针刺对实验性肥胖大鼠减肥作用及脂肪细胞形态研究

针刺对实验性肥胖大鼠减肥作用及脂肪细胞形态研究 ·基础研究· 针刺对实验性肥胖大鼠减肥作用及脂肪细胞形态研究张中成孙志刘志诚基金项目：国家自然基金资助项目（!""#$"%!）作者单位：&’$’%$ 广州，广东省中医院（张中成）；济宁医学院（孙志）；南京中医药大学（刘志诚）【摘要】目的观察针刺对肥胖大鼠的减肥作用及其对脂肪细胞形态的影响。方法建立实验性肥胖大鼠模型，分组观察针刺对肥胖大鼠的体质量、附睾脂肪、肾周脂肪、心包周脂肪及肝肾重量的影响，并采用 ()染色法观察脂肪细胞形态的变化。结果肥胖大鼠体质量［（&’%* %+...

·基础研究· 针刺对实验性肥胖大鼠减肥作用及脂肪细胞形态研究张中成孙志刘志诚基金项目：国家自然基金资助项目（!""#$"%!）作者单位：&’$’%$ 广州，广东省中医院（张中成）；济宁医学院（孙志）；南京中医药大学（刘志诚）【摘要】目的观察针刺对肥胖大鼠的减肥作用及其对脂肪细胞形态的影响。方法建立实验性肥胖大鼠模型，分组观察针刺对肥胖大鼠的体质量、附睾脂肪、肾周脂肪、心包周脂肪及肝肾重量的影响，并采用 ()染色法观察脂肪细胞形态的变化。结果肥胖大鼠体质量［（&’%* %+ , ’!* &-）.］、附睾周脂肪［（&* ’+ , ’* &#）.］、肾周脂肪［（/* ’% , %* /-）.］、心包周脂肪［（’* $+ , $* ’/）.］及白色脂肪细胞的体积［（!* &- , %* &$）!0!］均显著高于正常大鼠水平；针刺治疗后，针刺组大鼠体质量［（++%* ’$ , !$* !%）.］、附睾周脂肪［（!* &# , $* &$）.］、肾周脂肪［（&* /+ , %* +#）.］、心包周脂肪［（$* #% , $* $&）.］及白色脂肪细胞的体积［（’* #$ , ’* %&）!0!］均显著下降，大鼠白色脂肪细胞的体积缩小，胞体塌陷，棕色脂肪血管周围的白色脂肪减少。结论针刺对肥胖大鼠白色脂肪细胞形态的影响可能是实现减肥的形态基础。【关键词】针刺；肥胖；大鼠；减肥；脂肪细胞；形态 !"#$%"&"’()*& "+,-#.*/("0 "0 *)1$10)/1#- /#-*/2-0/ -33-)/ "0 3*/ )-&& "3 4(-/5 (041)-4 "+-,(/6 #*/ !"#$% !&’()*+&,()，-.$ !&/，01. !&/*+&,()2 %34()5’() 67’8/(+, 9:; "’<=/>4? ，%34()@&’3 &’$’%$ ，:&/(4 【7+,/#*)/】 8+9-)/(.- 12 2345675 895 5::5;8 2: 65<=;>?. :@8 2: @;=A=?;8=65 865@805?8 >? 23545 6@84 @?< 895 5::5;8 2? 49@A5 2: :@8 ;5BB*!-/%"4, )CA56>05?8@B :@8 02<5B 6@84 D565 48@3B>495< @?< D565 2345675< 895 >?:B=5?;5 2: @;=A=?;8=65 865@805?8 2? 65<=;>?. 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D565 65<=;5<* ;"0)&1,("0 H8 0@E 35 895 3@4>; 05;9@?>40 2: 895 >?:B=5?;5 82 65<=;5 :@8 2: @;=A=?;8=65 865@805?8* 【<-6 ="#4,】 G;=A=?;8=65； I354>8E； J@8 ;5BB； K@84； L5>.98 65<=;8>2?