下载

1下载券

加入VIP
  • 专属下载特权
  • 现金文档折扣购买
  • VIP免费专区
  • 千万文档免费下载

上传资料

关闭

关闭

关闭

封号提示

内容

首页 侵袭性真菌感染的流行病学和诊断研究进展

侵袭性真菌感染的流行病学和诊断研究进展.PDF

侵袭性真菌感染的流行病学和诊断研究进展

孤独的猫
2011-07-16 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《侵袭性真菌感染的流行病学和诊断研究进展pdf》,可适用于自然科学领域

邀生物学免疫学进展年第卷第期ProginMierobiolImmunolNov.Vo.No.侵袭性真菌感染的流行病学和诊断研究进展杜艳黄东综述单斌审校(云南省昆明医学院第一附属医院昆明)摘要:伴随着侵袭性真菌感染(InvasivefungalinfectionI兀)的迅猛增长逐渐认识到对许多真菌诊断的重要性本文就侵袭性真菌感染的流行概况、危险因素以及传统和新近发展的诊断方法作一综述。关键词:侵袭性真菌感染流行病学诊断中图分类号:R文献标识码:A文章编号:().过去年随着真菌感染流行概况的显著变迁有关侵袭性真菌感染(InvasivefungalinfectionIFI)的诊断和治疗也发生了很大变化。本文就侵袭性真菌感染的流行概况、危险因素以及传统和新近发展的诊断方法作一综述。侵袭性真菌感染的流行趋势近年侵袭性真菌感染的发生率迅猛增长.¨J最常见的真菌感染原包括白色念珠菌(Candidaalbicans)、新型隐球菌(Cryptococcusneeformali,s)和烟曲霉(Aspergillusfumigatus)¨。感染涉及面从导管相关的真菌血症和腹膜炎到更多的局部感染及广泛的异源性播散⋯。起初认为这些真菌是非致病原目前认为免疫抑制致使侵袭性真菌感染为其主要病因。.念珠菌念珠菌是最重要的条件致病性真菌病原菌.¨J。年至今念珠菌相关的血流感染(BloodstreaminfectionBSI)发生率在全球各医院的各年龄段人群中呈增长趋势引。值得注意的是念珠菌仍然是重症监护病房ICU、固体器官移植和血液骨髓移植(BMT)病人中最常见的真菌病原菌。侵袭性念珠菌炎症能对病人致死或住院日延长。最常见的白色念珠菌能引起%~%的机体黏膜感染和%一%念珠菌血症.】。大约%~%的念珠菌相关BSIs均由白色念珠菌(C.albicans)、光滑念珠菌(C.glabrata)、近平滑念珠菌(C.parapsilosis)、热带念珠菌(C.tropicalis)和克柔收稿日期:修回日期:作者简介:杜艳(一)女病原生物学博士副主任检验师主要从事临床细菌耐药机制的研究。Email:duyanmyahoo.tom.cn念珠菌(C.krusei)引起引¨。真正的BSI起因是光滑念珠菌它对吡咯类和其他常用抗真菌药物具有内在的和获得性的耐药¨。..白色念珠菌引起人类感染的念珠菌中最重要的菌种。生殖器、口腔和皮肤浅表感染(>%)都由白色念珠菌所致。年到年对个国家个监察点发现全球白色念珠菌分离率呈下降趋势(总下降%~%)¨J。拉丁美洲%BSI相关病例由白色念珠菌引起而欧洲是%【】。已证实在老年人】¨、使用吡咯类药物后病人和ICU病人中较少发生BSI。虽然通常认为白色念珠菌是内源性致病菌但也见有经卫生人员的手传播的报道。..光滑念珠菌已证实自年有关美国ICU中BSI的起因念珠菌中只有光滑念珠菌增加了。大量研究表明该菌较少在婴儿和儿童中定殖和感染而在老年人中的感染明显增加¨川。大于岁病人中念珠菌相关的BSI约三分之一由光滑念珠菌所致且这种真菌血症的变化似乎是多因素的引¨。已证实该菌种的流行可能与地理特征、年龄引¨、被研究病人的特点以及氟康唑的使用有关引。..近平滑念珠菌在念珠菌中属于第二位的常见种欧洲报道为%亚太地区为%而最近在拉丁美洲从%上升到%。被认为是植导管住院病人中的重要病原菌¨也是健康卫生人员手上最常见菌种。近平滑念珠菌比其他念珠菌更容易在导管和植入装置的表面和腔内形成大面积的生物膜¨¨这可以解释为什么近平滑念珠菌感染导管病人应该首先去除该装置的原因。有研究表明生物膜形成的菌种对抗真菌药物具有强的耐药性¨¨。近平滑念珠菌能引起一部分导管相关真菌微生物学免疫学进展年第卷第期ProginMicrobiolImmunolNov.Vol:墨Z:血症的院内爆发表明应重视手的卫生和导管的消毒与护理¨。..热带念珠菌长期以来被认为是癌症病人尤其是败血症和BMT受体中真菌血症和侵袭性念珠菌炎症的重要病因】。