苹果汁芳香成分GC指纹图谱的建立

·174· “2005中国国酥饮料科技报告会”论文集 苹果汁芳香成分GC指纹图谱的建立 。吴继红‘ 张美莉2 廖小军1 踩芳‘ 赵镭1 胡小松’ 1中国农业大学 食品科学与营养工程学院 北京 100083 2内蒙吉农业大学 食品学院 内蒙吉呼和浩特010018 摘要：应用嗣相微萃取(SolidPhaseMicroExtraction—SPME)／气丰H色谱(GasChromatogram—GC)技术，建立苹果汁芳粹 成分措纹悉谱；采j{{色谱惩瓣臻霹缣整醚闼、攘对蜂瑟积域蜂搿及色谱揍绞图游褪缀度孛襁关系数、炙惫余弦麓诗 算，对苹果芳香组分指纹图谱进行评价，确定不同品种苹粜中特征芳香成分。将此 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 臆朋于我国主要制汁苹果 品种芳香成分指纹图谱的比较和评价得出：相似度参数中相关系数0．982—0．998之间，夹角余弦在0．99—0．997之 闼，实验方法黪糖糍发秘零复性溅定其RSD簸分剐为0．02％一0。87％帮0．02％一0。泓％，说骧掰建移豹GC／MS撩 纹图谱能够准确地 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 达出不同苹果品种的共钶峰。指纹网谱的建、z可用于苹果汁质基控制及苹果汁掺伪签定方 浚的研究。 关键镧：苹巢汁；芳香物瑷；掺纹图游；SPMEIC,C 果蔬中的芳香物质魑水果、蔬菜在成熟过程中 形成的各种气睬宜人酶挥发性香辣成分，如：酯、醛、 酮、醋酸酯、醇、挥发性酸类等。它们以一定比例存 在，构成了各种果蔬，甚至某个品种特有的典型香味 和滋睬。尽管果蔬中芳香物质含量很低，却是区分 各种果蔬汁最重要憋一个特征参数，是判断果蔬汁 饮料质量的一个决定性因素。一种香味(如苹果香、 菠萝香味等)是由几十种或上百种具有一定挥发性 的香椿物璜所组成。这些香眯物质共同作蔫形成某 种香味，而其中某种香味物质往往不能单独表现出 整个香味，它们是协同作用的结果。 一般果蔬芳香物质含量在1一lOmg／1009之间， 有些还要低。多数求果孛典型香嗪的芳香戏分含量 在10一一lmg／1009之间，有的甚至低于10“ms／ 10090 苹果芳香成分受不同品种、不同产魏及气候、栽 培条件等多种因素的影响，其组成成分舱复杂性、独 特性、协同性与中药活性成分表现的特征具有很大 的相似性。不同苹果品种均其有它们自己芳香成分 的指纹特徭。我们可以借鉴串药攒纹图谱技术，建 立苹果中芳香成分的指纹图谱⋯[2】【引。采用色谱峰 的相对保留值、相对峰面积或峰高和相似度的计算 值对各样品的色谱指纹匿谱进行量纯簸理，实现谱 图的数据化，提高了样品阅的可比性及计算机操作 ·第一作者：副教授。 的可能性n]。苹果汁芳香成分指纹图谱基本反映了 该果汁的芳香成分的种类及其含量分带状况，具有 特征明显、专属性强、萋现性好的特点，且操作方便、 快速，可以用来作为鉴别苹果汁优劣真伪的依据，是 一种实现对果汁多组分多指标分析的理想方法¨1。 l实验仪器与材料 1．1 实验仪器 手动SPME进样器、100／1m聚二甲基礁氧烷 (PDMS)萃取头：美国Supelco公司制造；气相色谱一 度谱联灞仪：HP5973，美国Agilent公司制造； 气相色谱：SP一3400，麓艺京分柝仪器厂制造；棒 汁机：(上海灿坤电器)。 1．2实验材料 富士、翻竞(产施：辽宁省熊岳)；澳溯青苹、金姊 (产地：山东烟台)；秦冠(产地：甘袁)；薪红星(产地： 辽宁葫芦岛)。以上原料均为成熟度适宜、无瘸虫害 且具有该品种典型特征的采实，产品贮存于o℃冷库 中，实验翦取出在25℃环境下放置24h露进行芳香 成分的检测。 2实验方法 2．1色谱和质谱条件 气榴色谱条侔：毛细管柱：HP一5MS(30m×0． 1mm×0。33btm)；程序势湿：起始湿度蛔℃一2。5min 吴继红 张美莉廖小军等：苹果汁芳香成分GC指纹图谱的建立 ·175· 一5℃／rain一200℃一6min；检测器(FID)温度为 250℃，进样口温度230℃，载气为氮气。 2．2样品预处理 固相微萃取装置的萃取头在气相色谱的进样口 进行老化，老化温度250℃，载气体积流量1mL／min， 老化时间2h。 取3009苹果，去除果核后将苹果切分成适度大 小并榨汁；取8mL果汁置于15mL样品瓶中，同时加 入2．