓度、pH值、温度等。不同聚合物的水相系统显示出不同的疏水性聚合物的疏水性按下列次序递增:葡萄糖硫酸盐糖<葡萄糖<羟丙基葡聚糖<甲基纤维素<聚乙二醇<聚丙三醇这种疏水性的差异对目的产物互作用是重要的。PEG分子量:同一聚合物的疏水性随分子量的增加而增加这是由于分子链的长度增加其所包含的羟基减少。两相亲水差距越大其大小的选择性依赖于萃取过程的目的和方向。对于PEG聚合物若想在上相收率较高应降低平均分子量若想在下相收率较高则增加平均分子量。pH值:()pH值会影响蛋白质分子中可解离集团的解离程度因而改变蛋白质所带的电荷的性质和大小这是与蛋白质的等电点相关的()pH值能改变盐的解离程度(如磷酸盐)进而改变相间电位差。萃取温度:温度首先影响相图在临界点附近尤为明显。但当远离临界点时温度影响较小。大规模生产常在常温操作但较高升温还是有利于降低体系黏度利于分相。无机盐浓度:盐的正、负离子在两相间分配系数不同两相间形成电位差从而影响带电生物大分子的分配。无机盐浓度的不同能改变两相间的电位差。双水相技术在分离纯化中的应用双水相技术作为一种生化分离技术由于其条件温和易操作等特点因此可调节因素较多并且可融合传统溶剂萃取的成功经验使其成为一种生物工程下游初步分离的方法。由于传统的的有机溶剂萃取容易使生物大分子(如蛋白质和酶)失活在双水相发展早期人们致力于把双水相技术应用于蛋白质等的分离纯化从而大大降低其变性的可能性。目前双水相萃取技术已成功应用到蛋白质、酶、核酸、氨基酸、抗生素以及生物小分子等的分离纯化。近些年来双水相萃取技术得到很大的发展产生了许多新型的体系并且在天然产物金属离子分离纯化等方面也具有广泛的应用。在提取酶和蛋白质中的应用这是双水相体系研究和应用最多的方面对发酵液、细胞培养液、植物、动物组织中细胞内、外的酶和蛋白质均可提取。工业上已有几种双水相体系用于从发酵液中分离提取蛋白质和酶绝大多数是用PEG作上相成相聚合物葡聚糖、盐溶液和羟甲基淀粉的其中一种作下相成相物质。GiselaTubio,GuillermoA等利用PEG柠檬酸钠双水相体系从牛胰腺中萃取胰蛋白酶。实验探讨从α胰凝乳蛋白酶中分离胰蛋白酶的最佳条件然后将其应用到从牛胰腺中分离胰蛋白酶。实验最佳条件为:PEG(ww)与柠檬酸钠组成双水相体系在pH值为时具有最佳分配性能。增加NaCl的浓度到以及减少相比到时能在上相获得的胰蛋白酶是纯化前的倍。胰蛋白酶质量浓度增大到整个体系的(ww)时对产率和纯化因子都没有特别大的影响。因此能证明该双水相的灵活性以及将其应用到规模生产的前景。SaroteNitsawangRajniHattiKaul等利用(ww)的PEG及(ww)的(NH)SO组成的双水相体系从番木瓜乳浆中萃取木瓜蛋白酶这种方法能在较短的时间内获得高纯度的木瓜蛋白酶并且不会破坏酶的成分同时在分离时可以直接使用木瓜胶乳而不需要除去其它可溶性的物质这种更快更简单以及稳定性好的方法能大规模地应用到木瓜蛋白酶的萃取当中去。NatáliaLuizaPennaDallora用PEG和氨基甲酸铵形成的双水相萃取目标蛋白。实验研究了牛乳蛋白酶(BSA)胰蛋白酶溶解酶种蛋白质在不同质量分数PEG()和氨基甲酸铵形成的双水相体系中的分配行为。实验得出了种蛋白酶在不同体系中的分配系数牛乳蛋白酶的分配系数在~胰蛋白酶在~溶解酶在~之间变化。其结果与聚合物分子量及节线长度有很大的关系。从实验结果得出的各种蛋白酶的分离因子能达到较高的水平因此此方法可以作为分离蛋白质的一种很好的下游处理方法。.化工技术与开发第卷Mirjana、GAntov等人用(ww)PEG和(ww)(NH)SO作为双水相体系萃取木聚糖酶。当酶的初级制品浓度为(ww)调节pH值在的条件下分配系数和上相产率分别达到了和纯化因子为。实验结果表明了把双水相体系作为下游过程分离纯化木聚糖酶的可行性。Lorena、Capezio等用聚乙二醇磷酸盐双水相体系分离转基因牛奶中的乳清蛋白。研究了牛奶乳清蛋白中种成分牛血清白蛋白(BSA)、α乳清蛋白(ALA)、β乳球蛋白(BLG)、α抗胰蛋白酶(AAT)在双水相体系中的分配行为。BSA和ALA富集在PEG相分离系数分别达到了和BLG和AAT对磷酸盐相更具有亲和性分离系数分别为和。pH值增大会使这些蛋白质的分离系数增加然而PEG分子量的增加使分离系数减少。使用PEG以及在pH值为相比R为∶时对于AAT能达到最佳萃取条件产率达到纯化因子为~之间。在抗生素的提取和纯化中的应用抗生素药物通常是通过生物合成得到的其目的产物在转化液中产率很低且对酸、碱、有机溶剂和温度变化都比较敏感容易变性和失活若以常规的吸附、萃取、离子交换和沉淀等方法处理一般萃取法一次转移并不能将杂质充分除去须多次萃取溶剂损失大而且抗生素在提取过程中易变性失活而双水相技术能保证其在温和的条件下得到分离纯化。MMBora等探讨了用PEG盐双水相体系萃取头孢类抗生素在最佳条件:PEG和NaSO组成双水相体系pH为PEG和NaSO浓度各为时头孢类抗生素在双水相体系中良好的分配系数(达到了)以及疏水性都证明了该实验的可行性。