肿瘤免疫与免疫学检验

null肿瘤免疫学 及检验肿瘤免疫学 及检验 东区检验科 马 明第二十九章本章学习要点本章学习要点●掌握肿瘤特异性抗原、肿瘤相关抗原、分化抗原的概念和分类，常用肿瘤标志物免疫学检测。 ●熟悉常见肿瘤标志物应用原则。 ●了解机体的抗瘤免疫效应机制肿瘤的免疫逃避机制。null肿瘤免疫学（tumorImmunology）是研究肿瘤的抗原性、机体的免疫功能与肿瘤发生、发展的相互关系，机体对肿瘤的免疫应答及其抗肿瘤免疫的机制、肿瘤的免疫诊断和免疫防治的科学。 肿瘤是在各种致癌因素（化学物质、放射线照射和病毒感染等）作用下，组织细胞的某些生长调控基因发生突变或异常 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 达的结果 null肿瘤免疫学发展概述 　　肿瘤免疫学是免疫学深入到肿瘤学研究的一个分支，它是研究肿瘤的发生、发展与机体免疫的关系，以及应用免疫学原理和手段对肿瘤进行诊断、治疗和预防的一门科学。肿瘤免疫学是免疫学中发展最快的一个分支。人类的恶性肿瘤是危害人类最严重的疾病之一，其死亡率居各种疾病的第二位，并且在我国仍呈上升趋势。因此对肿瘤的研究受到广泛重视。null肿瘤免疫的概念起源于本世纪初。 1909年 Ehrlich最早提出了免疫监视的构想。》 在本世纪初有人发现把肿瘤移植同种动物后常常发生肿瘤消退现象。 1943年Gross首次证明了用甲基胆蒽诱导的肉瘤可使小鼠免疫，但所用的实验动物还不算纯系动物。 1957年prehn与 Main用纯系小鼠证实了Gross的结论。 60年代初，Thomas和Burnet正式提出“免疫监视”这一理论。 null1909年Ehrlich首先提出，免疫系统不仅负责防御微生物侵犯，而且能从肌体内清除改变了的宿主成分，此后人们认识到癌细胞是改变了的宿主成分 。null肿瘤免疫的概念起源于本世纪初。 1909年 Ehrlich最早提出了免疫监视的构想。》 在本世纪初有人发现把肿瘤移植同种动物后常常发生肿瘤消退现象。 1943年Gross首次证明了用甲基胆蒽诱导的肉瘤可使小鼠免疫，但所用的实验动物还不算纯系动物。 1957年prehn与 Main用纯系小鼠证实了Gross的结论。 60年代初，Thomas和Burnet正式提出“免疫监视”这一理论。 ●肿瘤免疫学检验是通过免疫学方法检测肿瘤特异性或肿瘤相关性标志物，达到早期筛选、辅助诊断、病情检测和预后评估等目的。 ●由于免疫学方法的特异、简便、快速和敏感、肿瘤免疫学诊断已成为肿瘤的早期普查、辅助诊断和预后判断的重要手段。 第一节 肿瘤抗原 第一节 肿瘤抗原 肿瘤抗原（tumour antigens) ——是在肿瘤发生、发展过程中新出现的或过度表达的抗原物质。 存在于肿瘤细胞表面或体液。 null ——细胞癌变过程使原本不表达的某些基因被激活即细胞癌变过程中合成的新的蛋白质分子 ——抗原合成过程的某些环节发生异常，如由于糖化等原因导致异常细胞蛋白质的特殊降解产物产生 ——基因突变：由于突变等使蛋白质分子的结构发生改变 ——正常情况下处于隐蔽状态的抗原表位暴露出来 ——多种膜蛋白分子异常聚集 ——胚胎性抗原或分化性抗原的异常、异位表达 产生机制第一节 肿瘤抗原第一节 肿瘤抗原一、根据肿瘤抗原特异性分类 ㈠ 肿瘤特异性抗原（TSA） ——指肿瘤细胞特有的抗原；只表达于肿瘤细胞，而不存在于正常组织的抗原。此类抗原最初是通过动物间进行肿瘤移植所证实，故曾被称为肿瘤特异性移植抗原（TSTA）或肿瘤排斥抗原（TRA）。这种多为突变基因产物。 