关闭

关闭

关闭

封号提示

内容

首页 安捷伦固相萃取技术及应用.pdf

安捷伦固相萃取技术及应用.pdf

安捷伦固相萃取技术及应用.pdf

上传者: wl8457 2011-07-20 评分 0 0 0 0 0 0 暂无简介 简介 举报

简介:本文档为《安捷伦固相萃取技术及应用pdf》,可适用于自然科学领域,主题内容包含安捷伦固相萃取技术及应用翟晨淏固相萃取应用工程师安捷伦科技有限公司主要内容•为什么要进行样品前处理•安捷伦固相萃取SampliQ•SampliQ方法符等。

安捷伦固相萃取技术及应用翟晨淏固相萃取应用工程师安捷伦科技有限公司主要内容•为什么要进行样品前处理•安捷伦固相萃取SampliQ•SampliQ方法开发要点及应用实例•小结PagePageGBT安捷伦第一时间推出三聚氰胺的整体解决方案样品前处理SampliQSCXHPLCZorbaxSBCZorbaxSCXLCMSMSZorbaxSCXZorbaxRxSilGCMSDBmsHPmsDBmsurtrainertPage活化ml 甲醇ml水上样SPE procedure for melamine extractionSPE procedure for melamine extraction上样ml 样品大于分钟淋洗ml  水ml甲醇抽至近干Page洗脱ml 氨化甲醇溶液()氮气吹干用流动相定容到ml过滤空白样品HPLC分析图谱样品加标ppm三聚氰胺SN>国家标准要求Page聚氰胺SN>回收率>RSD<国家标准要求回收率>RSD<NoSPEwithSPEGCMS分析图谱三聚氰胺三聚氰胺PageLCQQQ分析图谱空白奶粉中加入ppb三聚氰胺通过SPE净化Page为什么要进行样品前处理?样品收集样品分析X原形样品不适合直接进行进一步分析!!!…为什么XPage浓度太低被测物浓度低于定量限样品太“脏”基质组分的存在影响样品测定太“危险”污染物可能成为“色谱柱杀手”现实的世界真实的样品鳄梨中的农残检测(未经SPE处理)鳄梨中的农残检测(经过SPE处理)PageTime(min)Time(min)一个典型色谱分析中的误差来源和时间消耗对比Contamination()SampleIntroduction()Integration()Chromatography()Columns()DataManagement()Integration()Instrument()Calibration()SampleProcessing()Operator()()Collection()Analysis()SampleProcessing()Page(REMajors,LCGCMagazine,)误差来源时间消耗稀释进样过滤基质沉淀弱的选择性样品净化浓缩效果差简单的方法样品前处理过程中的常用技术基质沉淀平衡透析超滤液液萃取固相微萃取(SPME)固相萃取(离线在线)逆流色谱分子印迹聚合物(MIPS)免疫亲和更强的选择性样品净化浓缩效果最佳Page免疫亲和更加复杂需要方法开发与液液萃取相比SPE的优势减少有机溶剂用量和有机废弃物减少有机溶剂用量和有机废弃物的产生提高回收率改善重现性多种不同选择性样品处理量增加可自动化处理Page固相萃取(SPE)SolidPhaseExtractionPage固相萃取技术•属于色谱技术的一种–化合物要么保留要么流过•吸附剂种类选择众多选择性与HPLC类似但与HPLC不能等同•很多样品可以平行处理。孔以上的萃取装置可供选择择•方法操作简单•SPE方法可以提供高选择性回收率以及更好的净化效果此外SPE更被广泛的应用于:•脱盐Desalting(反相原理reversedphaseprinciples)•溶剂置换SolventExchange(与色谱方法兼容)•样品储存(样品稳定化)PageSPE模式色谱技术基质吸附模式(干扰物移除)被测物吸附模式(吸附洗脱)=被测物=基质干扰被测物在最后一步洗脱被测物不保留流过柱床Page活化上样淋洗洗脱固相萃取的基本操作步骤活化mL 甲醇ml水上样三聚氰胺withSampliQSCXmL 样品大于分钟淋洗mL  水ml甲醇洗脱抽至近干Page洗脱mL 氨化甲醇溶液()氮气吹干用流动相定容到mL过滤固相萃取方法开发要点及应用实例Page样品前处理方法建立前的清单了解被测物的物理化学性质以及可能的化学形态了解被测物的浓度范围以及所需的检测低限了解被测物的浓度范围以及所需的检测低限样品基质的物理和化学形式能得到的仪器和设备能得到样品量Page能得到样品量样品前处理过程潜在的交叉污染吸附剂选择非硅胶Carbon,FlorisilPR,Alumina正相Diol,amino,cyano,baresilica硅胶聚合物OPTSCXSAXDVB反相C,Cendcapped,C,C,phenyl,mixedmode(CSCX)Page聚合物OPT,SCX,SAX,DVB安捷伦全新固相萃取(SPE)产品SampliQ!