59氯化钠使饱；放入转子在50。C下恒1min后， 将固相微萃取器的萃取头通过聚四氟乙烯隔垫插入 到样品瓶中，推出纤维头，注意不要使萃取头碰到果 汁，打开磁力搅拌使转子在果汁中迅速转动；吸附 20min后缩回纤维头，从样品瓶中拔出萃取头直接插 入气相色谱仪并推出纤维头，于250℃解析5rain，同 时启动仪器采集数据。 2．3方法学考察 2．3．1精密度实验 取同一品种苹果汁为供试品溶液，连续进样10 次，检测指纹图谱，各色谱峰的相对保留时间基本一 致(见表l及图1)，RSD均在0．02％一0．87％，符合 指纹图谱的 要求 对教师党员的评价套管和固井爆破片与爆破装置仓库管理基本要求三甲医院都需要复审吗 。 2．3．2重复性实验 取原料同时制备5份苹果汁，分别进样测定其香 气成分，比较色谱峰保留时间，RSD为0．02％一 0．04％，表明建立的方法具有良好的重复性(见图2)。 图1精密度实验 图2重复性实验 表l苹果汁中主要芳香成分相对保留时间(n=10) · 176· “2005中国国际饮料科技报告会”论文集 3结果与分析 3．1 苹果汁特征峰的确定及指纹图谱的建立 3．1．1谱峰匹配 样品指纹图谱的谱峰匹配可根据样品的保留时 间(或相对保留时间)，结合样品指纹图谱的谱峰形状 特点进行b儿纠。另外，实验还利用色谱工作站中各批 样品色谱曲线的叠加功能来进行谱峰的匹配。谱峰 匹配完成后，为确保匹配结果的正确，利用Excel软件 的图表功能，绘出各批样品指纹图谱数据的点折线图 进行匹配结果的校验。图中校验结果可以直观、快速 地反映了谱峰匹配的合理性。通过峰处理，删去匹配 度低的峰。从图2可以看出各谱峰匹配正确、合理， 从互相重合的点折线图(图4)进一步说明谱峰匹配度 高且所选组分确实为苹果汁中主要芳香成分。 14 12 10 8 6 4 2 0 图3不同苹果品种芳香成分GC指纹图谱 3．1．2相似度计算及苹果汁GC指纹图谱的分析评价 通过相似度的计算及多批样品、不同苹果品种 色谱图的比较发现，各样品均有13种色谱峰且相互 间非常吻合(见图2和图3)，计算相似度的评价指标 相关系数在0．982—0．998之间，夹角余弦在0．990． 0．997之间。因此，确定这13个峰构成苹果芳香成 分指纹图谱。各组分的峰序号和相对保留时间(见 表2)。由于样品品种间的差异，特征峰的相对含量 分布差异很大。在所建立的色谱条件下，各特征峰 均达到了基线分离，因此该差异可通过各特征峰的 表观丰度(纵坐标刻度测量)进行表达。 18 —16 皇14 =12 暑10 匪8 辈6 盎4 *9 ‘厂 √ 厂1 - ／厂一 -一，／一 w"- 图4不同苹果品种各组分峰匹配度验证 表2谱峰相似度的计算(峰面积) lO ll 12 13 相关系数 夹角余弦 13913 0．997 O．9916 154 23l 22691 O．998 0．997 粼嘲一搠撕一～一～一～～～。。础狮心m脚m蚴哪姗川n珊一一一 泓盯撕记哪粥l謇蚴的以 姗鲫m姗姗鳓协他m蛇乱m岍，㈣2㈣o御兰|唧抛姗啷砒娜酣婀m∞懈4蝴7㈣。脚m啪粥蚴詈言蛳跏弼l褰嘲虬蚴5蝴5㈣o ㈣m的獬娜姗m仍m够∞勉一一一 ㈣铬鲫∞㈣惭螂啪加弼弱醯 l 2 3 4 5 6 7 8 9 吴继红 张美莉廖小军等：苹果汁芳香成分GC指纹图谱的建立 ·177· 4结论 试验结果显示，不同苹果品种指纹图谱中主要 峰群的整体图貌基本一致，但各成分含量的相对比 值有所不同。本文采用GC法建立的苹果汁指纹图 谱分析方法稳定、结果可靠、重现性好，为进一步研 究建立苹果汁掺伪快速鉴别方法提供了科学依据。 5讨论 在相似度分析中，以相关系数、夹角余弦测度的 相似度，都是特征变量上变化模式的相似性，在样品 鉴别真伪上提供样品间亲疏程度的相似性是有优 势。本实验研究结果进一步证实，从苹果汁整体色 谱图人手，选取特征峰，并大致判断其峰位和比例关 系，构成该苹果汁特有的色谱指纹图谱全貌，可以为 苹果汁质量的分析与控制提供可靠的依据，这比以 单一化学对照品作为鉴别 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 全面得多。指纹图谱 技术的应用可以扩展到苹果汁中其他理化指标指纹 图谱的建立上，该技术的应用对增加苹果汁质控科 技含量，提高果汁质量整体水平，消除国际贸易壁 垒，具有非常重要的现实意义。 