TSA可存在于不同个体的同一组织学类型的肿瘤中，如黑色素瘤相关排斥抗原（MARA）,可见于不同个体的黑色素瘤细胞，但正常黑色素细胞不表达此类抗原；亦可为不同组织学类型的肿瘤所共有，如突变的ras癌基因产物可见于消化道癌、肺癌等，但其氨基酸顺序与正常原癌基因ras表达产物存在差异，能被机体免疫系统识别。 null第一节 肿瘤抗原第一节 肿瘤抗原 ㈡ 肿瘤相关抗原（TAA） ——不只存在于肿瘤患者的癌变细胞或体液中，也微量存在于正常细胞或体液中，但发生肿瘤时，肿瘤细胞表达TAA仅表现为量的变化，而无严格肿瘤特异性。 1、胚胎抗原 2、分化抗原 3、其他TAA null1. 胚胎抗原 ● 是一类在正常情况下在胚胎发育阶段由胚胎组织产生的正常成分，在胚胎后期减少，出生后由于基因被阻遏而逐渐消失，或仅微量表达，而不表达在成熟组织上的蛋白，当有细胞癌变时，此类抗原可重新合成，如（AFP、CEA、FSA）等 ● 可表达于肿瘤细胞表面，也可分泌或脱落到体液中，作为诊断的物质基础 ● 此类抗原曾在胚胎时出现过，机体已形成免疫耐受，故宿主对此不产生免疫应答 ● 在异种动物中具有很强的免疫原性，可利用制备特异性抗血清用于检测 第一节 肿瘤抗原第一节 肿瘤抗原一、根据肿瘤抗原特异性分类 分化抗原 是组织细胞在分化、发育的不同阶段表达或消失的正常分子。 为特定组织类型以及该组织正常分化的特定阶段所特有 ● 肿瘤细胞从单一细胞发源的克隆性扩增群体，常过量表达 ● 来源于特定组织的肿瘤可表达该组织的分化抗原，如PSA 恶肿表达其他正常组织细胞特异性分化抗原，如ABO血型抗原 某些可表达未分化的或幼稚细胞的分化抗原，如（TL）抗原 ● 由于分化抗原是正常细胞的一部分，不能刺激抗肿瘤的免疫应答 ● 可作为免疫治疗的靶分子和肿瘤组织来源的诊断标志第一节 肿瘤抗原第一节 肿瘤抗原一、根据肿瘤抗原特异性分类 3. 其他TAA ● 糖链抗原（CA）、组织多肽抗原、免疫抑制酸性蛋白、铁蛋白、 唾液酸、β2M等升高时可作为相应肿瘤的诊断指标 表27-2 某些组织特异性肿瘤抗原 第一节 概述 第一节 概述 二、根据肿瘤诱发和发生情况分类 肿瘤抗原 1. 理化因素诱发的肿瘤 ● 化学或物理因素  ● 肿瘤的抗原性较弱 ● 表现出高度个体化 ● 具有不同的抗原特异性 ● 人类肿瘤大多不属此类理化因素 病毒诱发 自发性 正常细胞成分的异常表达甲基胆蒽 紫外线 氨基偶氮染料 X射线 二乙基亚硝氨 放射性粉尘 第一节 概述 第一节 概述 二、根据肿瘤诱发和发生情况分类 2. 病毒诱发的肿瘤 主要是DNA病毒和RNA病毒，尤其是反转录病毒。 ● 病毒基因整合到宿主细胞基因中，使其表达病毒基因编码蛋白 ● 编码蛋白经处理后形成病毒肽-MHC-I类分子，并表达在肿瘤细胞表面 刺激机体产生针对肿瘤的特异性免疫应答 ● 同一种病毒诱发的不同类型的肿瘤均可表达相同的抗原 ● 具有较强的免疫原性，在患者血清中可检出较高效价相关病毒抗体 null3. 自发性肿瘤的抗原 ● 人类大多数肿瘤属于自发肿瘤，无明显诱因 ● 一些类似于化学因素诱发的肿瘤，有明显的个体特异性 ● 一些类似于病毒诱发的肿瘤具有共同抗原 （四）正常细胞成分的异常表达（四）正常细胞成分的异常表达分化抗原 过度表达的抗原 胚胎抗原 细胞突变产生的独特型抗原第二节 机体抗肿瘤的免疫学效应机制第二节 机体抗肿瘤的免疫学效应机制 正常人体每天有1011个细胞处于分裂状态，其中发生突变的几率为10-9~10-7。免疫系统能及时识别和清除突变细胞，保护机体不发生肿瘤，这是免疫监视功能发挥的作用。