常用缓冲液的配制
方法
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1.甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05M)
X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M盐酸 再加水稀释至 200ml
pH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml
2.2 50 44.0 3.0 50 11.4
2.4 50 32.4 3.2 50 8.2
2.6 50 24.2 3.4 50 6.4
2.8 50 16.8 3.6 50 5.0
甘氨酸分子量=75.07 0.2M甘氨酸溶液含 15.01g/L
2.邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(0.05M)
X ml 0.2M邻苯二甲酸氢钾 +Y ml 0.2M盐酸 再加水稀释至 200ml
pH X Y pH X Y
2.2 5 4.670 3.2 5 1.470
2.4 5 3.960 3.4 5 0.990
2.6 5 3.295 3.6 5 0.597
2.8 5 2.642 3.8 5 0.263
3.0 5 2.032
邻苯二甲酸氢钾分子量=2.4.23 0.2M邻苯二甲酸氢钾溶液含 40.85g/L
3.磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液
pH
0.2M
Na2HPO4/ml
0.1M
柠檬酸/ml pH
0.2M
Na2HPO4/ml
0.1M
柠檬酸/ml
2.2 0.40 19.6 5.2 10.72 9.28
2.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.85
2.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.40
2.8 3.17 16.83 5.8 12.09 7.91
3.0 4.11 15.89 6.0 12.63 7.37
3.2 4.94 15.06 6.2 13.22 6.78
3.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.15
3.6 6.44 13.56 6.6 14.55 5.45
3.8 7.10 12.90 6.8 15.45 4.55
4.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.53
4.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.61
4.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.83
4.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.27
4.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.85
5.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55
Na2HPO4分子量=141.98 0.2M溶液含 28.40g/L
Na2HPO4·2H2O分子量=178.05 0.2M溶液含 35.61g/L
C6H8O7·H2O分子量=210.14 0.1M溶液含 21.01g/L
4.柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液
pH
钠离子浓度
/M
柠檬酸
C6H8O7·H2O/g
氢氧化钠
NaOH/g
浓盐酸
HCl/ml
终体积/L
2.2 0.20 210 84 160 10
3.1 0.20 210 83 116 10
3.3 0.20 210 83 106 10
4.3 0.20 210 83 45 10
5.3 0.35 245 144 68 10
5.8 0.45 285 186 105 10
6.5 0.38 266 156 126 10
使用时可以每升中加入 1g酚,若最后 pH有变化,再用少量 50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。
柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1M)
pH
0.1M柠檬酸
/ml
0.1M柠檬酸
钠/ml pH
0.1M柠檬酸
/ml
0.1M柠檬酸
钠/ml
3.0 18.6 1.4 5.0 8.2 11.8
3.2 17.2 2.8 5.2 7.3 12.7
3.4 16.0 4.0 5.4 6.4 13.6
3.6 14.9 5.1 5.6 5.5 14.5
3.8 14.0 6.0 5.8 4.7 15.3
4.0 13.1 6.9 6.0 3.8 16.2
4.2 12.3 7.7 6.2 2.8 17.2
4.4 11.4 8.6 6.4 2.0 18.0
4.6 10.3 9.7 6.6 104 18.6
4.8 9.2 10.8
C6H8O7·H2O分子量=210.14 0.1M溶液含 21.01g/L
Na3C6H5O7·2H2O分子量=294.12 0.1M溶液含 29.41g/L
6.乙酸-乙酸钠缓冲液(0.2M)
pH
0.2M
NaAc/ml
0.2M
HAC/ml
pH
0.2M
NaAc/ml
0.2M
HAC/ml
3.6 0.75 9.25 4.8 5.90 4.10
3.8 1.20 8.80 5.0 7.00 3.00
4.0 1.80 8.20 5.2 7.90 2.10
4.2 2.65 7.35 5.4 8.60 1.40
4.4 3.70 6.30 5.6 9.10 0.90
4.6 4.90 5.10 5.8 9.40 0.60
NaAc分子量=136.09 0.2M溶液为 27.22g/L
7.磷酸盐缓冲液
(1)磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2M)
pH
0.2M
Na2HPO4/ml
0.2M
NaH2PO4/ml
pH
0.2M
Na2HPO4/ml
0.2M
NaH2PO4/ml
5.8 8.0 92.0 7.0 61.0 39.0
5.9 10.0 90.0 7.1 67.0 33.0
6.0 12.3 87.7 7.2 72.0 28.0
6.1 15.0 85.0 7.3 77.0 23.0
6.2 18.5 81.5 7.4 81.0 19.0