； M26A92B2.E 随着社会的进步，生产的发展，人们生活方式的改变，肥胖症的发生日益增多，因肥胖导致的糖尿病、高血压、冠心病、高脂血症等严重影响着人类健康，加强对肥胖症的研究已成为 %’ 世纪重大的医学课题。本课题以实验性肥胖大鼠为模型，观察了针刺对肥胖大鼠的减肥作用及其对脂肪细胞形态的影响。材料与方法一、实验动物与模型制作 ’ 月刚断乳健康 NO雄性大鼠，体质量 -$ P "$.，由南京军区总院实验动物中心提供。模型参照刘志诚等［’］的制作方法，稍加改进。二、动物分组以普通全价饲料喂养的大鼠作为正常对照组，简称正常组（- 只）；将造模成功的肥胖大鼠随机分为 % 组，一组不作治疗，为模型组（- 只）；另一组给予针刺治疗，为治疗组（- 只）。三、治疗方法治疗前将所有大鼠放入自制大鼠固定器适应 ! <， ’ 次 Q <，每次 ’$ 0>?。治疗时将针刺组大鼠放入固定器中，取后三里，内庭穴，定位参照华氏［%］的定位方法，常规用安尔碘消毒。左右侧交替，用 !% 号长 ’ 寸毫针，刺入上二穴，分别刺入 & 00和 ! 00。操作者觉针下沉紧得气后，后三里平补平泻，捻转运针，内庭穴捻转泻法，各运针 ’ 0>?。然后接通 R-/$& 型电针仪（福建省医疗器械厂生产），强度为 ’* & S的连续电波，频率 ’$ (T，以肢体微动为度，时间 ’$ 0>?。处理时间在 / P "@0之间进行，每日 ’ 次，连续治疗 ! 周。四、实验方法治疗期间，正常组，模型组大鼠除不针刺外，其他处理同针刺组。所有大鼠在治疗期间均饲普通全价饲料，自由摄食饮水，每日更换饲料和水。实验前后观察大鼠摄食量、饮水量、体质量、体长、U55’4指数［!］的变化，U55’4 指数计算公式：（体质量 Q体长）V ’$$$。实验结束，禁食过夜，次日乙醚麻醉，迅速切开腹胸腔剪取附睾、肾周、心包周的脂肪组织及肝肾脏器，随后切开肩背部皮肤取出大鼠肩胛间的棕色脂肪。分别称重 ·$/&· 中国行为医学科学 %$$- 年 # 月第 ’& 卷第 # 期W X9>? Y 2: Z59@7>26@B M5< N;>，Y=BE %$$-，S2B ’&，[2* # 后，取小块附睾脂肪组织行福尔马林固定，固定时用药棉将脂肪组织压入固定液中以确保固定良好。常规包埋、切片后 !"染色，显微镜观察。五、观察方法计量分析用 #$%&’()& 图像分析仪进行分析，对白色脂肪细胞的切面面积、平均直径、圆度以及脂肪细胞的体积进行了测量。每张切片 *++ 倍下测量 ,+ - )+ 个脂肪细胞。体积计算公式：. /0!12 3 2。六、统计分析所得数据经 ’4’’5+6 + 统计软件处理结果一、针刺对肥胖大鼠体质量及 788’9指数的影响肥胖大鼠的体质量和 :88’9指数均显著高于正常组；治疗后，针刺组体质量、:88’9 指数下降，与模型组比差异有非常显著性（ ! ; +6 +5）。见表 5。表 5 实验各组体质量、:88’9指数的比较（ " # $）分组鼠数体质量（<） :88’9指数正常组 = 2)(6 ) > 2)6 ++ 2+06 +* > =6 ,? 模型组 = ,5*6 *0 > 526 ,=!! 25?6 ,0 > 526 =*!! 针刺组 = 00*6 5+ > 2+6 2*""$$ 2+,6 2* > 556 +2"" 注：模型组与正常组比!!! ; +6 +5；针刺组与模型组比""! ; +6 +5，针刺组与正常组比$$! ; +6 +, 二、针刺对大鼠不同部位脂肪组织及肝肾重量的影响肥胖组附睾周围、肾周、心包周围脂肪组织量、肝肾重量较正常组明显增加；针刺组大鼠附睾周围、肾周、心包周围脂肪组织量、肝都有不同程度的下降，与模型组比差异均具有显著和非常显著性（ ! ; +6 +, ，! ; +6 +5），见表 *。