一、抗肿瘤的细胞免疫机制一、抗肿瘤的细胞免疫机制（一）、 T细胞 1.CD4+Th CD4+Th 细胞被APC递呈的肿瘤抗原激活，分泌CK、 IL-2、IFN-γ、TNF激活Mф、B细胞、NK细胞、CTL杀伤肿瘤细胞： 2.CD8+CTL 直接识别肿瘤细胞表面的肿瘤抗原肽-MHC-I 类分子复合物，被激活并增殖，特异性地杀伤肿瘤 细胞或致其凋亡。活化的CD8+CTL可分泌细胞毒介质（如穿孔素、颗粒酶和TNFα、β ）和表达FasL,介导肿瘤细胞坏死或凋亡（一） T细胞（一） T细胞3.γδ+T细胞 与CTL相似，可直接杀伤肿瘤，但不受MHC限制； 可分泌IL-2、IL-4、IL-5 、GM-CSF和TNF等细胞因子； 在IL-2 作用下，可以LAK或TIL的形式杀伤肿瘤细胞。nullCD8+、CD4+相互辅助作用 nullCTL 细胞释放穿孔素和颗粒酶杀伤肿瘤细胞机制granzymeCD8+ T CellsnullFasLFasTNFT cellTumor cellDeath domainTNFRInactive procaspaseActived caspaseDead tumor cellCTL的FasL细胞毒作用（二）NK细胞（二）NK细胞非特异直接杀伤靶细胞，不受MHC限制，故NK细胞被视为机体抗肿瘤的第一道防线。 杀伤机制 ： 释放穿孔素、颗粒酶； 通过Fas/FasL途径； 释放NK细胞毒性因子和TNF； ADCC效应； 释放IL-1、IL-2、IFN-γ等细胞因子。null 肿瘤 特异性抗体 肿 瘤 免 疫 （ADCC） 肿瘤 细胞死亡 NK细胞 B /浆细胞 肿瘤细胞 Fc受体Fc受体巨噬细胞（三） 巨噬细胞（Mф）（三） 巨噬细胞（Mф）Mф的杀瘤效应： ADCC作用； 通过非特异性膜受体直接与瘤细胞结合； Mф分泌TNF、IFN、IL-I、NO等杀伤瘤细胞； 非特异性的吞噬和杀伤； 激活T细胞释放SMAF，激活Mф特异性杀伤； 处理和提呈肿瘤抗原，协助T、B细胞发挥作用（四）树突状细胞（dendritic cell,DC）（四）树突状细胞（dendritic cell,DC）可高表达MHC-Ⅰ、MHC-Ⅱ、B7和ICAM-1等免疫相关分子，参与肿瘤抗原提呈； 内皮细胞被TNF-α、IFN-γ等激活后具有细胞毒作用。nullDC人肿瘤的免疫组化检测揭示，肿瘤组织的DC浸润与肿瘤预后相关 强有力的APC，肿瘤抗原负载的DC过继转输能诱导CD4+T细胞和CD8+T细胞应答 二、体液免疫机制二、体液免疫机制补体依赖的细胞毒作用 ADCC作用 抗体的免疫调理作用 抗体封闭肿瘤细胞表面某些受体 抗体干扰肿瘤细胞粘附 其他null靶细胞ADCC 作用补体介导的 溶解靶细胞 抗体分子在抗肿瘤免疫应答中的作用引起细胞雕亡或生长抑制的信号 或封闭作用第三节 肿瘤免疫学检验第三节 肿瘤免疫学检验 是指用免疫学的方法检测肿瘤抗原、抗体等肿瘤标志物和肿瘤患者的免疫功能状态，为肿瘤的诊断、观察病情、评价疗效及预后具有重要价值。一、肿瘤标志物(tumor markers，TM) 一、肿瘤标志物(tumor markers，TM) 1978年Herberman在美国国立癌症研究所召开的人类肿瘤免疫诊断会上提出的。 肿瘤标记物（tumor marker）又称肿瘤标志物，是指特征性存在于恶性肿瘤肿瘤细胞，或由恶性肿瘤细胞异常而产生的物质，或是宿主对肿瘤的刺激反应而产生的物质，并能反映肿瘤发生、发展，监测肿瘤对治疗反应的一类物质。存在于肿瘤患者的组织、体液和排泄物中，能够用免疫学、生物学及化学的方法检测。 在肿瘤患者体液或组织中存在的比正常人更高水平的一类物质。（如酶、糖蛋白、等）null肿瘤抗原可以是肿瘤标志物，但肿瘤标志物不一定是肿瘤抗原。 