热带念珠菌定植的中性粒细胞减少症病人中约%~%最终发展为侵袭性感染引¨在粘膜完全被破坏的病人中热带念珠菌的毒力会增强引¨。以氟康唑治疗中性粒细胞减少病人可降低热带念珠菌和白色念珠菌引起的感染J。在北美洲虽然热带念珠菌只是属于第四位最常见的念珠菌相关BSI菌种(%)而在拉丁美洲却排名在第二位(%)在亚太地区热带念珠菌比光滑念珠菌更为常见(%比%)。..克柔念珠菌能引起%~%的念珠菌相关BS【.J尤其用氟康唑预防时最容易产生【】.】。同热带念珠菌一样其感染常发生在中性粒细胞减少病人中一旦出现定植该菌株则预示随后发生BSIlJ。已知克柔念珠菌对氟康唑耐药对两性霉素B和氟胞嘧啶的敏感性也逐渐有下降【l】需进一步联合应用其它药物治疗。由克柔念珠菌引起的BSI死亡率很高也许是它对常规抗真菌治疗的反应性低所致。在某些医学中心克柔念珠菌的定植和感染早于氟康唑的使用引¨。.曲霉菌曲霉病是由包括曲霉属成员引起的大范围疾病。暴露于环境中的曲霉会对过度的敏感宿主引发过敏性反应高度免疫抑制个体会引起破坏性侵袭性肺部和播散性疾病。已报道约有种曲霉是人类病原菌最常见的是烟曲霉(Aspergillusfumigaf)黄曲霉(Aspergillu~flavus)黑曲霉(Aspergillu~niger)和土曲霉(Aspergillusterrus)。曲霉菌全世界很常见其分生孢子普遍存在于空气土壤和腐烂物质中。在医院内曲霉菌可存在于空气、淋浴喷头、贮水槽和盆栽植物中¨其孢子经常被吸人。宿主反应类型、相关的病理特征和感染程度多取决于宿主而不是曲霉菌的毒力或致病性引¨。.危险因素众所周知某些住院病人(血液病恶性肿瘤或中性粒细胞减少病人、经历胃肠道外科手术病人、早产儿和大于O岁的老人)是得病的危险因素特殊的暴露、插入血管导管、广谱抗生素的应用以及肾功能差都会导致念珠菌的粘膜定居重症监护病房(IntensivecareunitICU)住院日的延长和完全肠胃外的营养接收等¨。ICU环境提供了念珠菌在病人间传播的机会已证实是额外的独立危险因素引¨。这些病人中约有%死于念珠菌感染%死于潜在的疾病%会继续住院¨。通过有效预防、诊断和治疗可治愈约%的念珠菌症病人引。.预防和经验治疗通过严格控制广谱抗生素的应用提高导管护理和控制感染等。根据病人危险因素的分层而分类病人能减少感染相关的死亡引¨利于早期诊断和治疗干预。针对假设念珠菌症的潜在最大死亡率和早期注射遇到的困难及有效抗真菌药物治疗的成败而采取的预防措施¨:①提高医护人员手的卫生②最佳的导管护理③慎用抗生素。已证实能预防和有效降低中性粒细胞减少病人的黏膜感染和侵袭性念珠菌炎症的发生。现行的诊断方法伴随真菌性疾病发生率逐年增多逐渐认识到许多真菌诊断的重要进展主要包括一些传统的诊断(直接镜检、培养和组织病理的方法)和新的非培养方法(血清学技术和分子诊断)。.传统实验室真菌感染诊断方法易发展为条件致病性真菌疾病的典型高危病人其炎症性反应会降低感染会随病程的发展而加剧因此会增加诊断的难度。首先要识别感染的高危人群以便能更直接的掌控这些病人其次建立提供早期和更可靠的感染证据的实验方法。真菌感染的成功诊断和治疗效果取决于临床医师、医学真菌学家和病理学家的共同努力。根据可能获得真菌感染的危险认真划分病人将会提高使用新的和传统诊断方法的正确性。..直接镜检直接镜检是检查真菌存在最快速有效和廉价的真菌感染诊断方法有助于实验室选择合适的方法培养临床标本和解释培养结果。由组织胞浆菌等引起的感染直接镜检通常能提供一个病原学诊断。对其他的感染镜检通常提示酵母菌或霉菌的原始信息某些情况下形态学表现可提供感染类型的推定诊断(如结核菌病和念珠菌炎症)但并非是实际的病原菌。直接镜检看见的真菌形态学特征包括芽孢、菌丝和假菌丝。结合芽孢和假菌丝可以区分念珠菌。微生物实验中直接镜检常依赖于%~%的KOH、涂片染色和革兰或姬姆萨染色。直接检查不如培养敏感其阴性结果不能排除真菌感染。微生物学免疫学进展年第卷第期ProginMicrobiolImmunolNov.Vo.No...组织病理学方法组织中显示的真菌成分是诊断侵袭性真菌病的基础但确切的诊断需要分离和鉴定这种感染性微生物。例如组织中透明菌丝形成的菌种(如霉菌属镰刀菌属等)的菌丝镜下形态很相似但需明确是哪种病原菌因为不同真菌对抗真菌药物的敏感性明显不同。为检测小量微生物和准确定义感染微生物的形态学特征必须用特殊的免疫组化染色如莫里乌洛托品银染和定期的席夫酸染色。用FontanaMasson染细胞壁的黑色素可使轻微色素沉着的暗色在不完全真菌和酸突出以区分组织中荚膜阴性的新型隐球菌菌株(黑色素阳性)和其他酵母菌(黑色素阴性)。