BabakMokhtaraniRaminKarimzadeh等用PEG、NaSO和HO组成双水相体系萃取分离环丙沙星。实验研究了温度、盐浓度、聚合物的浓度以及分子量的大小等对实验结果的影响。实验采用矩形的星点设计平行面法去探讨影响环丙沙星的分配行为的因素。结果表明环丙沙星分配与盐浓度有很大关系它能明显减小环丙沙星的分配系数。聚乙二醇在低浓度时能减小环丙沙星的分配系数然而在高浓度时能增加其分配系数但聚合物的分子量没有明显的影响温度对环丙沙星分配系数的影响与PEG的浓度是一样的。结果显示环丙沙星的质量浓度对抗体的分配具有相对较小的影响同样PEG的分子量对环丙沙星的分配行为的影响几乎可以忽略不计。实验最佳条件为:温度为℃PEG分子量为NaSO和PEG的质量分数分别为wt和wt。YangyangJiang等用PEG与CmimPF(溴化丁基乙基咪唑)形成的离子液体双水相萃取青霉素。当达到相平衡时青霉素的萃取率达到了。实验按萃取过程分为个步骤:()在咪唑PEG体系中加入NaHPO形成双水相青霉素被萃取到富含聚合物的相即PEG相()疏水性的离子液体CmimPF加入到上述双水相中把咪唑PEG从青霉素去萃取出来()在离子液体中的咪唑PEG被从CmimPF得到回收。经过这个步骤不仅能很好地萃取出青霉素而且咪唑PEG离子液体都能得到回收因此是一种绿色的萃取方法。在天然产物活性成分提取的应用当前从天然产物中提取有效的药用成分已经受到了越来越大的关注。中草药是我国医药宝库中的瑰宝已有数千年的历史。但由于天然植物中所含的化合物众多特别是中草药有效成分比较难以确定及提取技术还不成熟使得我国传统中药难以得到国际市场的认可。因此采用具有较高选择性和专一性的双水相萃取技术对中草药有效成分的提取是一项很有意义的工作。石慧陈媛梅利用PEG与的(NH)SO双水相体系从加杨叶粗提液中萃取分离总黄酮用紫外分光光度法直接测定总黄酮含量。试验在pH=NaCl的添加量为粗提液mL温度℃的最佳实验条件下加杨叶总黄酮萃取率达到了以上。该试验方法具有良好的精密度和选择性为黄酮类化合物萃取分离提供了一种有效的方法。IHorngPanHsiHoChiu等把双水相萃取技术与简单乙醇处理结合起来除去过量的无机盐发展成从栀子花提取栀子苷。该双水相体系由PE(一种共聚物由的环氧乙烷和的环氧丙烷构成)、磷酸氢二钾和乙醇构成。为探究最佳反.谭志坚等:双水相萃取技术在分离、纯化中的应用第8期应条件各种可变因素包括盐浓度、聚合物浓度、样品加入量和乙醇的加入量都得到了考察。实验结果表明增加盐浓度和减少PE浓度能够增加栀子苷在富盐相的浓度。增加乙醇以及样品加入量也能提高栀子苷在富盐相的分配效率实验大规模萃取时最佳反应条件为:PE、KHPO乙醇。实验中由g栀子花能得到g纯度为的栀子苷因此这个过程具有良好的工业应用前景。SChethanaChetanANayak等首次把双水相萃取作为一种下游分离过程应用到从甜菜中萃取甜菜红碱。实验考查了结线长度(TLL)、相比、相浓度、PH值、盐浓度等变量对实验结果的影响甜菜红碱和糖分别分配到上相(PEG相)和下相(硫酸铵相)。实验的最佳条件为:PEG(NH)SOHO构成双水相体系当结线长度(TLL)为相比为上相能获得~的甜菜红碱下相能获得~的糖。增加NaCl浓度会使甜菜红碱的产率降低pH为时甜菜红碱的产率最高但pH值变化对糖的产率影响不大。随后采用有机液体萃取法把上相的PEG与甜菜红碱进行分离能使甜菜红碱的浓度增加倍。在金属离子分离中的应用传统的金属离子溶剂萃取方法存在着溶剂污染环境、对人体有害、运行成本高、工艺复杂等缺点。近年来利用双水相技术萃取分离金属离子达到了较高的水平。与传统的分离工艺相比双水相体系对贵金属以及稀有金属的分离与检测具有环境友好、废弃物少、对人体无害、运行成本低以及工艺简单等优点。张磊陈亮等利用聚乙二醇硫酸铵双水相体系萃取分离废弃印刷线路板处理液中的金。实验在温度为℃pH为PEG的质量分数为(NH)SO的质量分数为的最佳萃取条件下经过三级萃取金萃取率达到。富集金的PEG相无需反萃取可直接用Zn置换出单质金还原率达到。张焱亓新华等利用Cd(Ⅱ)与乙基紫(EV)、KI缔合后把盐析剂加入到丙醇水双水相体系萃取分离镉。在(NH)SO存在条件下无表面活性剂EV的加入以及加入一定酸性条件下存在的碘离子Cd(Ⅱ)萃取率只有而同样条件下加入mg级用量的EV后达到了完全分离。实验还考察其它如Fe(Ⅲ)Co(Ⅱ)等离子干扰因素结果表明了这些离子都得到完全分离。用双水相体系对μg含量的含镉废水经过滤净化处理后可直接排放对治理重金属镉对水的污染具有参考价值。VâniaGoncalvesLacerda等用(EO)(PO)(EO)三嵌式共聚物与硫酸锂组成双水相体系萃取分离NiCd电池中的镍和镉。对这些金属在上下相产生分配影响的因素有提取剂碘化钾的加入量、结线长度(TLL)的大小、上下相的质量比、电池样品的滤出和稀释因子。