肿瘤标记物可存在于细胞表面、细胞质、细胞核和细胞外（血液、体液）中。肿瘤标志物发展概况肿瘤标志物发展概况1845 Bence-Jones 本周蛋白 1930 Zondek HCG 1959 Markert 同工酶 1963 Abelev AFP 1965 Gold & Freeman CEA 1969 Hubner & Todaro 癌基因 1975 Kohler & Milstein 单克隆抗体 1978 Herberman 提出肿瘤标志物概念 1979 英国第7届肿瘤发生 TM被确认并应用临床 生物学和医学会议 1980 Koprowski CA19-9 1981 Bast et al CA125 1981 Colcher et al CA72-4 1984 Kufe et al CA15-3 …... 肿瘤标记物发展的历史肿瘤标记物发展的历史第一阶段，1846年～1928年，发现本周蛋白 第二阶段，1929年～1962年，发现一些激素、酶、同工酶和蛋白在肿瘤发生时异常，如：异位激素、促性腺激素、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶 第三阶段，1963年～1975年，发现了一些胚胎蛋白性标记物 ，AFP、CEA 第四阶段，1976年至今，单克隆抗体技术的建立，大量的肿瘤标记物涌现出来，如CA15-3、CA125 、CA19-9等理想的肿瘤标志物理想的肿瘤标志物灵敏度高 特异性强 定位性好 反应病情 监测肿瘤疗效 监测肿瘤复发 预测肿瘤预后 至今，还没有一种肿瘤标志物能完全满足上述各项要求! 肿瘤标记物的分类肿瘤标记物的分类 由于肿瘤标记物的来源和性质非常复杂，至今尚未有一个统一的分类方法。 目前的分类方法有两种： 一是按肿瘤标记物的来源， 二是按肿瘤标记物本身的化学性质和免疫学特性。 按肿瘤标记物的来源分类按肿瘤标记物的来源分类肿瘤的特异性标记物 ，指仅有某一种肿瘤所产生的特异性物质 。 肿瘤辅助标记物 ，在一类组织类型相似而性质不同的肿瘤发生时，其水平都有升高 。按肿瘤标记物本身的性质分类按肿瘤标记物本身的性质分类胚胎抗原 蛋白类标记物 糖类标记物 酶类标记物 激素类标记物 基因类标记物 其他肿瘤标记物 null体液中的肿瘤标志物一般分为： 胚胎抗原类 糖链蛋白类 激素类 酶和同工酶类 蛋白质类 癌基因产物类null3.影响血液和其他体液中肿瘤标志物浓度的因素： 肿瘤的大小和瘤细胞的数目 瘤细胞合成和分泌肿瘤标志物的速度 瘤组织血液供应的好坏 瘤细胞是否有坏死和坏死的程度 瘤细胞的分化程度和肿瘤的分期 瘤细胞是否表达和合成肿瘤标志物 肿瘤标志物在体内的降解和排泄速度null4. 肿瘤标志物的临床应用： 高危人群的筛查 肿瘤的辅助诊断 肿瘤治疗效果的评价 肿瘤复发的监测和预后的判断常用肿瘤标志物常用肿瘤标志物甲胎蛋白（AFP） 癌胚抗原（CEA） β2-微球蛋白（ β2-MG） 铁蛋白（SF） 细胞角质素片段抗原21-1（CYFRA21-1） 鳞状上皮癌相关抗原（SCC-Ag） 前列腺特异抗原（PSA） 组织多肽抗原（TPA） 糖类抗原（CA50、CA125、CA15-3、CA199、CA242、CA72-4） 神经元特异性烯醇化酶（NSE） 前列腺酸性磷酸酶（PAP） 激素类肿瘤标志物蛋白类肿瘤标志物糖脂类肿瘤标志物酶及同工酶类肿瘤标志物激素类肿瘤标志物常见肿瘤标志物常见肿瘤标志物1. 胚胎抗原类肿瘤标志物： AFP CEA（一）AFP的临床应用（一）AFP的临床应用AFP(alpha-fetoprotein)属糖蛋白抗原。