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HPLC色谱柱故障排除.pdf

HPLC色谱柱故障排除.pdf

上传者: mkyye 2011-07-14 评分 0 0 0 0 0 0 暂无简介 简介 举报

简介:本文档为《HPLC色谱柱故障排除pdf》,可适用于自然科学领域,主题内容包含AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱HPLC色谱柱故障排除杭州苏州无锡年月日~日AgilentTech符等。

AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱HPLC色谱柱故障排除杭州苏州无锡年月日~日AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱*泵*进样器自动进样器*色谱柱*检测器*数据系统积分仪HPLC系统组件所有组件均会发生问题都需要进行故障排除!AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱A色谱柱柱压B色谱峰峰形HPLC色谱柱故障症状AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱A色谱柱柱压柱压过高*陶瓷片堵塞*色谱柱污染*色谱柱填料堵塞清洗色谱柱清除色谱柱污染物和堵塞的柱填料大分子量色谱柱吸附物样品或缓冲液沉淀反冲色谱柱清洗堵塞的陶瓷片更换陶瓷片查原因矫正柱压检查有无色谱柱时系统的压力柱压问题有时由系统或预柱堵塞引起AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱A色谱柱柱压冲洗色谱柱用比流动相更强的溶剂反相色谱柱用以下溶剂至少各mL冲洗色谱柱(分析柱)•不含缓冲盐的流动相•甲醇•乙腈•乙腈异丙醇•异丙醇•二氯甲烷*•己烷**若使用己烷或二氯甲烷冲洗色谱柱则在重新使用反相流动相以前必须用异丙醇冲洗色谱柱!!!正相色谱柱用以下溶剂至少各mL冲洗色谱柱(分析柱)•甲醇三氯甲烷•乙酸乙酯AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱戴手套防止柱床干涸不要用身体接触柱体体温会使柱填料膨胀溢出色谱柱不要拧得过紧色谱柱入口陶瓷片耐压隔垫柱体柱接头柱接头更换陶瓷片A色谱柱柱压AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱A色谱柱柱压预防柱压过高*采取色谱柱保护措施保护柱在线过滤器*样品制备*适当适时冲洗色谱柱*含缓冲盐的流动相一定要过滤*保持更换缓冲液和水AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱A色谱柱柱压预柱作用于流动相保护柱在线过滤器作用于样品样品制备•化学溶剂•去除颗粒聚合物过滤样品离心分离•固相萃取(SPE)检测器流动相预柱进样器保护柱分析色谱柱过滤器样品AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱HPLC色谱柱故障症状A色谱柱柱压B色谱峰峰形AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱色谱柱“二次作用“色谱柱死体积色谱柱污染色谱柱寿命色谱柱容量柱外效应B色谱峰峰形*裂分峰*色谱峰拖尾*色谱峰峰扩展*柱效低许多色谱峰峰形问题都是复合型问题色谱峰扩展和拖尾或拖尾随保留加剧AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱B色谱峰峰形裂分峰*色谱柱污染复杂样品基体或待测样品量大*颗粒物堵塞陶瓷片复杂样品基体或待测样品量大*色谱柱死体积流动相pH>时硅胶溶解(除非使用特殊色谱柱)*样品溶剂效应样品溶剂强于流动相裂分峰和扩展峰取决于样品量AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱B色谱峰峰形裂分峰色谱柱污染一次进样后次进样后一次进样后用ACN冲洗色谱柱再次进样色谱柱:StableBondSBCxmm,mm流动相:mMNaHPO,pH:MeOH流速:mLmin温度:C检测器:UVnmTime(min)Time(min)Time(min)样品:过滤后的OTC感冒药假麻黄碱APAP未知扑尔敏AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱色谱柱:StableBondSBC,xmm,mm流动相:HO:ACN进样量:mLB色谱峰峰形裂分峰样品溶剂A样品溶剂乙腈B样品溶剂流动相样品:咖啡因水杨酰胺Time(min)Time(min)ONHOHNNNNOOCHCHCHAgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱样品基体或待测物复杂色谱柱污染物或颗粒物堵塞陶瓷片滤芯流动相pH>由于硅胶溶解导致色谱柱死体积增加(可使用能承受高pH的特殊固定相色谱柱避免此问题)样品溶剂溶解能力强于流动相裂分峰和色谱峰扩宽(与进样体积有关)B色谱峰峰形裂分峰的原因AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱B色谱峰峰形*考虑流动相效应改变流动相pH或添加化学试剂消除二次作用*考虑色谱柱选择选用高纯硅胶色谱柱或不同键合技术色谱柱*减少样品进样量*消除色谱柱柱外效应冲洗色谱柱检查色谱柱寿命和死体积拖尾峰AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱B色谱峰峰形拖尾峰色谱柱“二次反应”样品:去甲麻黄碱麻黄素苯丙胺脱氧麻黄碱苯丁胺使用流动相改性剂三乙胺(pH=),峰拖尾现象被消除色谱柱:StableBondSBC,xmm,mm流动相:mMNaHPOpH:ACN流速:mLmin温度:CTIme(min)Time(min)NoTEAUSPTF()mMTEAUSPTF()AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱B色谱峰峰形降低流动相pH可