当电池样品由盐酸滤出最佳条件:(ww)TLLKI的浓度为mmol·kg两相质量比为样品稀释系数为时共聚物相Cd的产率达到了Ni分配到盐相产率达到。TianxiZhangWenjunLi等研究了基于聚乙二醇和盐的双水相体系萃取一价的金属氰化物Au(CN)。在不加萃取剂的情况下绝大部分Au(CN)被萃取到PEG相该双水相系统具有很好的萃取性能并且pH值变化对萃取没有明显的影响。在PEG相中加入Zn可以明显减少Au(CN)的含量PEG相不会发生改变从而可以被重复利用。由于该系统的无毒和不燃性使得该方法成为了一种在碱性条件下分离金属氰化物的既干净又安全的方法。双水相萃取技术展望双水相萃取技术作为一种新型的萃取分离技术有着很多的优点但也存在着一定的局限性。一是成相聚合物的价格如被普遍研究的是PEGdextran体系葡聚糖比较昂贵而且体系黏度大另外从成相聚合物中分离目标产物也比较困难,一些如超滤,电泳,色谱分离等技术成本也较高。由于常见双水相体系存在不足及其应用越来越广泛近些年来出现了许多新的双水相体系。()廉价的双水相体系用变性淀粉、乙基羟乙基纤维素等代替昂贵的葡聚糖用羟基纤维素、聚乙烯醇等代替PEG可制成廉价的双水相体系。科学家也研究了用粗葡聚糖或水解的葡聚糖但都没有取得很好的效果SanjoyGhosh等研究了用廉价的dextranT代替昂贵的dextranT。()温度诱导双水相体系环氧乙烷环氧丙烷共聚物(EOPO)具有.化工技术与开发第卷较低的浊点在水溶液中当温度超过其浊点时会形成新的两相目标产物分配在水相而富含EOPO的一相得以回收。RadosławDembczyński研究用EOPO与磷酸钾组成的温度诱导双水相体系从鸡蛋白中萃取出了溶解酵素。()去污剂形成的双水相体系去污剂形成的胶束与高分子聚合物形成的空间结构不能相互渗透从而导致分相产生聚合物去污剂两相系统。ARodenbrock使用了农乳尔清洁剂双水相萃取角质酶肽。()表面活性剂双水相体系表面活性剂双水相是指正、负离子表面活性剂混合水溶液在一定浓度及混合比范围内自发分离形成的两个互不相溶的水相。由于表面活性剂具有亲水基和亲油基的结构特点使得这种双水相在萃取分离时具有选择性好。PunjapornWeschayanwiwat等使用阴阳离子(十烷基二苯和十二烷基三甲基溴化铵)表面活性剂双水相应用到分离废水中的苯。双水相与相关技术的集成也成为其发展的一种趋势如与磁场、超声波、高效层析、电泳等技术的集成既提高了分离效率又简化了分离流程以及提高回收等优点。参考文献:JosefinePersson,HansOlofJohansson,etalAqueouspolymertwophasesystemsformedbynewthermoseparatingpolymersJBioseparation,,():AnitaJain,BNJohriPartitioningofanextracellularxylanaseproducedbyathermophilicfungusMelanocarpusalbomycesIISinanaqueoustwophasesystemJBioresourceTechnology,,:GerbenMZijlstra,CornelisDdeGooijer,JohannesTramperExtractivebioconversionsinaqueoustwophasesystemsJCurrentOpinioninBiotechnology,,():ArmandoVenâncio,CatarinaAlmeida,JoséATeixeiraEnzymepurificationwithaqueoustwophasesystemscomparisonbetweensystemscomposedofpurepolymersandsystemscomposedofcrudepolymersJJournalofChromatographyB,,:BAAndrews,JAAsenjoProteinpartitioningequilibriumbetweentheaqueouspoly(ethyleneglycol)andsaltphasesandthesolidproteinphaseinpoly(ethyleneglycol)salttwophasesystemsJJournalofChromatographyB,,:LauraBulgariu,DumitruBulgariuExtractionofmealionsinaqueouspolyethyleneglycol–inorganicsalttwophasesystemsinthepresenceofinorganicextractants:CorrelationbetweenextractionbehaviourandstabilityconstantsofextractedspeciesJJournalofChromatographyA,,():徐长波,王巍杰双水相萃取技术研究进展J化工技术与开发,,():李伟,朱自强双水相萃取技术在药物分离和提取中的应用J化学进展,,():ChenmingZhang,FabricioMedinaBolivar,ScottBuswell,etalPurificationandstabilizationofricinBfromtobaccohairyrootculturemediumbyaqueoustwophaseextractionJJournalofBiotechnology,,:李伟,柴金玲新型萃取技术双水相技术J化学教育,,():吴敏双水相技术在药物提取与分离中的应用J中成药,,():张珩,张奇,杨艺虹双水相萃取技术应用在医药工业中的展望J医药工程设计,,():郭宪厚双水相萃取技术研究进展J广州化工,,():戴猷元新型萃取分离技术的发展及应用M北京:化学工业出版社,GiselaTubio,GuillermoAPicó,BibianaBNerliExtractionoftrypsinfrombovinepancreasbyapplyingpolyethyleneglycolsodiumcitrateaqueoustwophasesystemsJJournalofChromatographyB,,():SaroteNitsawang,RajniHattiKaul,PawineeKanasawudPurificationofpapainfromCaricapapayalatex:AqueoustwophaseextractionversustwostepsaltprecipitationJEnzymeandMicrobialTechnology,,():NatáliaLuizaPennaDallora,JoãoGabrielDegamKlemzPartitioningofmodelproteinsinaqueoustwophasesystemscontainingpolyethyleneglycolandammoniumcarbamateJBiochemicalEngineeringJournal,,():MirjanaGAntov,DraginjaMPeričin,MilicaGDašićAqueoustwophasepartitioningofxylanaseproducedbysolidstatecultivationofPolyporussquamosusJProcessBiochemistry,,():LorenaCapezio,DianaRomanini,GuillermoAPicó,etal.谭志坚等:双水相萃取技术在分离、纯化中的应用第8期PartitionofwheymilkproteinsinaqueoustwophasesystemsofpolyethyleneglycolphosphateasastartingpointtoisolateproteinsexpressedintransgenicmilkJJournalofChromatographyB,,():MMBora,SBorthakur,PCRao,etalAqueoustwophasepartitioningofcephalosporinantibiotics:effectofsolutechemicalnatureJSeparationandPurificationTechnology,,():BabakMokhtarani,RaminKarimzadeh,MohammadHassanAmini,etalPartitioningofCiprofloxacininaqueoustwophasesystemofpoly(ethyleneglycol)andsodiumsulphateJBiochemicalEngineeringJournal,,():YangyangJiang,HansongXia,JiangYu,etalHydrophobicionicliquidsassistedpolymerrecoveryduringpenicillinextractioninaqueoustwophasesystemJChemicalEngineeringJournal,,():石慧,陈媛梅PEG(NH)SO双水相体系在加杨叶总黄酮萃取分离中的应用J现代生物医学进展,,():IHorngPan,HsiHoChiu,ChuHsunLu,etalAqueoustwophaseextractionasaneffectivetoolforisolationofgeniposidefromgardeniafruitJJournalofChromatographyA,,():SChethana,ChetanANayak,KSMSRaghavaraoAqueoustwophaseextractionforpurificationandconcentrationofbetalainsJJournalofFoodEngineering,,():张磊,陈亮,等聚乙二醇硫酸铵双水相萃取废弃印刷线路板处理液中的金J分析与环保,,():张焱,亓新华,等双水相体系萃取分离电镀废水中镉缔合物J材料保护,,():VâniaGoncalvesLacerda,AparecidaBarbosaMageste,IgorJoséBoggioneSantos,etalSeparationofCdandNifromNi–CdbatteriesbyanenvironmentallysafemethodologyemployingaqueoustwophasesystemsJJournalofPowerSources,,():TianxiZhang,WenjunLi,WeijinZhou,etalExtractionandseparationofgoldIcyanideinpolyethyleneglycolbasedaqueousbiphasicsystemsJHydrometallurgy,,():SaiduMWaziri,BaselFAbuSharkh,SkAsrofAliProteinPartitioninginAqueousTwoPhaseSystemsComposedofapHResponsiveCopolymerandPoly(ethyleneglycol)JBiotechnolProg,,():胡松青,李琳,等双水相萃取技术研究新进展J现代化工,,():SanjoyGhosha,VijayalakshmiEvaluationofanalternativesourceofdextranasaphaseformingpolymerforaqueoustwophaseextractivesystemJBiochemicalEngineeringJournal,,():RadosławDembczyński,WojciechBiałas,KrzysztofRegulski,etalLysozymeextractionfromheneggwhiteinanaqueoustwophasesystemcomposedofethyleneoxide–propyleneoxidethermoseparatingcopolymerandpotassiumphosphateJProcessBiochemistry,,():ARodenbrock,KSelberExtractionofpeptidetaggedcutinaseindetergentbasedaqueoustwophasesystemsJBioseparation,,():PunjapornWeschayanwiwat,OnanongKunanupap,JohnFScamehornBenzeneremovalfromwastewaterusingaqueoussurfactanttwophaseextractionwithcationicandanionicsurfactantmixturesJChemosphere,,():ApplicationofAqueousTwophaseExtractionTechnologyinSeparationandPurificationTANZhijian,LIFenfang,XINGJianmin(CollegeofChemistryandChemicalEngineering,CentralSouthUniversity,Changsha,China)Abstract:AqueoustwophaseextractionwasanewfluidfluidextractiontechnologyOwingtoitscharacteristicsoftemperatecondition,simpleoperationandsoon,ithadbeenwidelyappliedtoseparationandpurificationofmaterialsTheprincipleofformation,technicalprocessandfeaturesofaqueoustwophaseextractionweresummarized,moreoverthesystemcategoryandthefactorsaffectingitsassignmentperformancewerementionedMeanwhile,thepracticalapplicationandforecasts,thedevelopmentinthefuturewasintroducedKeywords:aqueoustwophaseextractionseparationandpurificationapplication

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