6.3 22.5 77.5 7.5 84.0 16.0
6.4 26.5 73.5 7.6 87.0 13.0
6.5 31.5 68.5 7.7 89.5 10.5
6.6 37.5 62.5 7.8 91.5 8.5
6.7 43.5 56.5 7.9 93.0 7.0
6.8 49.5 51.0 8.0 94.7 5.3
6.9 55.0 45.0
Na2HPO4·2H2O分子量=178.05 0.2M溶液含 35.61g/L
Na2HPO4·12H2O分子量=358.22 0.2M溶液含 71.64g/L
NaH2PO4·H2O分子量=138.01 0.2M溶液含 27.6g/L
NaH2PO4·2H2O分子量=156.03 0.2M溶液含 31.21g/L
(2) 磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液(1/15M)
pH
1/15M
Na2HPO4/ml
1/15M
KH2PO4/ml
pH
1/15M
Na2HPO4/ml
1/15M
KH2PO4/ml
4.92 0.10 9.90 7.17 7.00 3.00
5.29 0.50 9.50 7.38 8.00 2.00
5.91 1.00 9.00 7.73 9.00 1.00
6.24 2.00 8.00 8.04 9.50 0.50
6.47 3.00 7.00 8.34 9.75 0.25
6.64 4.00 6.00 8.67 9.90 0.10
6.81 5.00 5.00 9.18 10.00 0
6.98 6.00 4.00
Na2HPO4·2H2O分子量=178.05 1/15M溶液含 35.61g/L
KH2PO4分子量=136.09 1/15M溶液含 9.078g/L
8.磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(0.05M)
X ml 0.2M KH2PO4 +Y ml 0.2M NaOH 再加水稀释至 20ml
pH(20℃) X/ml Y/ml pH(20℃) X/ml Y/ml
5.8 5 0.372 7.0 5 2.963
6.0 5 0.570 7.2 5 3.500
6.2 5 0.860 7.4 5 3.950
6.4 5 1.260 7.6 5 4.280
6.6 5 1.780 7.8 5 4.520
6.8 5 2.365 8.0 5 4.680
9.巴比妥钠-盐酸缓冲液(18℃)
pH
0.04M巴比
妥钠/ml 0.2M盐酸/ml pH
0.04M巴比
妥钠/ml 0.2M盐酸/ml
6.8 100 18.4 8.4 100 5.21
7.0 100 17.8 8.6 100 3.82
7.2 100 16.7 8.8 100 2.52
7.4 100 15.3 9.0 100 1.65
7.6 100 13.4 9.2 100 1.13
7.8 100 11.47 9.4 100 0.70
8.0 100 9.39 9.6 100 0.35
8.2 100 7.21 100
巴比妥钠分子量=206.18 0.04M溶液为 8.25g/L
10.Tris-盐酸缓冲液
50ml 0.1M三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液于 X ml 0.1M盐酸混匀后,加水稀释至 100ml
pH X/ml pH X/ml
7.1 45.7 8.1 26.2
7.2 44.7 8.2 22.9
7.3 43.4 8.3 19.9
7.4 42.0 8.4 17.2
7.5 40.3 8.5 14.7
7.6 38.5 8.6 12.4
7.7 36.6 8.7 10.3
7.8 34.5 8.8 8.5
7.9 32.0 8.9 7.0
8.0 29.2
三羟甲基氨基甲烷(Tris)分子量=121.14 0.1M溶液为 12.114g/L
Tris溶液可以从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将瓶盖严
11.硼酸-硼砂缓冲液(0.2M硼酸根)
pH
0.05M硼砂
/ml
0.2M硼酸/ml pH 0.05M硼砂
/ml
0.2M硼酸/ml
7.4 1.0 9.0 8.2 3.5 6.5
7.6 1.5 8.5 8.4 4.5 5.5
7.8 2.0 8.0 8.7 6.0 4.0
8.0 3.0 7.0 9.0 8.0 2.0
硼砂Na2BB4O7·10H2O分子量=381.43 0.05M(=0.2M硼酸根)溶液为 19.07g/L
硼酸H3BO3分子量=61.84 0.2M溶液为 12.37g/L
硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存
12.甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(0.05M)
X ml 0.2M甘氨酸 +Y ml 0.2M氢氧化钠 再加水稀释至 200ml
pH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml
8.6 50 4.0 9.6 50 22.4
8.8 50 6.0 9.8 50 27.2
9.0 50 8.8 10.0 50 32.0
9.2 50 12.0 10.4 50 38.6
9.4 50 16.8 10.6 50 45.5
甘氨酸分子量=75.07 0.2M甘氨酸溶液含 15.01g/L
13.硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05M硼酸根)
X ml 0.05M硼砂 +Y ml 0.2M氢氧化钠 再加水稀释至 200ml
pH X/ml Y/ml pH X/ml Y/ml
9.3 50 6.0 9.8 50 34.0
9.4 50 11.0 10.0 50 43.0
9.6 50 23.0 10.1 50 46.0
硼砂Na2BB4O7·10H2O分子量=381.43 0.05M(=0.2M硼酸根)溶液为 19.07g/L
14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1M)
Ca ,Mg 存在时不得使用 2+ 2+
pH
20℃ 37℃
0.1M碳酸钠
/ml
0.1M碳酸氢
钠/ml
9.16 8.77 1 9
9.40 9.12 2 8
9.51 9.40 3 7
9.78 9.50 4 6
9.90 9.72 5 5
10.14 9.90 6 4
10.28 10.08 7 3
10.53 1028 8 2
10.83 1057 9 1
Na2CO3·10H2O分子量=286.2 0.1M溶液为 28.62g/L
NaHCO3分子量=84.0 0.1M溶液为 8.40g/L