由胚胎肝细胞合成，其次由卵黄囊合成，肠上皮细胞少量产生。分泌到血清中。 胚胎时的AFP，1-2个月合成，3个月达高峰，5个月后合成下降。分娩时合成停止。 主要AFP的生物学作用; ①胚胎 时起白蛋白的作用。②保持胎儿不被排斥。③具有免疫抑制作用。④促进肿瘤细胞的生长 AFP升高的因素AFP升高的因素生理条件下，，AFP在卵黄囊的内胚层细胞和胚肝、新生儿肝细胞中高度表达，在胃肠道粘膜上皮细胞中也有见表达。 病理状况下，见于正常成年个体的肝细胞被破坏后的再生（急、慢性肝炎，重症肝炎恢复期，肝硬化）、先天性胆管闭塞、畸形胎儿（无脑儿、脊柱裂等）以及原发性肝细胞肝癌、畸胎瘤或部分胃肠道肿瘤 null正常值：≤ 25ug/ L;＞300ug/L有可能是肝细胞癌，妊娠 <400ug/L;其他疾患：＜100 ug/L AFP的临床意义AFP的临床意义诊断肝癌： 在我国60～70％的肝癌病人存在AFP高于正常值。 正常人血清AFP值为10～30μg/L， 凡AFP>500μg/L持续1个月或AFP>200μg/L持续2个月，应高度怀疑 肝癌，同时应有医学影像学的证据参与诊断； 低浓度（50～200μg/L）持续时间超过2个月的患者，应视为肝癌的高危人群。 当谷丙转氨酶（ALT）正常，用AFP来诊断肝癌，可取性可达100％。 其他： 在进行肝癌诊断时，应排除由妊娠、活动性肝炎、生殖腺胚胎癌、继发性肝癌和少数消化道肿瘤等引起的AFP升高，通常由非原发性肝癌引起的AFP升高，一般都不会高于400μg/L。 3.6～5.2％的胆管上皮癌、84％以上的肝母细胞癌和70％左右的生殖性畸胎瘤及较少比例的胰腺癌、肺癌、肾癌和白血病患者也可出现AFP低浓度的异常升高。 良性病变中的AFP升高 升高一般是散在的和暂时的， 肝炎病人，10％升高， 水平<50μg/L 肝硬化病人，30％升高， 水平< 500μg/L null缺点：对原发性肝癌的敏感性只有70％左右 对转移性肝癌的诊断效果就更差 对AFP指标阴性，临床可疑的患者应结合其他检查资料或多项指标联合检测，如同时检测γ-GT-Ⅱ、AFU、ALP等，以期优势互补，减少漏诊 (二) CEA(carcinoembryonic antigen)的临床应用 (二) CEA(carcinoembryonic antigen)的临床应用 CEA1965年由加拿大学者发现结肠腺癌和胎儿结肠中提取的肿瘤相关抗原,所以被认为是结、直肠癌的特异性标记。CEA属肿瘤细胞的结构抗原，在细胞浆中形成，通过细胞膜到细胞外面，然后进入周围的体液，因此从血清、脑脊液、乳汁、胃液、胸水、及排泄物中均可以检出。 肝脏是CEA分解代谢的场所。 应用中发现无器官特异性，但准确率较高。null CEA是一种结构复杂的可溶性糖蛋白，分子量180kD，主要存在于胎儿消化道上皮组织、胰脏和肝脏。正常情况下CEA 进入胃肠道，而肿瘤细胞分泌的CEA则进入血液和淋巴液，故血中CEA含量会增高。 CEA的检测： EIA 、RIA 参考值<5μg/L （97%健康人低于此值） 吸烟者可达 5 μg/L 血清CEA升高见于：血清CEA升高见于：☞ 消化道恶性肿瘤：整个胃肠道恶性肿瘤均可增高。 ☞ 非消化道恶性肿瘤：如乳腺癌、卵巢癌、肺癌 有不同程度升高。 ☞ 肠道息肉、憩室炎、结肠炎、肝病、胰腺炎和肺部 疾病。 ☞ 检测胸、腹水或胃液的CEA含量对鉴别诊断有意义。 ☞ CEA与其它肿瘤标志物结合测定可以提高对癌症 的检出率。nullCEA的优势 : CEA是一个结肠癌标记物，CEA与CA242联合应用目前被认为是对结肠癌的最佳标记物的搭配。