•新!聚合物基质填料•与硅胶填料相比保留较强回收率较高而且有很好的重现性可以耐受较宽范围的溶剂有很好的重现性。可以耐受较宽范围的溶剂。•硅胶基质填料–提供反相正相离子交换的填料。三键键合机理保证更加稳定的键合相。•其它填料–FlorisilPR,三氧化二铝和石墨化炭黑•散装SPE填料和QuEChERS填料–多种可选的分散剂填料用户可自行填装完整的QuEChERS方法所需的填料。PageSampliQ产品填料类型SilicaReversedPhase(NonPolar)NormalPhase(Polar)MixedModeIonExchangeCCECCCSiPhenylSilicaDiolCyanoAminoSiCSCXEVDXSiSAXSiSCXmlmg,pkmlmg,pkmlmg,pkmlmg,pk*mlmg,pkWellPlatemgBulkgBottleBulkgBottle*mlmgAdditionalSorbentsQuEChERSBulkAluminaAcidAluminaBasicAluminaNeutralFlorisilCarbonMagnesiumSulfatePSACarbonCmlmg,pkgrambottlemlmg,pk*grambottlemlmg,pkmlmg,pkmlmg,pkWellPlatemgBulkgBottle*l*mlmgPolymersOPTDVBSCXSAXPSDVBmlmg,pkmlmg,pkmlmg,pkmlmg,pkmlmg,pkReplacementofAccubondProductsWellPlatemgNewProductAccuBondIIvsSampliQC回收率对比InternalStandardAddedDuringLoadAccuBONDIISampliQCPageCaffeineSufladimethoxineTebuthiurionPrednisoneBromacilWarfarin行业SPE应用SampliQ填料选择法医生物体液中的酸性药物SAX,OPT生物体液中的碱性药物Evidex,OPT,SCX医药血液尿液中的极性代谢物CSCXMixedMode,OPT碱性药物C,OPT,SCX生物体液中的巴比妥类药物C,OPT,SCX生物体液中的抗肿瘤药物COPT生物体液中的抗肿瘤药物C,OPT生物体液中的β受体阻滞剂C,CN,OPT生物体液中的苯二氮类药物C,OPT生物体液中的儿茶酚胺SAX,SCX溶液中的氨基酸SCX化妆品中的防腐剂C,SCX生物体液中的甾体药物C生物体液中的利尿剂C环境水中的多环芳烃C,ENVPSDVB石油中的多环芳烃FlorisilPR水中的多环芳烃和多氯联苯C水中的农药残留CPage水中的农药残留C水中的芳香烃C水中的痕量金属元素C,Phenyl,Amino食品安全水果蔬菜中的农药残留Florisil,Silica,Alumnia肉制品中的药物残留C,OPT水产品中的赤潮藻毒素C,OPT食品中的真菌毒素Silica,C,Phenyl聚合物SampliQOPTSampliQpSCXNEWSampliQpSAXSampliQPSDVBPage特色:•高保留优秀的回收率和极佳的重现性•吸附剂耐用性好:柱子突发性干掉不会造成回收率和重复性的降低•无流失固定相杂质少•与大多数有机溶剂兼容pH使用范围•与大多数有机溶剂兼容pH使用范围•球形粒径范围窄参数:•粒径μm•孔径ÅusingBETmeasure聚合物质量控制:成品柱子测试•柱纯度测试(GC)Page孔径g•孔径Åusinginversesizeexclusion•表面积mg•颗粒质量控制•遥感(大小)•光学显微镜(形状)•质谱(杂质)柱度测试()•空管纯度测试(GC)•物料重量测试•柱子流阻•萃取残留()•浑浊度(NTU)SampliQOPT不怕干!acetaminophenbrompheniraminedoxepinDihydroxyDRYDRYDRYDRYDRYDRYDRYWETWETWETWETWETWETWETacetaminophenbrompheniraminedoxepinDihydroxyDRYDRYDRYDRYDRYDRYDRYWETWETWETWETWETWETWETPage•在填料干或湿的情况下都有较好的重现性及回收率•含有极性碱性及疏水和中性几种化合物。propranololmianserinfluoxetinenaphthalenepropranololmianserinfluoxetinenaphthalene聚合物SPE选择pKapKapKaAcidicCompoundsAcidBaseNeutralBasicCompoundsSampliQSAXSampliQOPTSampliQSCX所有安捷伦聚合物都是混合模式。所以可以尽可能多的保留不同种类的目标化合物。在方法开发前可以参照这个图来选择接近的萃取方式。PageSampliQOPT推荐操作流程活化mL甲醇活化mL水建议:流速不要大于mLmin上样mL样品溶液淋洗mL甲醇水溶液洗脱L甲醇抽至近干Page洗脱mL甲醇or草酸甲醇溶液吹干复溶于流动相活化草酸甲醇溶液活化草酸水溶液SampliQSCX推荐操作流程淋洗草酸水溶液淋洗mL甲醇上样Page淋洗mL甲醇洗脱氨化甲醇溶液吹干复溶于流动相抽至近干SampliQSAX推荐操作流程活化mL甲醇活化mL水淋洗mLmM乙酸钠(pH)的甲醇溶液淋洗mL甲醇上样Page淋洗mL甲醇洗脱mL,草酸甲醇溶液吹干复溶于流动相抽至近干流速–速度杀手适用于所有的吸附剂适用于所有的吸附剂流速是非常关键的指标流速太快Page流速是非常关键的指标。流速太快化合物和吸附剂之间没有足够的时间作用。流速差异会造成比较差的重复性结果。方法开发第一步标准品使用标准溶液筛选合适的固相萃取柱采用常规方法收集各个步骤的流出物:通过检测上样和淋洗过程是否有目标物流出来确定化合物是否被保留。尝试不同的种类洗脱剂。尝试不同的洗脱剂浓度。如果化合物在上样和淋洗过程就流出尝试着改变活化或者淋洗溶液的pH值。如果效果不明显需要尝试其他的吸附剂。Page改变活化溶液的效果对比增加溶液pH使之高于化合物的pKa是化合物呈分子状态回收率显著提高。recoveryPageatenololranitidinediOHnaphpropranmianserhaloper未优化活化溶液pH方法开发第二步空白基质加标样品采用第一步得到的方法将标准品加入样品基质进行固相萃取。确认基质不会影响保留和回收率。如果回收率降低检查每一个步骤以确定样品损失在哪一个环节。如果样品净化不够完全可以尝试增加淋洗液中有机相的比例或者减少洗脱液中有机相的比例。备注:目标是得到足够的回收率和可以接受的净化水平。方法的耐用和重Page备注:目标是得到足够的回收率和可以接受的净化水平。方法的耐用和重复性是更为重要的。SPE实例牛奶中四环素残留检测方法优化=nonpolarPageopoa=polar=ionizablepKa=LogP=SPE选择KKKpKapKapKaAcidicCompoundsAcidBaseNeutralBasicCompoundsSampliQSAXSampliQOPTSampliQSCXPageSampliQOPT第一步采用标准溶液上样Condition:mlmethanolRinse:WatermAUload:mlsample=minWashWaterelute:土霉素PagemlmmoloxalicacidinmethanolblowdrywithN,dissolveresidueinml调整活化溶液的pHCondition:mlmethanolmAURinse:mlTFA(pH=)load:mlsample>minWash:mlwater(pH=)Pagemlwater(pH)土霉素不再流失第二步实际牛奶样品中添加四环素活化:ml甲醇平衡:mlTFA(pH=)样品制备:将g牛奶溶于mlmolLNaEDTAMcllyaine缓冲液中(pH=)于该溶液中加入ugg对照品混合min并于冰浴中超声min然后于上样:ml样品>min淋洗:mlTFA溶液(pH=)洗脱:对照品,混合min并于冰浴中超声min,然后于rmin离心min(低于),快速滤纸过滤。洗脱前真空抽干分钟mlmmol草酸甲醇溶液N吹干复溶于mlPage总体牛奶的净化效果良好stdMNOTCCTCDCMCOTCOTCsampleDMCTCOTCblankPage活化:ml 甲醇平衡:样品制备:将g鸡肉于mlmolLNaEDTAMcllyaine缓冲液(pH=)内均质于该混悬液中加入标准品,混合min冰浴超声min,于rmin离心min低于快速滤纸过滤SampliQOPT应用举例鸡肉组织里的四环素类药物ml TFA (pH=)上样:ml样品 >minwash:ml  TFA 溶液(Ph=)(低于),快速滤纸过滤。