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RP.HPLC直接测定水果中维生素C含量.PDF

RP.HPLC直接测定水果中维生素C含量

小晶子
2011-04-17 0人阅读 举报 0 0 0 暂无简介

简介:本文档为《RP.HPLC直接测定水果中维生素C含量pdf》,可适用于人文社科领域

第卷第期年月.()科学技术与工程ScienceTechnologyandEngineeringVoLNo.Sep.Sci,TedLEngng.医药卫生RP.HPLC直接测定水果中维生素C含量刘贵花潘富友’(台州学院医药化工学院临海)摘要应用反相高效液相色谱法对时令水果中维生素C含量进行直接测定。方法:色谱柱EclipseXDBC。。(p,m.×mm)流动相乙腈水(:v/v)流速.nd,/min检测波长nm。实验结果表明维生素c在()t山g,/mL范围内呈良好线性群=.回收率为.%一.%RSD=.%。本法操作简便结果准确、重现性好为测定水果中维生素C的含量提供了一种有效方法。关键词水果维生素C(Vc)反相高效液相色谱(RPHPLC)中图法分类号R.文献标志码A维生素C又称抗坏血酸(AH))。医学研究发现它不但具有生理活性而且在人体内能阻止亚硝胺的形成具有一定的防癌作用⋯。但人体自身不能合成维生素C必须由食物中摄取所以分析测定水果和蔬菜中维生素C含量将对鉴别水果和蔬菜的营养价值具有重要意义。目前水果和蔬菜中维生素c测定的方法除了药典规定的碘量法悼J还有比色法【J、紫外分光光度法【J、荧光法”等但这些方法所需试剂多且操作繁琐测定结果准确性也存在一定问题。近年来发展了用高效液相色谱法测定维生素C含量的方法具有高效、快速、稳定、可靠等特点但文献报道的所用流动相体系均较复杂一般都采用了缓冲盐或者低浓度酸【.卜加J。本文应用反相高效液相色谱法采用乙腈一水(:v/v)作流动相直接测定了时令常见水果中的维生素C含量取得了理想的效果。实验部分.主要仪器与试剂AtCent液相色谱仪配有VWD检测器UV紫外分光光度计MilliQ纯水超纯水系统HS一年月日收到浙江省自然科学基金(M)资助第作者简介:刘贵花(豁一)女硕士研究生。研究方向:色谱。’通信作者简介:潘富友教授硕导E·mail:paafytzC.edu.cn。D超萨涮嘶黜AP燃FAA电子天平。甲醇、乙腈(色谱纯)TEDIA公司抗坏血酸(分析纯)无锡展望化工试剂有限公司磷酸(分析纯)无锡飞达化工厂超纯水(由MilliQ纯水超纯水系统制备)。.色谱分离条件色谱柱:EclipseXDBC(tun.×mm)流动相:乙腈一水(:v/v)流速:.OmL/min波长:nm进样量:灿:。.溶液配制..标准贮备液的配制精密称取抗坏血酸.g置mL容量瓶中加O.%磷酸溶液溶解并稀释至刻度摇匀。得p,g/mL的标准贮备液。..标准溶液的配制分别精密量取mL、mL、mL、mL、mL、mL、mL的标准贮备液至mL量瓶中用O.%磷酸溶液稀释至刻度得lOla,g/mL、P,g/mL、tag/mLp,g/mLp,g/mL、lag/mL、P,g/mL的系列标准溶液。..供试品溶液的配制(样品前处理)将买来的新鲜水果洗净晾干后分别置于匀浆机中匀浆用布氏漏斗过滤再精确称取g滤液至mL容量瓶中用.%磷酸稀释至刻度进样万方数据科学技术与工程卷前用.Ion针头式过滤器过滤。.测定方法和结果计算根据色谱分离条件将仪器调节到进样分析状态用平头针头精确量取斗L进样分析保存色谱图记录峰面积并根据质量浓度一峰面积作标准曲线用外标法进行计算。结果与讨论.溶剂的选择维生素C具有较强还原性且易受空气、热、光、碱性物质、金属离子等因素影响但在酸性溶液中稳定f】¨为防止分析过程中维生素C的破坏实验采用.%磷酸溶液作溶剂配制各种溶液。.检测波长的确定取抗坏血酸适量加.