也可通过真菌中荚膜多糖的糙茎牵牛素染色鉴定组织中的新型隐球菌。此外也发展了单克隆和多克隆荧光抗体原位区分霉菌属、镰刀菌属和足放线病菌属。但由于这些和其他真菌病原菌(如拟青霉属)之间的高度抗原相关性交叉反应明显特异性低u。目前还没有商业化的荧光抗体原位检测真菌。..培养真菌生殖期比其他大多数细菌更长导致标本中的发现率低。现已在血液中可提高真菌培养成功的能力。当播散性疾病存在时血培养物可能是阴性但是真菌病的检测有助于诊断由念珠菌属、霉菌等引起的条件致病性感染。Wampole的溶细胞离心法和持续自动血培养监测系统都是敏感的检测方法引¨。后来发展的含溶细胞素、树脂、木炭或硅藻土的专门肉汤培养基结合持续振荡有助于提高培养系统的性能。但实验室集中的溶细胞离心法经常发生培养物的污染。.真菌鉴定的新方法大多数酵母菌的鉴定基于碳水化合物的吸收和发酵以及在特殊培养基上生长的形态学特征。霉菌的鉴定主要基于宏观和微观形态学特征。新近发展的色素形成和分子方法检测假定的酵母菌和霉菌缩短了鉴定的时间。..色素形成方法琼脂培养基中加人某种底物或色素原可直接检测特异性的酶活性以筛选酵母菌。CHROMagar这样一种可同时区分白色念珠菌、克柔念珠菌和热带念珠菌的培养基可缩短鉴定微生物的时间可更简便检测样本中存在的多种酵母菌】。此外还发展了以检测L.脯氨酸氨基肽酶和B一半乳糖苷酶为基础的其他色素形成培养基和一种快速鉴定白色念珠菌的快速比色法¨。..白色念珠菌多肽核酸(PNA)荧光原位杂交法(FluorescenceinsituhybridizationFISH)针对白色念珠菌SrRNA的荧光标记的PNA探针加到血涂片上杂交O分钟荧光显微镜检查。最近研究资料表明这种试验直接检测血培养物中的白色念珠菌敏感性(%一%)和特异性好¨。FISH结果不受血培养系统类型或肉汤成分的影响。这种方法比传统方法节省~小时。医生可在知道血培养阳性结果的同时知晓真菌的种类。快速准确的鉴别白色念珠菌可提高药物对患者的最佳疗效、医院内抗真菌的效果和节省费用。..分子方法针对真菌rRNA的化学发光标记的DNA探针与真菌裂解物一起孵育探针的敏感性同前但根据真菌实验不同特异性而有所降低。探针对荚膜组织胞浆菌(Hcapsulatum)和粗球孢子菌(Coccidiodesimmitis)的特异性是%而对皮炎芽生菌(B.dermatitidis)则为.%因为和巴西副球孢子菌(Paracoccidioidesbrasiliensis)存在交叉反应】。最近研究证实这些方法已作为酵母菌和霉菌临床鉴别的强有力工具。.直接检测IFI的免疫学、生化和分子标记物对非侵袭性真菌感染特异的快速、敏感诊断试验为及时特异性治疗提供了良好的基础。鉴于此直接检测抗体、细胞壁成分和真菌特异核酸的试验具有很大的吸引力”。由于许多真菌感染病人未能达到一定的特异抗体应答致使大多数传统直接检测血清抗体的血清学试验无效。而且典型急性感染的确定需要急性期和恢复期血清双份样本中的抗体应倍以上的升高。免疫和生化方法直接检测血清或其他体液中真菌细胞壁和胞浆抗原是血清学诊断IFI的最直接方法。该方法最好的例子是检测新型隐球菌和组织胞浆菌多糖抗原的应用驯。..免疫生化技术新近发展的乳糖甘露糖(GM)免疫分析诊断侵袭性曲霉(InvasiveaspergillosisIA)和().B.D一葡聚糖(BG)分析诊断曲霉、念珠菌和其他条件致病性真菌引起的侵袭性疾病¨在条件致病性真菌感染的快速诊断中非常重要。GM是曲霉菌种特异的细胞壁多糖能在IA病人血清和其他体液中检测到。根据A值报道GM水平可通过双三明治EIA检测但也存在假阳性。BG是许多病原性真菌的细胞壁成分当侵袭性疾病发生时病人血清中可检测到但也存在假阳性。..分子技术迄今确认的临床微生物实验室的分子技术主要应用于病毒诊断。由于现存真菌诊断的局限性而PCR也可应用于真菌诊断领域。微生物学免疫学进展年第卷第期ProginMicrobiolImnov!Q:!:!已有研究PCR诊断临床样本中念珠菌病和IA“。虽然靶序列变化很大但大多包括核糖体基因(SrRNA)或内部转录空白区(Spacerregions)(,。念珠菌炎症的敏感率为%一%IA病人为%一%【】。特异性变化很大存在假阳性采集血清或血浆比呼吸道的样本好因为较少发生分生孢子污染。最近证实PCR定量和GM抗原检测相结合能提高诊断侵袭性肺部曲霉菌炎症的敏感性和特异性引。同样抗原检测和血清实时PCR的结合有利于每周筛查血液学紊乱病人的IA【。