在整个直肠癌治疗其间，CEA是一个有效的监视指标，是发现复发的理想指标，其敏感性高于X线和直肠镜。 CEA的局限性: 只在肿瘤的中晚期才有较显著的升高，也不只局限于某一类肿瘤，因此CEA对多数肿瘤的早期发现与鉴别诊断并无帮助。 CEA具有较高的假阳性和假阴性，并不适合用于肿瘤的普查 2、糖链抗原类 （carbohydrate antigen,CA） 2、糖链抗原类 （carbohydrate antigen,CA）（1）CA15-3：是一种乳腺癌相关抗原； 化 学 本 质：>300kD 糖蛋白； 分泌(或表达)：正常人血清中浓度极低，乳腺、卵巢癌高表达，主要是乳腺癌的标志； 主要临床意义：乳腺癌诊断、预后、转归判断 与CA153同类的多态性上皮黏蛋白还有MCA、CA27-29、CA549等。血清CA153升高见于：血清CA153升高见于：☞ 乳腺癌：早期阳性率<30%,转移后可达80%。 ☞ 其他恶性肿瘤：如卵巢癌、胰腺癌、肺癌、胃癌、 结直肠癌、其他妇科肿瘤有不同程度升高。 ☞ 非恶性肿瘤：肝病、胃肠道、肺、乳腺、卵巢等疾 病，阳性率一般<10%。null CA125: 1984年应用放射免疫技术建立了CA125的单克隆抗体的检测。CA125广泛分布在浆膜表面上皮（胸膜、腹膜、心包膜 )和苗勒氏管的衍生物 (如输卵管内皮、子宫、及宫颈内膜）。 OC12-5单抗 如图说明CA12-5一种与卵巢癌(ocarian cencar)相关的抗原。素细胞黑色(±)卵巢浆液细胞（+）其他肿瘤细胞 (–) 胚胎细胞(–)血清CA125升高见于：血清CA125升高见于：☞ 卵巢癌：阳性率约为61.4%。 ☞ 其他非卵巢恶性肿瘤：如乳腺癌、胰腺癌、肺癌、 胃癌、结直肠癌、其他妇科肿瘤有不同程度升高。 ☞ 非恶性肿瘤：如子宫内膜异位症、盆腔炎、卵巢囊 肿、胰腺炎、肝病等疾病。 ☞ 妊娠早期。null（3）CA19-9 是一种与胰腺癌、胆囊癌和胃肠道癌相关的肿标，又称胃肠癌相关抗原。 化学本质：3000～5000KD粘蛋白型糖蛋白。 分泌(或表达)：正常胰胆体液极微量，胚胎期间胎儿的胰腺、胆囊、肝、肠等组织存在这种抗原，消化道肿瘤高表达。 主要临床意义：消化道肿瘤筛选、检测、胰腺癌诊断、预后判断的较好指标。 血清CA19-9升高见于：血清CA19-9升高见于：☞ 胰腺癌、胆囊癌、胆管壶腹癌：阳性率约为74.9%， 尤其是胰腺癌晚期患者。 ☞ 胃癌阳性率约为50%，结直肠癌阳性率约为60%。 ☞ 非恶性肿瘤：如急性胰腺炎、胆囊炎、胆汁淤积性 胆管炎、肝硬化、肝炎等疾病。3.酶类肿瘤标志物3.酶类肿瘤标志物一、前列腺特异性抗原 （prostate special antigen， PSA ） 分子量约为34 000 含糖7％的糖蛋白分子 由240个氨基酸组成 具有蛋白酶的活性，和缓激肽家族的丝氨酸蛋白酶的氨基酸序列相似 正常人PSA主要存在于精液中，其浓度（0.5～5.5g/L）约为血清（<0.4μg/L ）的100万倍， 每克前列腺癌组织可使血清中PSA升高3μg/L， 每克增生的列腺组织可使血清中PSA升高0.3μg/L。 在血清中PSA以两种生化形式存在，较少（5％～40％）的是游离型PSA（f-PSA），半衰期0.75～1.2小时；大量（60％～90％）存在的是复合型PSA （c-PSA），半衰期约2～3天，临床上测定的是总PSA 前列腺癌成功治疗后，高浓度的PSA降到正常值约需2～3周。血清PSA升高见于：血清PSA升高见于：☞ 前列腺癌：阳性率约为75%。 ☞ 非恶性肿瘤：前列腺肥大、前列腺炎和泌尿 生殖系统疾病。 ☞ 采血前进行直肠指诊、前列腺按摩、导尿 等，将导致血清PSA升高。