%磷酸溶液配成约鹇/mL的溶液用.%磷酸溶液作参比溶液在nm波长扫描结果发现在nm波长处有最大吸收。故本文以nnl为检测波长。.流动相和流速的确定取抗坏血酸适量用.%磷酸溶液配成约lag/mL的溶液实验过程中尝试了甲醇、甲醇水乙腈、乙腈一水等不同体系及配比的流动相并对流速从(.一.)mL/min之间进行反复实验结果表明当流动相为乙腈一水(:v/v)流速为.mL/min时不但能得到了良好的峰形、适当的保留时间和较高的理论塔板数同时能对果汁中其它物质得到较好的分离而且避免了流动相体系中加入缓冲盐和低浓度的酸既保护了色谱柱又使得实验操作更简便维生素C的定性分析图见图。.标准曲线和线性范围精确吸取上述不同质量浓度的系列标准溶液灿按色谱分离条件进样分析保存色谱图记录峰面积。并以质量浓度x(峭/mL)为横坐标峰面积y(mAU·)为纵坐标作图得标准工作曲线的回归方程为Y=..X相关系数萨为.。结果表明:维生素C在()彬mL之间呈现良好的线性关系见图。图l维生素c的定性分析谱图Ol(m质量浓/lUng·m。图维生素c的标准曲线.样品测定..样品定性分析精密吸取各供试品溶液灿按色谱分离条件进样分析保存色谱图记录峰面积并根据在同一实验条件下纯物质保留时间定性得出各水果样品中维生素c的相对应的归属峰。猕猴桃的色谱分离图见图。..样品定量测定精密吸取各供试品溶液止按色谱分离条件进样分析保存色谱图并记录色谱图中的维生素c对应的峰面积然后根据外标法对各时令水果中的维生素C含量进行定量计算各时令水果的维生ll∞.jvln聪恒鹫万方数据期刘贵花等:liPHPLC直接测定水果中维生素c含量图猕猴桃中维生素C的分析谱图素C分析结果见表。表不同水果中维生素C的含量测定.精密度实验取草莓供试品溶液按上述的色谱条件连续进样次保存色谱图并记录色谱图中的维生素c对应的峰面积。结果峰面积相对标准偏差RSD为.%表明本法精密度较高重现性较好。实验结果见表。.稳定性实验准确称取.mg的抗坏血酸分别置于两洁净的mL烧杯中其中一份用超纯水溶解稀释定容至mL容量瓶中另一份用.%磷酸溶解、稀释定容至mL容量瓶中。每隔小时对两溶液按色谱分离条件进样分析保存色谱图并记录色谱图中的维生素c的峰面积然后计算并比较两溶液中维生素C含量的变化情况。结果表明:用.%磷酸溶解的维生素C在h内较稳定而用超纯水溶解的溶液稳定性则相对较差因此更进一步说明了维生素C在酸性条件下相对比较稳定但随着时间的推移维生素C含量也将逐渐减少这同时表明新鲜水果要尽快食用以免营养成分流失。实验结果见表。表方法精密度实验结果溶剂为纯水aso(%)时问的vc量(mg)溶剂为.%RSD(%)磷酸的Vc量(rag).回收率实验回收率实验选在圣女果中进行。分别精确移取圣女果的供试品溶液mL于个mL洁净容量瓶中再分别直接准确加入、、、、mL质量浓度为la,g/mL的维生素C标准溶液然后用.%磷酸稀释到刻度按色谱分离条件测定保存色谱图并记录色谱图中的维生素C对应的峰面积然后根据外标法定量计算同时计算回收率实验结果见表。表维生素C的回收率实验结果万方数据科学技术与工程卷结论本文利用反相液相色谱法直接测定了水果中维生素C含量其操作简单分离时间短分离效果较好测定结果准确度和重现性也较好且不受样品中其它组分的干扰特别是流动相体系中不需用到缓冲盐和低浓度的酸既能保护色谱柱又能使实验操作更简便。该法同样可以适用用于其他水果或果汁饮料等食品中的维生素C含量的快速测定。参考文献彭家泽刁洁.抗坏血酸的生理功能及其在食品中的应用.食品与机械():中国人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国药典二部.北京:化学工业出版社.:杨字民沈毅.催化分光光度法测定生物样品中维生索c.中国卫生检验杂志。∞():冰冰周晓光朱泮民.