已证实PCR扩增后限制性内切酶分析、测序或用一系列属、种特异性探针杂交是可行的。目前IFI的PCR诊断虽有报道但仍未在临床广泛使用而且也未完全证实在快速诊断免疫力低下的宿主中IFI时PCR可补偿培养的局限性实时PCR和微阵列平台、结合真菌抗原检测将有助于改进这个难题。展望传统的真菌学和组织病理学技术诊断真菌感染由于不太敏感耗时且费劲。医学微生物学家和临床工作者主要关注真菌疾病的早期诊断和非侵袭性方法。虽然近O年已经取得很大进展仍有很多工作需要做应进一步直接向扩大新的USFDA确证的和CLSI推荐的试验努力发展确认真菌疾病的分子诊断技术。与传统方法相比扩增为基础的分子技术使鉴别酵母菌和霉菌更快速客观引。核糖体的靶位和内部的转录空白区域提示了某些真菌的分子鉴别特殊前景。然而对它们现存的序列资料库有限。可以预言随着可应用测序技术的提高、更宽和更可信赖数据库的建立以及可应用的简便试剂盒和软件这项技术将会取代目前临床现行传统真菌学鉴别技术。参考文献:PfallerMADiekemaDJ.Rareandemergingopportunisticfungalpathogens:COHCeMforresistancebeyondCandidaalbicar~andAs一.PefwJ.JClinMicrobiol():.WisplinghoffHBischoffTTallentSMeta.NosocomialbloodstreaminfectionsinUShospitals:analysisofcasesfromaprospoetivenationwidesurveillancestudyJ.ClinInfectDis():.(HajjehRASofairANHarrisonLHeta.Incidenceofbloodshe帅infectionsduetoCandidaspeciesandinvitmsuseeptibilitiesofisolatescoHectedfromtoinapopulationbasedactivesurveillanceprogramJ.JClinMicmbiol():一l.(ArendrupMCFuurstedKGahrnHansenBeta.Seminationalsurveillanceof丘ngemiainDenmark:notablyhighratesoflungem/aandnumbeFofisolateswithreducedazolesusceptibilityJ.JClinMicmbiol():.CuencaEstrellaMRodriguezDAlmiranteBet.Invitrosug.ceptibilitiesofbloodstreamisolatesofCandidaspeciestosixantifunga】agents:resultsfromapopulationbasedactivesurveillanceprogrammeBarcelonaspainJ.JAntimicrobChemother。():·.MartinDPematFPiensMAet.Candidaspeciesdistribu·tioninbloodstreamculturesinLyonFranceJ.EurJClinMicmbiolInfectDis():.(PfallerMADiekemaDJRinaldiMGeta.ResultsfromtheARTEMISDISKglobalantifugalsurveillancestudy:a.yearBnalysisoftheworldwidesusceptibilityofyeaststoflueonazoleandvoriconazoleusingstandardizeddiskdiffusiontestingJ.JClinMicrebiol():.MartKASeidelK。WhiteTCeta.CandidemiainallogeneiebloodandmalTowtransplantrecipients:evolutionofriskfactomat'tertheadoptionofprophylacticfluconazoleJ.JInfectDis():.