参考文献 [1]FanConga，Yi—ZengLianga，Pei—ShahXieb，Foo—TimChauclnforma— tiontheoryappliedtochromatographicfingerprintofherbalmedicineforquality control[J】．J0umalofChmmatographyA，1002(2003)：25—40 [2]XinDia，KelvinK．C．Chanb，HeiWunLeun#，et．a1．Fingerprintprofiling ofacidhydrolyzatesofpolysaccharidesextractedfromthefruitingbodiesand sporesofLingzhibyhish—performancethin—layerchromatography．[J]Jour- nalofChromatographyA，1018(2003)：85—95 【3]王玺。王文字，张克荣等．中药HPLC指纹图谱相似性研究的探讨 [J]．沈阳药科大学学报，2003(9)：360—364 [4]陈泓，郭勇，王智猛等．指纹图谱用于白酒质量的控制[J]．化学研 究与应用，2004(6)：373—374 [5]魏刚，方永奇，刘东辉等．GC—MS建立石菖蒲挥发油特征指纹图 谱方法学研究[J]．中国中药杂志，2004(8)：764—751 ConstructionofGCFingerprintChromatogramofAromaCompositioninAppleJuice WuJihon91，ZhangMill2，LiaoXiaojunl，ChenFang1，ZhaoLei1，HuXiaoson91 1．CollageofFoodscienceandNutritionalofChinaAgriculturalUniversity，Beijing，100083，China 2．CollageofFoodScienceofInnerMongoliaAgriculturalUniversity，Huhehaote010018，Neimonggu，China Abstract：Thefingerprintchromatogramof目LrOmcomponentsinapplejuicewasestablishedinthispaper．Thecharacteristicaromacompositionsin differentapplecuhivarswerethendeterminedbysuchparametersasoverlappingrateandsimilarityoffingerprintchromatogramobtainedfrom SPME(SolidPhaseMicroExtraction)／GC(GasChromatography)．Resultindicated：TheRSDofexactitudeofexperimentis0．02％一0．87％．The BSDofrepeatexperimentis0．02％一0．04％．Thecorrelationcoefficientis0．982—0．998．Thecoefficientofinter—angtecosinesis0．990一0． 997．ThismethodWasprovedtobeaccuratetoreflectthecommonchromatographypeakofdifferentapplecultivars。indicatingthatitcanbeused forqualitycontrolandadulterationdetectofapplejuiceproduct． Keyword：applejuiee，aromacomponents，fingerprintchromatogram，SPME／GC 苹果汁芳香成分GC指纹图谱的建立 作者： 吴继红， 张美莉， 廖小军， 陈芳， 赵镭， 胡小松 作者单位： 吴继红,廖小军,陈芳,赵镭,胡小松(中国农业大学 食品科学与营养工程学院 北京 100083) ， 张美莉(内蒙古农业大学 食品学院 内蒙古呼和浩特 010018) 本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Conference_7040957.aspx