甲磺酸帕珠沙星注射液临床药代动力学／药效学研究

四 川 大 学 U 学 niv 哿 医学E版di 2009；J Sichuan Univ Med Sci Edi) 40(4)：689— 693 ， 。 ’， ● 。 ’ 甲磺酸帕珠沙星注射液临床药代动力学／药效学研究 王宪冈4 ，苗 佳 △，梁德荣 ，余 勤 ，梁茂植 ，张淑华 1．四川大学华西医院 临床药理研究所 (成都 610041)；2．四川抗菌素工业研究所 【摘要】 目的 通过比较 300 mg和 500 mg甲磺酸帕珠沙星注射液临床药代动力学／药效学(PK／PD)参数 ， 指导临床合理应用抗菌药物。方法 对 24例健康受试者分别进行 300 mg与 500 mg帕珠沙星单次和多次给药的 药代动力学研究，采用反相高效液相色谱一紫外检测法 (RPHPLC—UV)测定血浆中帕珠沙星浓度 ；采用二倍琼脂稀 释法检测帕珠沙星对 7种 130株临床常见致病菌的最低抑菌浓度 (MIC)及 5种 90株菌的防突变浓度 (MPC)，计 算 PK／PD参数。结果 当血药浓度达稳态后，甲磺酸帕珠沙星 300 mg与 500 mg每 l2 h(Ql2 h)静滴对甲氧西林 敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)和肺炎链球菌的 AUCo- ／MIC 。分别为 215．36与 309．60和 107．68与 154．80，C⋯／ MIC 。分别是 57．52与 81．28和 28．76与 4O．64；但对耐 甲氧西林金黄色 葡萄球菌 (MRSA)的 AU 2 ／MIC均 远小 于 4O。其对铜绿假单胞菌的AUCo ／MIC 。和 C⋯／MIC。。均分别大于 100和 10；而对大肠埃希菌，肺炎克雷伯菌 和鲍曼不动杆菌 的 AUCo ／MIC。。均远小于 i00，C ／MIC 。小于或接近 1O。仅 甲磺 酸帕珠 沙星 500 mg Q12 h静 滴对 MSSA具有较强的防突变能力，300 mg和 500 mg Q12 h静滴对其它致病菌均无防突变能力。结论 甲磺酸 帕珠沙星 300 mg和 500 mg Q12 h静滴治疗急性细菌性感染疗效相当，故推荐临床用药 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 为 300 mg Q12 h静 滴 。 【关键字】 帕珠 沙星 PK／PD MIC MPC RPHPLC．UV 【中图分类号】 R978．1 Clinical Pharmacokineties／Pharmacodynamics Study on Pazufloxacin Methanesulphonate Injection WANG Xian— gang，^ A0 Jia ，LIANG De—rong，yU Q ，LLANG Mao-zhi，ZHANG Shu—hua． Division of Clinical Pharmacology， ￡China Hospital，Sichuan University，Chengdu 610041，China [Abstract] 0bjective To identify rational dosage regimen for pazufloxacin methanesu1phonate injection through a pharmacokinetics／pharmacodynamics(PK／PD)study．Methods Pazufloxaein methanesu1phonate at the doses of 300mg and 500 mg were injected to 24 healthy volunteers．The plasma concentrations of pazufloxaein were measured by RPHPLC—UV．The MICs of pazufloxaein against 130 strains of 7 species of bacterias，as well as the M PCs of pazufloxaein against 5 species of bacterias were measured by double broth dilution method．Results The AUCo一24／MIC5o of pazufloxacin methanesulphonate at a stabilized concentration state against methicillin-sensitive s 口 ，z ZDc0cc“ aureus(MSSA)and S．pneumoniae were 215．36 and 107．68 at the dose of 300 mg，and 309．60 and 154．80 at the dose of 500 mg，respectively．The Cm“／MIC5o were 57．52 and 28．76 at the dose of 300 mg，and 81．28 and 40．