常用缓冲溶液的配制方法_百替生物

www.100biotech.comwww.100biotech.comwww.100biotech.comwww.100biotech.com service@100biotech.comservice@100biotech.comservice@100biotech.comservice@100biotech.com 常用缓冲溶液的配制方法 1111． 甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L0.05mol/L0.05mol/L0.05mol/L） X 毫升 0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L甘氨酸+Y 毫升 0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L HCI，再加水稀释至 200 毫升 pH X Y pH X Y 2.0 2.4 2.6 2.8 50 50 50 50 44.0 32.4 24.2 16.8 3.0 3.2 3.4 3.6 50 50 50 50 11.4 8.2 6.4 5.0 甘氨酸分子量 = 75.07，0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L甘氨酸溶液含 15.01 克/升。 2222．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.050.050.050.05mol/Lmol/Lmol/Lmol/L） X 毫升 0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L HCl，再加水稀释到 20 毫升 pH(20℃) X Y pH(20℃) X Y 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 5 5 5 5 5 4.070 3.960 3.295 2.642 2.022 3.2 3.4 3.6 3.8 5 5 5 5 1.470 0.990 0.597 0.263 邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L 邻苯二甲酸氢溶液含 40.85 克/升 3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 pH 0.2mol/Lmol/Lmol/Lmol/L Na2HPO4 （毫升） 0.1mol/Lmol/Lmol/Lmol/L 柠檬酸 （毫升） pH 0.2mol/Lmol/Lmol/Lmol/L Na2HPO4 （毫升） 0.1mol/Lmol/Lmol/Lmol/L 柠檬酸 （毫升） 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 5.0 0.40 1.24 2.18 3.17 4.11 4.94 5.70 6.44 7.10 7.71 8.28 8.82 9.35 9.86 10.30 10.60 18.76 17.82 16.83 15.89 15.06 14.30 13.56 12.90 12.29 11.72 11.18 10.65 10.14 9.70 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 10.72 11.15 11.60 12.09 12.63 13.22 13.85 14.55 15.45 16.47 17.39 18.17 18.73 19.15 19.45 9.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55 Na2HPO4分子量 = 14.98，0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L溶液为 28.40 克/升。 Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L溶液含 35.01 克/升。 C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L溶液为 21.01 克/升。 www.100biotech.comwww.100biotech.comwww.100biotech.comwww.100biotech.com service@100biotech.comservice@100biotech.comservice@100biotech.comservice@100biotech.com 4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液 pH 钠离子浓度 （mol/Lmol/Lmol/Lmol/L） 柠檬酸（克） C6H8O7·H2O 氢氧化钠(克) NaOH 97% 盐酸（毫升） HCl（浓） 最 终 体 积 （升）① 2.2 3.1 3.3 4.3 5.3 5.8 6.5 0.20 0.20 0.20 0.20 0.35 0.45 0.38 210 210 210 210 245 285 266 84 83 83 83 144 186 156 160 116 106 45 68 105 126 10 10 10 10 10 10 10 ① 使用时可以每升中加入 1 克克酚，若最后 pH 值有变化，再用少量 50% 氢氧化钠溶液或浓盐 酸调节，冰箱保存。 5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（（（（0.10.10.10.1 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L）））） pH 0.1 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L 柠檬酸 （毫升） 0.1 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L 柠檬酸钠 （毫升） pH 0.1 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L 柠檬酸 （毫升） 0.1 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L 柠檬酸钠 （毫升） 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 18.6 17.2 16.0 14.9 14.0 13.1 12.3 11.4 10.3 9.2 1.4 2.8 4.0 5.1 6.0 6.9 7.7 8.6 9.7 10.8 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 8.2 7.3 6.4 5.5 4.7 3.8 2.8 2.0 1.4 11.8 12.7 13.6 14.5 15.3 16.2 17.2 18.0 18.6 柠檬酸 C6H8O7·H2O：分子量 210.14，0.1 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L 溶液为 21.01 克/升。 