表 * 实验各组不同部位脂肪量及肝肾重量的比较（<，" # $）分组鼠数附睾周肾周心包周正常组 = 26 5* > +6 0, 06 ?2 > +6 (= +6 ,5 > +6 5, 模型组 = ,6 50 > 56 ,?!! )6 5* > *6 )=!! 56 +0 > +6 5)!! 针刺组 = 26 ,? > +6 ,+" ,6 )0 > *6 0?"" +6 ?* > +6 +," 分组鼠数肝肾正常组 = (6 52 > +6 ,5 +6 (+ > +6 55 模型组 = 526 *5 > 56 *2!!! 56 5+ > +6 5,! 针刺组 = 5+6 )= > 56 +,"" 56 +0 > +6 5* 注：模型组与正常组比!! ; +6 +,，!!! ; +6 +5；针刺组与模型组比"! ; +6 +,，""! ; +6 +5 三、针刺对附睾脂肪细胞直径、面积、体积的影响模型组脂肪细胞的平均直径、面积、体积都较正常组大，与正常组比均有非常显著性差异；针刺组与模型组比较脂肪细胞直径、面积、体积都缩小，二者比较有非常显著性差异。针刺组与正常组比较脂肪细胞直径、面积、体积差异不显著，见表 2。表 2 各组大鼠附睾脂肪细胞直径、面积、体积的比较（ " # $）分组 % 直径（#@）面积（#@*）体积（#@2）正常组（=） *5= ?+6 (, > 5?6 ?? 2,*06 0= > 5?026 ( 56 ?) > 56 *( 模型组（=） **= (+6 0? > 5(6 =*!! ,?*,6 *( > *=556 *? 26 ,= > *6 ,+!! 针刺组（=） *?) ?+6 2= > 5=6 0="" 20(*6 5+ > 5??*6 ?0"" 56 ?+ > 56 *,"" 注：原始数据中直径、面积、体积属于非正态分布，运用秩和检验的 $ABBCDEFGB8H I法检验。模型组与正常组比较!!! ; +6 ++5；针刺组与模型组比较""! ; +6 ++5 四、针刺对大鼠棕色脂肪细胞形态的影响切片观察：肥胖大鼠棕色脂肪细胞血管周围有许多白色脂肪细胞分布；正常组棕色脂肪细胞，血管周围未见到明显白色脂肪细胞；而针刺组棕色脂肪细胞，血管周围见白色脂肪细胞较模型组减少，细胞形状变小。显示针刺具有促进棕色脂肪细胞血管周围白色脂肪细胞代谢的作用。讨论中医认为脾胃是肥胖病发生发展的主要病位，气虚痰湿瘀热是其重要的病理基础。足三里为足阳明胃经的合穴，内庭为胃经的荥穴，脾胃互为表里，因而从病位上讲，三里、内庭穴主治脾胃经功能的失调，《素问"水热穴论》有“气街、三里、巨虚上下廉，此八者以泻胃中之热也”。内庭为胃经荥穴，“荥主身热”，泻之可清本经腑热。同时足三理又有健脾补虚化湿的作用。针刺后动物摄食量减少，体质量、体脂下降，与模型组比有显著性差异，说明针刺对肥胖大鼠亢盛食欲的失衡状态，有明显的抑制调节作用，这种调节对针刺减肥起到了直接的作用。资料显示［0］：脂肪细胞体积的增大，是肥胖病的重要组织学特征。模型组大鼠白色脂肪细胞直径、面积、体积均比正常组增大，差异非常显著，提示模型组大鼠具有白色脂肪细胞体积增大，储存脂滴的容量明显增加的特征，这与人类肥胖症的组织学改变相符合。针刺治疗后，治疗组大鼠的白色脂肪细胞与模型组相比，其切面面积、平均直径和体积的数值均明显变小，且有非常显著差异，说明在针刺作用下，整体的脂肪代谢经调整后，作为储存脂肪的仓库C白色脂肪组织结构出现了相应的改变。针刺对白色脂肪细胞的影响是其减肥的重要形态学基础。而这种影响又与针刺对肥胖大鼠神经肽 J与瘦素的良性调节作用密切相关［,］。