null（2）神经元特异性烯醇化酶 (neuron specific enolase, NSE) 是烯醇化酶的一种同工酶，根据α、β、γ三个亚基的不同，可分为αα、ββ、 γγ、αβ、αγ 五种二聚体同工酶。α亚基主要存在于肝、肾等组织；β亚基主要存在于骨骼肌和心肌；γ亚基主要存在于神经组织。γγ同工酶属神经元和神经内分泌细胞特有，故命名为神经元特异性烯醇化酶。null化 学 本 质： 87KD酸性蛋白酶，参与糖酵解。 分泌(或表达)：正常脑组织中含量最高，起源于神经内分泌细胞的肿瘤组织有异常表达。 主要临床意义：SCLC、神经母细胞瘤、神经内分泌细胞肿瘤的诊断、预后判断指标。 血清NSE升高见于：血清NSE升高见于：☞ SCLC： ☞ 神经母细胞瘤、神经内分泌细胞肿瘤。 ☞ NSE也存在于正常红细胞中，故溶血标本影响测定。null（3）α-L-岩藻糖苷酶 (α-L-fucosidase, AFU) 是原发性肝细胞癌的标志物。 化学本质：溶酶体酸性水解酶，参与糖蛋白、糖脂和寡糖的代谢。 分泌(或表达)：广泛分布于人体各种细胞的溶酶体内以及血液和体液中，以往主要用于遗传性AFU缺乏引起的岩藻糖苷贮积症。 主要临床意义：原发性肝细胞肝癌的诊断、预后判断指标。血清AFU升高见于：血清AFU升高见于：☞ 原发性肝细胞肝癌：小肝癌患者中AFU阳性率 显著高于AFP。 ☞ 其他恶性肿瘤：如乳腺癌、肺癌、结直肠癌、子宫 颈癌等有不同程度升高。 ☞ 非恶性肿瘤：肝炎、肝硬化。 ☞ 妊娠。4.激素类肿瘤标志物4.激素类肿瘤标志物（1）人绒毛膜促性腺激素 (human chorionic gonadotroopin,hCG) 本质：45kD糖蛋白类激素，有α、β两个亚基。 分泌(或表达)：胎盘滋养层细胞，恶性肿瘤异常表达。 主要临床意义：早孕，生殖细胞肿瘤的诊断、预后判断指标。血清hCG升高见于：血清hCG升高见于：☞ 滋养层肿瘤和生殖细胞肿瘤：如葡萄胎、绒毛膜细 胞癌、精原细胞睾丸癌等，绒癌100%升高。 ☞ 其他恶性肿瘤：如乳腺癌、肺癌、胃肠道癌、胰腺 癌等有不同程度升高。 ☞ 非恶性肿瘤：如卵巢囊肿、子宫内膜异位症、肝硬化等。null（2）降钙素 (calcitonin,CT) 本质：3.5kD多肽激素。 分泌(或表达)：主要是甲状腺滤泡旁细胞即C细胞分泌，恶性肿瘤异常表达。 主要临床意义：甲状腺髓样癌的诊断、预后判断指标。血清CT升高见于：血清CT升高见于：☞甲状腺髓样癌： ☞ 其他恶性肿瘤：如乳腺癌、肺癌、胃肠道癌、胰腺 癌等有不同程度升高。 ☞ 非恶性肿瘤：肾功能衰竭。 ☞ CT在血液中的半衰期很短约为10min，才标本后应及 时处理，冷冻保存。5.蛋白质类肿瘤标志物5.蛋白质类肿瘤标志物（1）β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2M) 本质：分子量为11800的单链低分子量蛋白。 分泌(或表达)：人体除成熟红细胞和胎盘滋养层细胞以外，所有的有核细胞都有β2M，特别是淋巴细胞表面。 主要临床意义：恶性肿瘤和肾脏疾病的诊断、预后判断指标。血清β2M升高见于：血清β2M升高见于：☞ 恶性肿瘤：如肝癌、肺癌、胃肠道癌、MM、淋巴瘤 等有不同程度升高。 。 ☞ 肾脏疾病，如急慢性肾盂肾炎、肾小管损害等。 ☞ 肾移植排斥反应时，尿中β2M升高。 ☞ 免疫性疾病，如SLE、类风湿性关节炎、AIDS等。 null（2）铁蛋白(ferritin,Fer) 是体内含铁最丰富的蛋白，是判断体内是否缺铁的敏感指标。 本质：分子量为11800的单链低分子量蛋白。 