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c-fos 免疫组化方法

c-fos 免疫组化方法3 3.2. c-Fos免疫组织化学反应步骤： a. 入0.01M PBS (pH 7.4) 10min 3; b. 入含3%H2O2和10%甲醇的PBS中10min； c. 入0.01 M PBS漂洗10min ×3； d. 入含10%正常羊血清和0.3%Triton X-100的PBS中，室温孵育1h； e. 入1:1000兔抗Fos多克隆抗体（美国Stanta Cruz Biotechnology公司产品），4℃孵育48h； f. 入0.01M PBS漂洗10min ×3； g. 入1:200...

3 3.2. c-Fos免疫组织化学反应步骤： a. 入0.01M PBS (pH 7.4) 10min 3; b. 入含3%H2O2和10%甲醇的PBS中10min； c. 入0.01 M PBS漂洗10min ×3； d. 入含10%正常羊血清和0.3%Triton X-100的PBS中，室温孵育1h； e. 入1:1000兔抗Fos多克隆抗体（美国Stanta Cruz Biotechnology公司产品），4℃孵育48h； f. 入0.01M PBS漂洗10min ×3； g. 入1:200生物素标记的羊抗兔IgG(Vector Laboratories产品)，室温孵育1h； h. 入0.01M PBS漂洗10min× 3： i. 入1:100卵白素－生物素－过氧化物酶复合物(ABC液, Vector Laboratories产品)，室温孵育1h； j. 0.01M PBS洗10min× 2，0.2M硫酸镍铵醋酸缓冲液(pH 6.0)洗5min； k. 入含0.05% DAB和0.01% H2O2的0.2M DAB－硫酸镍铵加强成色液反应5－15分钟，具体时间视反应情况而定; l. 贴片、脱水、透明和封片，显微镜观察结果及摄片。 3.4. 统计分析：Fos阳性神经元在光学显微镜下进行观察。每只大鼠左、右两侧Fos阳性神经元总和后求出平均数，再进行统计处理。

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