棕色脂肪的主要功能是产热。肥胖大鼠棕色脂肪组织中有白色脂肪细胞区域存在，显示在肥胖的情况下，棕色脂肪细胞可以转化为白色脂肪细胞，以缓解白色脂肪细胞储存脂肪容量的不足。而且，该区域的形成和肝细胞的脂肪变一样也是从血管周围开始的，最终在血管周围形成一片白色脂肪细胞区域，其机理是否和肝细胞脂肪变性的机理有相似之处，有待以后进一步的研究。针刺组棕色脂肪组织中，白色脂肪区域基本不存在，仅见个别血管周围有少许的白色脂肪细 ·5),·中国行为医学科学 *++= 年 ? 月第 5, 卷第 ? 期K #EFB L MN O8EAPFMQA7 $8R ’SF，LT7H *++=，.M7 5,，UM6 ? 胞，说明在针刺作用下白色脂肪细胞又转化成棕色脂肪细胞了。关于棕色脂肪和白色脂肪的转化，早在 !" 年代就有学者［#，!］从组织培养和从各发育时期组织演变的研究中证实，棕色脂肪可以转化为白色脂肪，$%&’ 将新生兔放在冷环境中，棕色脂肪逐渐消失，而白色脂肪没有变化，在棕色脂肪存在下，白色脂肪可以向棕色脂肪转化。推测两种脂肪组织依赖一定条件能够互相转化。针刺作为对机体的调节，促进了白色脂肪的代谢及向棕色脂肪转化。参考文献 ( 刘志诚，孙凤岷，韩燕，等)针刺治疗单纯性肥胖病的实验研究)针刺研究，(**+，,-：#*.!/) , 华兴帮，李辞蓉，周浩良，等)大鼠穴位图谱研制)实验动物与动物实验，(**(，(：(./) - 0&’121’345 66，7188&’59: $0) ;9’’&<1849: =&8>&&: 6&& ?:3&@ 1:3 A1’& 15 B18 A9:8&:8 4: >&1:<4:C 1:3 13D<8 B&21<& ’18 >48E E%F98E1<124A <&549:5) G H:39A’4:9<，(*#+，I"：/,!./,+) I 邹大进)实用临床肥胖病学)北京：中国医药科技出版社，(***J /!./*) / 孙志，张中成，马丽，等)针刺对肥胖大鼠食欲调节因子神经肽 K 与瘦素的作用研究)中国行为医学科学，,""/，(,：("/!.("/*) # $%&’ LM) NE& C’9>8E 4: O48’9 9B :&>=9’: ’18 =’9>: 1:3 >E48& 134F95& 8455D&) G P:18，(*!+，(,/：/(*./,*) ! L1E2 7) $&O&<9F2&:8 9B =’9>: 1:3 >E48& 134F95& 8455D& ) G 64F43 Q&5， (*!/，(#：!*.*() （收稿日期：,""# R "- R -(）（本文编辑：冯学泉） ·卫生预防· 高等职业技术学院新生心理健康状况研究李严冰宋彩玲刘君玉作者单位：,//"(/ 淄博，淄博科技职业学院国内对普通高校大学生心理健康问题日益重视，研究较多。但对高等职业技术学院学生的心理健康问题的研究报告较少，特别是由中专、职业高中考入对口高职的学生。本研究采用症状自评量表，对入校新生进行调查分析，旨在探讨高职生心理健康状况和发展规律，为高职院校实施心理健康教育提供参考依据。对象与方法一、对象 ,""/ 年 (" 月 (( 日，对本院 ,""/ 级普通高考录取和对口高职录取的 ("I* 名新生进行问卷调查，他们来源于全国十四个省、市、自治区；其中男生 ((I 名，女生 *-/ 名，年龄 (! S ,( 岁；普通高职生平均年龄（(+) */ T ") *(）岁，对口高职生平均年龄（(+) ## T () (*）岁。二、方法以症状自评量表（U;6.*"）［(］为测试工具，严重程度按 ( S / 级评分，受试者自填，光标阅读机采集数据，由学院大学生心理健康中心负责。