(MarcoFLookhartSRPfallerMAeta.ElucidatingtheoriginsofnosocomialinfectionwithCandidaalbicaasbyDNAfingerprintingwiththecomplexprobeCa(J.JClinMicrobiol():.MalaniAHmoudJChiuLeta.Candldaglabratafungemia:experienceinatertiarycarecenterJ.ClinInfectDis():.KuhnDMChandraJMukherjeePKeta.ComparisonofbiofilmsformedbyCand/daalbicansandCand/daparapsilosisonbioprostheticsurfacesJ.Infectlmmun():.SarvikiviELyytikainenOSollDRet.Emergenceofflu·conasoleresistanceinaCandidaparapsilosisstrainthatcausedinfectionsinaneonatalintensivecareunit(J.JClinMicrobiol():.(WingardJR.ImportanceofCandidaspeciesotherthanC.albicⅡmaspathogensinoncologypatients(J.ClinInfectDis():.PerfectJRCoxGMLeeJYeta.TheimpactofcultureisolationofAspergill~species:ahospitalbasedsurveyofaspe~illosisMycosesStudyGroup(J.ClinInfectDis():·.(AnaissieEStrattonSLDignaniMCeta.Pathogenic卸哪弘lusspeciesrecoveredfromahospitalwatersystem:ayearpro.spectivestudyJ.ClinInfectDis():.WenzelRPGenningsC.BloodstreaminfectionsduetoCandidaspeciesintheintensiveCgl'eunit:identitylngespeciallyhishriskpatientstodeterminepreventionstrategiesJ】.ClinInfectDis(Suppl):$.(MorrelMFraserVJKollefMH.Delayingtheempirictreatment微生学免疫学进展年第卷第期ProginMicrobiolImmunolNov.Vo.No.()(ofCandidabloodstreaminfectionuntilpositivebloodculturere·suhsreobtained:apotentialriskfactorforhospitalmortalityJ.AntimicrobAgentsChemother():.KanfmanL.LaboratorymethodsforthediagnosisandeonfirmationofsystemicmycosesJ.ClinInfectDis(Suppl):$.MagadiaRWcinsteinMP.LaboratorydiagnosisofbacteremiaandAngemia(J.InfectDisClinNorthAm():..OddsFCBernaertsR.CHROMagarCandidaanewdifferentialisolationmediumforpresumptiveidentificationofclinicallyimportantCandidaspecies【J】.JClinMicrobiol():..BaumgartnerCFreydiereAMGilleY.DirectidentificationandrecognitionofyeastspeciesfromclinicalmaterialbyusingalbicansIDandChromagarcandidaplatesJ.JClinMicrobiol():.WilsonDAJoyceMJHallLSeta.MulticenterevaluationofaCandidaalbicanspeptidenucleicacidfluorescentinsituhy·bridizationprobeforcharacterizationofyeastisolatesfrombloodculturesJ.JClinMicrobiol():.AlexanderBDDoddsAshleyESRellerLBeta.CostsavingswithimplementationofPNAFISHtestingforidentificationofCandidaalblcansinbloodculturesJ.DiagnMicrobiolInfectDis():.PadhyeAASmithGMcLaughlinDeta.ComparativeevaluationofchcmilumineseentDNAprobeassaysandexoantigentestsforrapididentificationofblastomycesdermatitidisandcoccidioidesimmitisJ.JClinMicrobiol():.HallLWohlfielSRobertsGD.ExperiencewiththeMicroSepDlargesubunitribosomalDNAsequencingkitforidentificationoffilamentous丘encounteredintheclinicallaboratoryJ.JClinMicrobiol():.HsiaoCRHuangLBoucharaJPeta.IdentificationofmedicallyimportantmoldsbyalloligonucleotideassayJ.JClinMi·crobiol.():.YeoSFWongB.Currentstatusofnonculturemethodsfordiag·nosisofinvasivefungalinfectionsJ.ClinMicrobiolRev():.(VilchezRAFungjKusneS.Cryptococcosisinorgantransplantrecipients:anoverviewJ.AmJTransplant():.)WheatLJGarrlngerTBrizendineEeta.DiagnosisofhistoplasmosisbyantigendetectionbaseduponexperienceatthehistoplasmosisreferencelaboratoryJ.DiagnMicrobiolInfectDis():.MenninkKerstcnMASHDonnellyJPVerweijPE.DetectionofcirculatinggalactomannanforthediagnosisandmanagementofinvasiveaspergillosisJ.LancetInfectDis():.OstroskyZeichnerLAlexanderBDKettDHeta.Multicenterclinicalevaluationofthe()BDglucarIassayasanaidtodiagnosisoffungalinfectionsinhumansJ.ClinInfectDis():.MusherBFredrieksDLeisenringWeta.AspergillusgalactomannanenzymeimmunoassayandquantitativePCRfordiagnosiofinvasiveaspergillosiswithbronchoalveolarlavagcfluidJ.JClinMicrobiol():.KawazuMKandaYNannyaYeta.ProspectivecomparisonofthediagnosticpotentialofrealtimePCR.doublesandwichenzymelinkedimmunosorbentassayforgalctomannananda(})一Dg】ucantestinweeklyscreeningforinvasiveaspergillosisinpatientswithhematologicaldisorders(J.JClinMicrobiol():.

VIP免券下载文档

用户评价(0)

关闭

新课改视野下建构高中语文教学实验成果报告(32KB)

抱歉,积分不足下载失败,请稍后再试!

提示

试读已结束,如需要继续阅读或者下载,敬请购买!

文档小程序码

使用微信“扫一扫”扫码寻找文档

1

打开微信

2

扫描小程序码

3

发布寻找信息

4

等待寻找结果

我知道了
评分:

/5

侵袭性真菌感染的流行病学和诊断研究进展

VIP

在线
客服

免费
邮箱

爱问共享资料服务号

扫描关注领取更多福利