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蝴蝶兰的组织培养技术.PDF

蝴蝶兰的组织培养技术

浅笑安然
2011-08-15 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《蝴蝶兰的组织培养技术pdf》,可适用于高等教育领域

育种与栽培农村经济与科技年第卷第期(总第期)蝴蝶兰的组织培养技术毛红丽(襄阳职业技术学院湖北襄阳)摘要探讨了蝴蝶兰的组织培养技术和方法。实验证明:用幼叶在散射光下培养诱导蝴蝶兰原球茎的效果最好最适培养基为:MS一BAmg/LNAAlmg/L水解乳蛋白mg/L,.~.,糖g/L~脂g/L(pH值,)最适增殖培养基为:MA一BAmg/LNAAnag/LzK解乳蛋白mg/L,~,..糖g/L琼脂g/L(pH值.)最适生根长苗培养基:/MSIBA.mg/LNAA.mg/L.%活性炭蔗糖g/L~脂g/L(pH值.)。关键词】蝴蝶兰原球茎组织培养蝴蝶兰是单茎性气生兰植株极少发育侧芽且种子极难萌发对其进行常规性的繁殖增殖速度很慢影响了它的推广和应用。笔者通过对蝴蝶兰的组织培养技术的研究.旨在提高蝴蝶兰的繁殖系数。材料与方法.实验材料从陕西省西安市鼎天农业科技有限公司购买的大红品系的月龄蝴蝶兰幼苗。.实验方法..外植体的消毒。从蝴蝶兰植株上取下幼叶(分d、d)和气生根尖放在自来水下冲洗干净。在超净工作台上将叶和根尖放人无菌瓶用%酒精消毒s.然后用无菌水清洗~遍再用.%升汞溶液浸泡rain(分钟)。用无菌水冲洗~遍后待用。..原球茎的诱导。将幼叶切成xmm见方的小块和ram长根尖。平放或按极性接种以MS为基本培养基.添加激素NAAmg/L和不同的浓度BA(mg/L、mg/L、mg/I、ms/L、lOmg/L)配比的诱导培养基上.并设置散射光和x两种作比较每瓶接种一个每处理l瓶重复次。培养个月后观察统计不同外植体在不同培养基中原球茎的诱导率及生长情况。..原球茎的增殖。将诱导的原球茎按~个为一团接种到以MS为基本培养基添加激素NAAlmg/L和不同的浓度BA(、mg/L、mg/L、mg/L、mg/L、mg/L)~,比的增殖培养基中培养个月后统计原球茎的增殖倍数和原球茎的大小。以上培养基中另添加mg/L的水解乳蛋白.g/L琼脂和gL蔗糖pH值.。培养条件均为℃光照时间h光照强度x。‘.壮苗与生根将增殖培养所得到的蝴蝶兰小苗转接到各种生根培养基(见表)每处理lO瓶每瓶株重复次。培养d后统计苗的生长情况和生根率、平均生根率。生根培养基中加入%的活性碳蔗糖g/L琼脂gm。培养条件均为℃光照时间h光照强度lx。结果与分析.不同的外植体诱导原球茎的差异对蝴蝶兰根尖、生长龄为d的幼叶和生长龄为od的叶进行原球茎的诱导实验。结果表明(表):幼叶的诱导率最高为%它的褐变率最低只有%。成熟叶的诱导率很低且褐化严重到%。而根尖没有诱导出原球茎。可见生长龄为d幼叶最有利于原球茎的产生。还发现在同一叶片上。叶基部的切块较叶中和叶尖的切块诱导率高。对于比较小的幼叶.未切割时也能诱导出原球茎。.不同浓度的BA对原球茎诱导的影响选用生长龄为d大小为lem左右、叶色嫩绿的叶片为诱导材料。灭菌后接种到含不同浓度的BA培养基上培养。培养~d发现叶片被切割周围产生浅绿色的原球茎状小突起很苗肥多、长势好的田块一般不提倡在开春后施追肥.以免造成贪青倒伏。.加强病虫害管理菌核病是油菜的主要病害开花期和角果发育期最易发生一般年份可减产l一成严重的可以造成大幅度减产甚至绝收因此防治菌核病是实现油菜丰收的重要环节。首先要抓好清沟排渍排除田间渍水降低田间湿度从而减小病菌繁殖。其次是及时药剂防治可选用%多菌灵可湿性粉剂.~.kg或%菌核净..kg兑水kg在油菜花期防治~一次能有效地控制菌核病的漫延。老黄叶也是菌核病和霜霉病等病害传播源容易将病害传到其他叶片尤其受冻叶霜霉病重。摘除老黄叶则可防治或减轻菌核病等病害的发生促进植株的生长发育。另外油菜生长中后期要加强对蚜虫的防治减轻病虫害损失。作者简介:张英杰(一)女湖北随州人襄樊职业技术学院副教授主要从事种植专业教学与科研工作。毛红丽:蝴蝶兰的组织培养技术育种与栽培快发育成为原球茎。