分泌(或表达)：主要在肝脏合成，恶性肿瘤合成能力较强。 主要临床意义：恶性肿瘤的诊断、预后判断指标。血清铁蛋白升高见于：血清铁蛋白升高见于：☞ 恶性肿瘤：如白血病、淋巴瘤、胰腺、肺或肝脏的 实体肿瘤及乳腺癌复发或转移时。 ☞ 各种炎症感染，急性心梗、反复输血等。肝硬化、 肝坏死及其他慢性肝病。 ☞ 铁蛋白<1.2ug/L时即可诊断为缺铁，是诊断隐形缺 铁的可靠指标。 6.其他肿瘤标志物6.其他肿瘤标志物CA50 ——胰腺癌、结肠癌、胃癌等 CA72-4——胃癌、黏液性卵巢癌等 CA242 ——胰腺癌、结肠癌、胃癌等 PAP ——前列腺癌 SCC ——子宫颈癌、肺癌、头颈部鳞癌 唾液酸 ——肺癌、胃癌、肝癌、结肠癌、黑色素瘤 EB病毒抗原/抗体——鼻咽癌、B细胞淋巴瘤 TPA ——前列腺癌、膀胱癌、消化道恶性肿瘤 细胞角蛋白19片段——NSCLCnull（三）肿瘤标志物检测的注意事项1. 标本采集: 各种物理检查对TM检测的影响 药物对TM检测的影响 标本保存对TM检测的影响 溶血标本对TM检测的影响 酶类和激素类肿瘤标志物的特点null2. 检测方法和试剂： 方法学的差异 试剂盒的差异 测定标准化的问题 因此，在工作中要尽量使用同一种方法， 同一种仪器和同一厂家的试剂盒进行测定。null 3. TM检测的干扰因素 ⑴ 携带污染 (carry-over) 　⑵“钩状效应”（hook effect） ⑶ 嗜异性抗体：可导致在无抗原的情况下，出现肿瘤 标志物浓度增高的假象。嗜异性抗体可出现在曾被 鼠或宠物咬过的人，以及使用过动物免疫剂（如单 克隆抗体）治疗过的人。null 一种肿瘤可分泌多种肿瘤标志物，而不同的肿瘤或同种肿瘤的不同组织类型可有相同的肿瘤标志物。因此，单独检测一 种肿瘤标志物，可能会因为测定方法的敏感性不够而出现假阴性，联合检测多种肿瘤标志物有利于提高检出的阳性率。为此，选择一些特异性较高，可以互补的肿瘤标志物联合测定，对提高肿瘤的检出率是有价值的。常用肿瘤标志物的联合使用。（四）肿瘤标志物的联合应用null常用肿瘤标志物联合检测的临床应用 肿瘤 首选标志物 补充标志物肺癌 NSE、CYFRA21-1 CEA、TPA、SCC、ACTH、降钙素 肝癌 AFP AFU、γGT、CEA、ALP 乳腺癌 CA15-3、CA549 CEA、hCG、降钙素、铁蛋白 胃癌 CA72-4 CEA、CA19-9、CA50 前列腺癌 PSA f-PSA、c-PSA、PAP 结肠直肠癌 CEA CA19-9、CA50 胰腺癌 CA19-9 CA50、CEA、CA125 卵巢癌 CA125 CEA、hCG、CA72-4 睾丸肿瘤 AFP、hCG 宫颈癌 SCC CEA、CA125、TPA 膀胱癌 无 TPA、CEA 骨髓瘤 β2-M、本周蛋白 null 敏感性和特异性常常是一对矛盾，提高了敏感性，降低 了特异性，也就是说提高了肿瘤的检出率，同时提高了肿 瘤的假阳性率；反之，提高了特异性，降低了敏感性，即 提高了肿瘤诊断的准确性，降低了肿瘤的检出率（漏诊）。 我们至今尚未找到一种完美的联合，值得我们在工作中去 寻找。 肿瘤标志物的联合应用null 肿瘤的发生与机体的免疫功能状态，尤其是细胞免疫 状态密切相关。肿瘤患者的免疫功能测定对了解病情、 评价疗效、判断肿瘤的发展及预后有重要价值。 判断机体免疫功能状态的常用指标，包括T细胞及其亚群测定，T细胞增殖试验，巨噬细胞功能测定，NK细胞活性测定，T细胞介导的细胞毒性(LMC)测定以及血清中抗体、补体、某些细胞因子，如IL-2、TNF、IFN等测定二、 肿瘤患者免疫功能状态 的检测及临床意义null谢 谢！