洗脱前小柱抽干minutes洗脱:ml mmol 草酸甲醇溶液N吹干, 复溶于 ml   PageSampliQOPT–鸡肉中的四环素类药物MINOOTCTCDMCTCDMCCTCDCSpikedstandardsinchickenCTCBlankPage化合物牛奶鸡肉牛奶(数据来自独立出版物)米诺环素(MNO)回收率比较SampliQOPTVS其他非极性聚合物小柱土霉素(OTC)四环素(TC)去甲金霉素(DMCTC)金霉素(CTC)金霉素(CTC)甲烯土霉素(MC)强力霉素(DC)Page应用实例苹果汁中抗真菌剂预处理ml 甲醇mlmolL 氨水上样ml  <mLmin淋洗:SampliQSCX淋洗:ml 甲醇‐molL 氨水(:)淋洗: ml molL 盐酸淋洗: ml molL 氨水Page淋洗: ml 甲醇洗脱: ml 氨化甲醇()Blank苹果汁中的抗真菌剂液相色谱图Spiked ugg多菌灵噻菌灵Page噻菌灵回收率和重复性CompundSpikedlevel(ugkg)Recovery()RSD()多菌灵Page噻菌灵准备萃取样品前处理无淋洗mLMHCl应用举例牛奶中种磺胺类药物小柱SampliQSCX淋洗mL甲醇水溶液加标ugmL淋洗mL甲醇水溶液活化mL甲酸甲醇溶液淋洗xmL甲醇平衡mL甲酸水溶液抽干真空下min上样mL全脂奶洗脱mL氨水甲醇溶液抽干真空下秒最终吹干流动相复溶Page牛奶中的磺胺药物加标对照空白空白PageLCMSMS谱图Allsulfadrugsat~mgmLinsolutionA:formicacidH(pH=)B:formicacidACNGradienttBPage提取多种类多残留样品分析前处理方法Quick快速Easy容易提取净化定量QuEChERS方法Cheap廉价Effective有效Rugged耐用Safe安全GCMS定量确认GCMSLCMSMSSlideadaptedfromKateMastovska,USDAARSPageQuEChERS操作流程图称量g样品加入mLTeflon离心管()加入mL乙腈()摇StepStep提取加入gMgSOgNaCl()加入内标溶液()取上清液加入剧烈振摇min()剧烈振摇min()振摇s并离心(,,)StepStep净化取上清液加入MgSOPSAdSPE()加入醋酸和“分析保护剂”用GCMSDorLCMS分析振摇s并离心(,)StepStepStepPage草莓样品预处理PageQuEChERS样品制备过程PageQuEChERS样品制备过程PageQuEChERSQuEChERSmethodmethod回收率回收率种农药GCMSandLCMSMS分析nggLettuceercentageofPesticidesnggOrangenggOrangenggLettucenggLettucenggOrange<>RecoveryPePageQuEChERSQuEChERSmethodmethod重现性重现性种农药GCMSandLCMSMS分析esnggLettucePercentageofPesticidenggLettucenggOrangenggOrangenggLettucenggLettucenggOrange>>>>>>RSDPageQuEChERS分析种农药总结一批个样品可以由一位分析者在min内完成样品处理。每个样品花费$材料费产生<mL废液并且只有一个需要清洗的离心管高的回收率大部分高的回收率(大部分RSDs<)该方法适合多种基质中的多农残分析该方法适合多种基质中的多农残分析如果你对QEChERS感兴趣安捷伦可以提供多种吸附剂如果你对QuEChERS感兴趣,安捷伦可以提供多种吸附剂QuEChERSBulkMagnesiumSulfatePSACarbonCgrambottlegrambottlePage总结)固相萃取是一种有效的样品前处理手段)SPE方法开发需要对被测目标化合物及基质理化性质的了解。通过这些信息来选择合适的SPE小柱。息来选择合适的小柱)大部分小柱有简单的“起始”方法。以此为基础调节pH,溶剂和离子强度等条件来优化回收率及重现性。)安捷伦SampliQ全新固相萃取产品线提供所有的类型和支持。Page参考资料AgilentSampliQ手册New!SampliQSalesFlyersPubNoENPage

用户评论(0)

0/200

精彩专题

上传我的资料

每篇奖励 +2积分

资料评价:

/30
2下载券 下载 加入VIP, 送下载券

意见
反馈

立即扫码关注

爱问共享资料微信公众号

返回
顶部