降低硅羟基的反应从而减轻色谱峰拖尾拖尾峰色谱柱“二次反应”色谱柱:StableBondSBC,xmm,mm流动相:mMNaHPOpH:ACN流速:mLmin温度:C样品:去甲麻黄碱麻黄素苯丙胺脱氧麻黄碱苯丁胺Time(min)pHUSPTF()Time(min)pHUSPTF()AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱PlatesTFB色谱峰峰形样品:•尿嘧啶•苯酚•,氯硝基苯•甲苯色谱柱:StableBondSBC,xmm,um流动相:HO:MeOH流速:mLmin温度:室温检测器:UVnm色谱柱正常连接方向反接色谱柱用异丙醇,C冲洗色谱柱后拖尾峰色谱柱污染Time(min)Time(min)Time(min)PlatesTFPlatesTFAgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱B色谱峰峰形拖尾扩展峰色谱柱容量样品:地昔帕明去甲替林多塞平米帕明阿米替林曲米帕明色谱柱:xmm,mm流动相:mMNaHPOpH:ACN流速:mLmin温度:C宽峰CompetitiveCPlatesCD拖尾EclipseXDBCUSPTF()ABABCHighLoadxLowLoadTime(min)DTime(min)Time(min)Time(min)AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱B色谱峰峰形拖尾扩展峰色谱柱死体积同一个色谱柱问题会引起多种色谱峰峰形变化!高pH下硅胶溶解导致色谱柱死体积次进样后起始状态流动相:ACN:水:TEA(~pH)AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱B色谱峰峰形拖尾峰柱外效应色谱柱:SB–Cxmm,mm流动相:HO(含TFA):ACN流速:mLmin温度:C样品:•马来酸扑尔敏•假麻黄碱Time(min)Time(min)Plates上一次进样残留的“鬼峰”若最后流出的色谱峰的塔板数极低表明此峰是上一次进样的后流出组分的残留AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱B色谱峰峰形拖尾峰进样器不密封色谱柱:BonusRPxmm,mm流动相:HO:MeOH流速:mLmin温度:室温检测器:UVnm样品:尿嘧啶苯酚N,N二甲基苯胺未更换前更换马达密封垫和隔离垫以后逾期没有进行仪器维护保养会导致色谱峰峰形问题Time(min)Time(min)PlatesUSPTF()PlatesUSPTF()AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱色谱柱:StableBondSBC,xmm,mm流动相:HOwithTFA:ACN流速:mLmin温度:CL柱外体积(管线)Time(min)L柱外体积Time(min)B色谱峰峰形拖尾峰柱外体积样品:苯丙胺酸benzyl,dioxopiperazineaceticacidAspPhe天冬甜素AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱HPLC色谱柱故障症状A色谱柱柱压B色谱峰峰形C保留时间AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱*色谱柱寿命*色谱柱污染*平衡时间不够*色谱柱与流动相的匹配性不好*流动相发生改变*流速发生改变*其它仪器问题C保留时间保留色谱柱和分析结束时间都发生改变AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱向流动相中添加新鲜的三氟乙酸C保留时间保留改变流动相改变流动相中挥发性的三氟乙酸挥发MeOH:TFAAgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱保留时间的影响因素*流速tr温度Ctr有机相trpHtr*摘自“HPLC系统故障排除”,JWDolanandLRSnyder,pC保留时间AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱C保留时间保留选择性改变色谱柱寿命平衡初始流动相冲洗用HPO进行清洗待测物对老化色谱柱的流动相敏感冲洗色谱柱后可得到峰形和保留的改善AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱C保留时间不同色谱柱保留选择性的改变流动相改变换用新鲜流动相后问题解决换用新色谱柱后问题依然存在AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱C保留时间对色谱柱选择性改变进行归类的实验条件若α的变化>建议更换键合相或硅胶键合相测试硅羟基活性测试萘蒽流动相:CHOHHO样品萘蒽Time(min)Time(min)流动相:CHOHHO样品二甲基苯胺甲苯AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱*柱压过高*峰形不理想结论HPLC色谱柱问题的症状有时此类问题并非由色谱柱引起而是由仪器和实验条件引起!AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱感谢您的关注与支持!安捷伦科技竭诚助您梦想成真!AgilentTechnologies页免费服务电话:MarchZorbax色谱柱HPLCHPLC色谱柱色谱柱更多促销与技术支持更多促销与技术支持敬请咨询安捷伦科技敬请咨询安捷伦科技mmμm促销价:RMB,mmμm促销价:RMB,最近促销最近促销年月日~月日ZorbaxZorbaxStableBondStableBondmmμm促销价:RMB,mmμm促销价:RMB,mmμm促销价:RMB,mmμm促销价:RMB,mmμm促销价:RMB,mmμm促销价:RMB,mmμm促销价:RMB,mmμm促销价:RMB,mmμm促销价:RMB,mmμm促销价:RMB,

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