紫外光度法测定药品中抗坏血酸的研究.光谱实验室():一曾美云邱海鸥郑洪涛等.动力学荧光法测定抗坏血酸.分析试验室():何琳琳.抗坏血酸测定方法及存在的问题探讨.西南科技大学学报():胡应杰。潘康标陈昌云等.高效液相色谱法测定辣椒中维生索c的含量.南京晓庄学院学报():陈再洁郑建明王智.高效液相色谱法测定维生素c片中VC含量.分析仪器():王艳颖姜国斌胡文忠等.高效液相色谱法测定草莓中维生素C含量.大连大学学报():lO蒋哗。刘红菊。郝晓花.反相高效液相色谱法同时测定种水溶性维生索.药物分析杂志():李玉明白洁.高效液相色谱法分析西红柿中的维生素c含量.衡阳师范学院学报():DeterminationonVitaminCinFruitsbyRPHPLCLIUGuihuaPANFuyou’(TaizhouUniversitySchoolfPharmaceuticalandChemicalEngine丽ngLinlmi。P.R.China)AbstractThevitaminCinfTuitsoftheseason唧testeddirectlybyreversedphasehigllperformanceIiquidchromatography.ThemethodsWagthattheEclipseXDBCColumn(pLm.×mm)WagusedandthemobilephaseWagamixtureofacetonitrileandwater(:v/v)andTheflowrateWag.mL/minandthedetectionwavelengthWagnm.TheexperimentresultsshowedthatthebetterlinearrelationWagachievedwhentheconcentrationofvitaminCWagpe/mLtherelatedcoefleientwag.andtherangofrecoverywasfrom.%to.%andtherelativestandarddeviationWag.%.ThemothodiseasytooperatewithpreciseresultandgoodreproducibilitywhichestablishesareliablemethodfordeterminationofvitaminCinfruits.Keywordsfruitsvitaminc(Vc)reversedphasehishperformanceliquidchromatography(RP·HPLC)万方数据RPHPLC直接测定水果中维生素C含量作者:刘贵花潘富友LIUGuihuaPANFuyou作者单位:台州学院医药化工学院,临海,刊名:科学技术与工程英文刊名:SCIENCETECHNOLOGYANDENGINEERING年卷(期):,()参考文献(条)彭家泽刁洁抗坏血酸的生理功能及其在食品中的应用()中国人民共和国卫生部药典委员会中华人民共和国药典二部杨宇民沈毅催化分光光度法测定生物样品中维生素C()冰冰周晓光朱泮民紫外光度法测定药品中抗坏血酸的研究()曾美云邱海鸥郑洪涛动力学荧光法测定抗坏血酸()何琳琳抗坏血酸测定方法及存在的问题探讨()胡应杰潘康标陈昌云高效液相色谱法测定辣椒中维生素C的含量()陈再洁郑建明王智高效液相色谱法测定维生素C片中VC含量()王艳颖姜国斌胡文忠高效液相色谱法测定草莓中维生素C含量()蒋晔刘红菊郝晓花反相高效液相色谱法同时测定种水溶性维生素()李玉明白洁高效液相色谱法分析西红柿中的维生素C含量()本文链接:http:dgwanfangdatacomcnPeriodicalkxjsygcaspx

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