将合格资料用 U7UU(") " 进行统计学处理，结果以 ! " #表示，进行 $检验。结果一、, 组学生 U;6.*" 评分与常模对比情况（表 (）表 ( , 组学生与常模 U;6.*" 评分比较（分，! " #）组别例数躯体化强迫症状人际敏感抑郁焦虑普通高职生 II+ () ,* T ") -!!! () *( T ") #(!! () !I T ") /+ () #" T ") /+ () I# T ") I! 对口高职生 #"" () ,* T ") --!! () ++ T ") /+!! () !# T ") /# () /I T ") I* () I# T ") II! 全国青年常模 !+( () -I T ") I/ () #* T ") #( () !# T ") #! () /! T ") #( () I, T ") I- 组别例数敌对恐怖偏执精神病体普通高职生 II+ () I* T ") I* () II T ") I+!! () /( T ") /" () I+ T ") II!! 对口高职生 #"" () I/ T ") I!!!() /, T ") /,!! () /( T ") I+ () I- T ") -*!! 全国青年常模 !+( () /" T ") /! () -- T ") I! () /, T ") #" () -# T ") I! 注：与常模比较!% V ") "/，!!% V ") "( 与全国青年常模［,］比较，对口高职生在躯体化、强迫症状、焦虑、敌对；恐怖、精神病性的六个因子差异存在显著性；普通高职生在躯体化、强迫症状、恐怖、精神病性的 I 个因子差异存在显著性（ % V ") "( 或 % V ") "/）。讨论本调查结果表明，与普通高职生相比，对口高职生在恐怖和精神病性因子方面差异有显著性，主要原因是：对口高职生没有经过高中阶段的刻苦学习锻炼，在学习态度、主动性和自律性方面与普通高职生存在差距；他们年龄偏小、文化基础薄弱，又缺乏社会经验，且独立生存能力、判断能力、抗挫折能力和自控能力等都较差，故在恐怖和精神病性方面呈现出一定程度上的差异［-］。与全国青年常模相比，院两类高职生在许多心理健康因子方面呈现出不同程度的显著性差异，原因可能与如下因素有关：首先，学生对高等职业教育的发展形势与意义认识不清、不深刻，对何为成才等问题存在错误认识。通过访谈了解到，许多学生谈到上高职并不是自己当初的愿望，进入职业大学主要是因为普通高考的成绩不理想，心中存在对自己未来前途的担忧。其次，由于种种原因造成的文化基础知识不高、中学阶段学习成绩不理想，使其在日常生活、学习中缺乏足够的成功体验和愉悦的感受，导致了许多不良的后果。如做事缺乏自信心和执著的意志品质，由于缺乏社会经验而富于不切实际的幻想。再次，年龄偏小，许多学生对自己缺乏足够的控制与评价能力，自我意识觉醒度不高，做事莽撞、看问题偏执。参考文献 ( 张作记 J 行为医学量表手册 J 中国行为医学科学，,""(，特刊：#I. ##J , 金华，吴文源，张明园 J 中国正常人 U;6.*" 评定结果的初步分析 J 中国神经精神疾病杂志，(*+#，(,：,#(J - 田澜，黄开福 J ,-* 名高一学生心理素质问卷调查 J 中国行为医学科学，,""/，(I：("#.("!J （收稿日期：,""# R "- R ,-）（本文编辑：戚厚兴） ·,+/· 中国行为医学科学 ,""# 年 ! 月第 (/ 卷第 ! 期W ;E4: G 9B 0&E1O49’1< M&3 UA4，GD<% ,""#，X9< (/，Y9) !

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