柠檬酸钠 Na3 C6H5O7·2H2O：分子量 294.12，0.1 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L溶液为 29.41 克/毫升。 6．乙酸–乙酸钠缓冲液（0.20.20.20.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L） pH(18℃) 0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L NaAc (毫升) 0.3 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L HAc (毫升) pH(18℃) 0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L NaAc (毫升) 0.3 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L HAc (毫升) 2.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 0.75 1.20 1.80 2.65 3.70 4.90 9.25 8.80 8.20 7.35 6.30 5.10 4.8 5.0 5.2 5.4 5.6 5.8 5.90 7.00 7.90 8.60 9.10 9.40 4.10 3.00 2.10 1.40 0.90 0.60 Na2Ac·3H2O分子量 = 136.09，0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L 溶液为 27.22 克/升。 7．磷酸盐缓冲液 （1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（0.2） 0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L 0.3 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L 0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L 0.3 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L www.100biotech.comwww.100biotech.comwww.100biotech.comwww.100biotech.com service@100biotech.comservice@100biotech.comservice@100biotech.comservice@100biotech.com pH Na2HPO4 (毫升) NaH2PO4 (毫升) pH Na2HPO4 (毫升) NaH2PO4 (毫升) 5.8 5.9 6.0 6.1 6.2 6.3 6.4 6.5 6.6 6.7 6.8 6.9 8.0 10.0 12.3 15.0 18.5 22.5 26.5 31.5 37.5 43.5 49.5 55.0 92.0 90.0 87.7 85.0 81.5 77.5 73.5 68.5 62.5 56.5 51.0 45.0 7.0 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5 7.6 7.7 7.8 7.9 8.0 61.0 67.0 72.0 77.0 81.0 84.0 87.0 89.5 91.5 93.0 94.7 39.0 33.0 28.0 23.0 19.0 16.0 13.0 10.5 8.5 7.0 5.3 Na2HPO4·2H2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L溶液为 85.61 克/升。 Na2HPO4·12H2O分子量 = 358.22，0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L溶液为 71.64 克/升。 Na2HPO4·2H2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L溶液为 31.21 克/升。 （2）磷酸氢二钠–磷酸二氢钾缓冲液（1/15 mol/Lmol/Lmol/Lmol/L） pH mol/L/15Na2HPO4 (毫升) mol/L//15KH2PO4 (毫升) pH mol/L//15Na2HPO4 (毫升) mol/L//15KH2PO4 (毫升) 4.92 5.29 5.91 6.24 6.47 6.64 6.81 6.98 0.10 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 9.90 9.50 9.00 8.00 7.00 6.00 5.00 4.00 7.17 7.38 7.73 8.04 8.34 8.67 8.18 7.00 8.00 9.00 9.50 9.75 9.90 10.00 3.00 2.00 1.00 0.50 0.25 0.10 0 Na2HPO4·2H2O 分子量 = 178.05，1/15M 溶液为 11.876 克/升。 KH2PO4分子量 = 136.09，1/15M 溶液为 9.078 克/升。 8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M） X 毫升 0.2M K2PO4 + Y毫升 0.2N NaOH 加水稀释至 29 毫升 pH(20℃) X (毫升) Y（毫升） pH(20℃) X (毫升) Y（毫升） 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 5 5 5 5 5 5 0.372 0.570 0.860 1.260 1.780 2.365 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 5 5 5 5 5 5 2.963 3.500 3.950 4.280 4.520 4.680 9．