由表可知不同浓度的BA对原球茎的诱导率和原球茎的大小影响比较明显。随着BA浓度由mg/L增加到mg/L.原表不同外植体诱导原球茎的差异球茎的诱导率也由.%逐渐增大当BA为lOmg/L时.诱导率最高达.%说明高浓度BA促进原球茎的诱导。但原球茎直径是随BA浓度的增大由小到大再由大到小。BAmg/L时原球茎的直径最大为.mmBAIOmg/L时原球茎的直径最小为.mm不足mm。在实验中发现当原球茎不足lmm时很难进一步增殖生长诱导出的原球茎越大越有利增殖生长。所以在原球茎的诱导实验中选择BA的最佳浓度为mg/L。.不同光照条件对原球茎诱导的影响在对原球茎进行诱导的过程中.发现外植体很容易褐化。抑制叶片褐化的方法是勤换培养基(Od换次)及时将叶片移入新鲜的培养基可减轻褐化状况。培养时还发现褐化的程度与培养时的光照强度有关.当光照强度为x时叶片褐表不同浓度一队对原球茎诱导的影晌化的程度较严重达%左右:当光照强度为其他培养架反射过来的弱散射光时褐化得到了较好的抑制仅为%左右。.不同浓度BA对原球茎增殖与诱导出苗的影响将诱导出来的原球茎转接到增殖培养基中进行增殖培养。表可知不同浓度的BA对原球茎的增殖和原球茎的大小影响比较明显随着BA浓度的增加原球茎增殖倍数逐渐增加但原球茎的大小呈先升后下降趋势。当BA为lOmg/L时原球茎的增殖倍数虽达到最高.但原球茎的大小最小为.。在原球茎增殖的同时.产生大量的丛生芽但丛生芽长得较为弱小如果降低BA的浓度当其为mg/L原球茎的增殖系数减少但形成的多而粗壮。所以BA的最佳浓度为mg/L。%且苗的生长势最健壮。.原球茎的生根壮苗将增殖得到的小苗转入到生根壮苗培养基中。由表可知当基本培养基为/MS.NAA为O.mg/LIBA为m时苗的生根率达到最高讨论.影响原球茎诱导的因素在蝴蝶兰的固体培养中进行原球茎诱导的外植体选择时.明显地发现生长肥厚的幼嫩叶片的诱导率最为理想.这与杨美纯等的研究一致。在实验中还发现叶基部的切块较叶中和叶尖的切块的诱导率高。在对叶片切割时过多的切口会使叶片褐化死亡所以在对幼叶切割时将叶片从叶基部切下可以获得最高的诱导率。在原球茎的诱导过程中.BA的浓度对原球茎的诱导效率和生长势有很大的影响。在BA为~mg/L的范嗣内随着BA浓度的升高原球茎的诱导率也在增加但原球茎的生长势却不好。近年来一些研究只报道了BA浓度对原球茎诱导率的影响.却没研究对诱导出的原球茎的生长势的影响。笔者结合两方面的比较确定最终的BA的浓度为m这样诱导率比较高.且原球茎的生长状况良好为原球茎的进一步增殖打下基础。光照条件也是影响原球茎诱导的一个重要因素。散射光有利于原球茎的诱导并能有效地减轻叶片诱导时的褐化状况。影响原球茎增殖的因素在对蝴蝶兰原球茎的增殖实验中研究发现.随着BA浓度的增加.原球茎的增殖率提高。并且在不加BA的条件下原球茎也能增殖这可能是原球茎自己体内已积累了较高水平的细胞分裂素的缘故。这与周俊辉、王芳的报道一致.但与王亦菲、彭立新的结果不同。另外.从控制遗传变异方面考虑不应使用高浓度的激素组合以免原球茎多代增殖后形成异常苗。在实验中还发现原球茎在切割时不应切的太小否则褐化情况严重。在接种时原球茎应紧密的靠在一起这样才能生长旺盛。从实验中可以得出原球茎在增殖生长时具有较强的群体优势效应与彭立心、马子骏和周俊辉的报道一致。.影响蝴蝶兰生根壮苗的因素在蝴蝶兰生根壮苗培养中发现MS比MS的效果好。NAA浓度对出苗率没有多大影响。活性碳的添加.可以有效防止原球茎褐化有利于小苗的生长。参考文献『扬美纯、周歧伟、许鸿源等外部因子对蝴蝶兰叶片原球茎状体发生的影响L】.广西植物():.彭立新、王妹、孟广云等蝴蝶兰组织培养快繁研究J.天津农业科学():.『叶晓青、谢东、魏书等不同激素水平对蝴蝶兰原球茎状体增殖的影响LI江苏林业科技(增刊):.王芳、文峰、武斌等激素对蝴蝶兰快速繁殖的影响J.新疆农业大学学报():.周俊辉、叶超红、陈旭高等蝴蝶兰原球茎增殖培养的研究J.仲凯农业技术学院学报():.作者简介:毛红丽(一)女襄樊职业技术学院生物工程学院工作。

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