巴比妥钠-盐酸缓冲液（18℃） pH 0.04M 巴比妥 钠溶液 0.2V 盐酸 pH 0.04M 巴 比 妥钠溶液(毫 0.2N 盐酸(毫 升) www.100biotech.comwww.100biotech.comwww.100biotech.comwww.100biotech.com service@100biotech.comservice@100biotech.comservice@100biotech.comservice@100biotech.com 升) 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 8.2 100 100 100 100 100 100 100 100 18.4 17.8 16.7 15.3 13.4 11.47 9.39 7.21 8.4 8.6 8.8 9.0 9.2 9.4 9.6 100 100 100 100 100 100 100 100 5.21 3.82 2.52 1.65 1.13 0.70 0.35 巴比妥钠盐分子量=206.18;0.04M 溶液为 8.25 克/升 10101010．TrisTrisTrisTris–盐酸缓冲液（0.05M0.05M0.05M0.05M，25252525℃） 50 毫升 0.1M 三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与 X 毫升 0.1N 盐酸混匀后，加水稀释至 100 毫升。 pH X(毫升) pH X(毫升) 7.10 7.20 7.30 7.40 7.50 7.60 7.70 7.80 7.90 8.00 45.7 44.7 43.4 42.0 40.3 38.5 36.6 34.5 32.0 29.2 8.10 8.20 8.30 8.40 8.50 8.60 8.70 8.80 8.90 26.2 22.9 19.9 17.2 14.7 12.4 10.3 8.5 7.0 三羟甲基氨基甲烷（Tris）HOCH2 CH2OH C HOCH2 NH2 分子量=121.14; 0. 1M溶液为 12.114 克/升。Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。 11．硼酸–硼砂缓冲液（0.2M硼酸根） pH 0.05M 硼 砂 （毫升） 0.2M 硼 砂 （毫升） pH 0.05M 硼 砂 （毫升） 0.2M 硼 酸 （毫升） 7.4 7.6 7.8 8.0 1.0 1.5 2.0 3.0 9.0 8.5 8.0 7.0 8.2 8.4 8.7 9.0 3.5 4.5 6.0 8.0 6.5 5.5 4.0 2.0 硼砂 Na2B4O7·H2O,分子量=381.43;0.05M 溶液（=0.2M 硼酸根）含 19.07 克/升。 硼酸 H2BO3,分子量=61.84,0.2M 溶液为 12.37 克/升。 硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 11．硼酸-硼砂缓冲液（0.2M硼酸根） pH 0.05M 硼 砂 （毫升） 0.2M 硼 酸 （毫升） pH 0.05M 硼 砂 （毫升） 0.2M 硼 酸 （毫升） www.100biotech.comwww.100biotech.comwww.100biotech.comwww.100biotech.com service@100biotech.comservice@100biotech.comservice@100biotech.comservice@100biotech.com 7.4 7.6 7.8 8.0 1.0 1.5 2.0 3.0 9.0 8.5 8.0 7.0 8.2 8.4 8.7 9.0 3.5 4.5 6.0 8.0 6.5 5.5 4.0 2.0 硼砂 Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M 溶液（=0.2M 硼酸根）含 19.07 克/升。 硼酸 H2BO3，分子量=61.84, 0.2M 溶液为 12.37 克/升。 硼砂 易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。 12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M） X毫升 0.2M 甘氨酸+Y 毫升 0.2NnaOH 加水稀释至 200 毫升 pH X Y pH X Y 8.6 8.8 9.0 9.2 9.4 50 50 50 50 50 4.0 6.0 8.8 12.0 16.8 9.6 9.8 10.0 10.4 10.6 50 50 50 50 50 22.4 27.2 32.0 38.6 45.5 甘氨酸分子量=75.07;0.2M 溶液含 15.01 克/升。 13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根） X毫升 0.05M 硼砂+Y毫升 0.2NNaOH 加水稀释至 200 毫升 pH X Y pH X Y 9.3 9.4 9.6 50 50 50 6.0 11.0 23.0 9.8 10.0 10.1 50 50 50 34.0 43.0 46.0 硼砂 Na2B4O7·10H2O,分子量=381.43;0.05M 溶液为 19.07 克/升。 14．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M） Ca2+、Mg2+存在时不得使用 pH 0.1MNa2CO3(毫升) 0.1MN2HCO3(毫升) 20℃ 37℃ 9.16 9.40 9.51 9.78 9.90 10.14 10.28 10.53 10.83 8.77 9.12 9.40 9.50 9.72 9.90 10.08 10.28 10.57 1 2 3 4 5 6 7 8 9 9 8 7 6 5 4 3 2 1 Na2CO2·10H2O分子量=286.2;0.1M溶液为 28.62 克/升。 N2HCO3分子量=84.0;0.1M 溶液为 8.40 克/升。 15．“PBS”缓冲液 PH 7.6 7.4 7.2 7.0 www.100biotech.comwww.100biotech.comwww.100biotech.comwww.100biotech.com service@100biotech.comservice@100biotech.comservice@100biotech.comservice@100biotech.com H2O NaCl Na2HPO4 NaH2PO4 1000 8.5 2.2 0.1 1000 8.5 2.2 0.2 1000 8.5 2.2 0.3 100ml 8.5g 2.2g 0.4g