64 at the dose of 500 mg， respectively． However， the AUCo一24／MIC of pazufloxaein methanesu1phonate against methicillin-resistant s 口户^ yZ0c0cc“s aureus (M RSA) were far less than 40． Both the AUCo一24／MIC5o and the Cmax／MIC5o of pazufloxacin against P．aeruginosa at the doses of 300 mg and 500 mg exceeded the defined criteria 100 and 10．Whereas the AUCo-24／MIC and C ／MIC of pazufloxacin against E．coli， K．pneumoniae and A．baumanii were much less than 100 and 10．The capability of pazufloxacin methanesu1phonate to prevent mutations of MSSA was strong at the dose of 500mg，but not for other pathogenic bacteria either at 300 mg or 500 mg．Conclusion Pazufloxacin methanesu1phonate at the dose of 300 mg and 500 mg have similar efficacy in treating acute bacterial infections．The dosage regimen of 300 mg Q1 2h intravenous infusion is recommended． [Key words] Pazufloxacin PK／PD MIC MPC RPHPLC-UV 甲磺酸帕珠沙星是第 3代氟喹诺酮类抗菌药， 它通过抑制细菌 DNA拓扑异构酶、DNA旋转酶活 △ Corresponding author，E—mail：miaosiyi@yahoo．com．cn 性而发挥抗菌作用叫。文献报道，该药对很多细菌 均有较好 的抗菌活性 ；临床研究显示其对呼吸道 、泌 尿生殖道、外科、胆道、妇产科、耳鼻喉科、眼科等急 性细菌性感染疗效确切E。 ]。 四川大学学报 (医学版)2009年第 4O卷第 4期 抗菌药物的药代动力学／药效学 (PK／PD)研究 是抗菌药物体内浓度动态变化与抗菌活性之问关系 的研究，是综合考察抗菌药物作用的量一时关系、量一 效关系和时一效关系的方法 。本研究 旨在考察帕珠 沙星体 内浓度动态变化与体外抗菌活性 的关系，并 通过 300 mg和 500 mg甲磺酸 帕珠 沙星注 射液 PK／PD参数的比较 ，推荐合理用药方案 ，指导临床 合理应用抗菌药物 。 1 材料与方法 1．1 试验设计 纳入 24例经体检及实验室检查证实的青年健 康志愿者，男、女各半，均分为2组，分别接受静脉滴 注甲磺酸帕珠沙星注射 液 300 mg／100 mL或 500 mg／100 mL，输液泵 30 min恒速滴完，于给药前和 静滴开始后 0．17、0．33、0．5、0．58、0．67、0．83、1．0、 1．25、1．5、2．0、3．0、5．0、8．0及 12．0 h采集输液对 侧肘部静脉血 3 mL进行单次药代动力学研究。之 后每 12 h小时给药 1次(Q12 h)连续用药到第 5 d， 分别于第 2、3、4 d晨给药前采谷浓度，第5 d按首剂 给药采样点 留取血样 ，进行多次 药代动力 学研究 。 采用 反相 高 效 液相 色谱一紫 外 检 测法 (RPHPLC— UV)测定帕珠 沙星血药浓度 。收集 7种 临床 常见 致病菌 130株，采用二倍琼脂稀释法检i贝0帕珠沙星 对其的最低抑菌浓度(MIC)及其中 5种菌的防突变 浓度 (mutant prevention concentration，MPC)。计 算 PK／PD参数 AUC。 ／MIC和 C ／MIC，以评价 帕珠沙星的体内抗菌活性 。本研究获得华西医院伦 理委员会审批 ，所有受试者均签署知情同意书。 1．2 药品与试剂 甲磺酸帕珠沙星注射液，300 mg／100 mL，批号 030701；500 mg／100 mL，批号 031201，由成都博瑞 医药科技开发 有限公 司研制提供 。RPHPLC—Uv 检测用 甲磺酸帕珠沙星对照品 ：纯度 100．01 ，批 号 030101，由成都市博瑞医药科技开发有限公司提 供；内标对照品盐酸芦氟沙星：纯度 99．7 ，批号 960817，由武汉滨湖制药厂提供 。MIC测定用帕珠 沙星标准品：批号 021101，效价 99．2％，由四川倍达 尔新技术开发有 限公司研制提供 。上述药品和对照 品有效期均为两年。实验所用试剂除乙晴和二氯甲 烷为色谱纯外，其余均为分析纯。 1．3 试验对象 300 mg组志愿者年龄 l9～27岁 ，平均 (22．83 ±2．79)岁 ，身高 l_50～1．79 m，平均(1．63-l-0．07) m，体重指数 20．06~23．42，平均 21．25土1．18；500 mg组志愿者年龄 19～27岁 ，平 均(23．08土2．47) 岁，身高 1．52～1．76 m，平均(1．66士0．07)m，体重 指数 2O．28～23．57，平均 22．39±1．47。两组受试 者人 口学资料 比较差异无统计学意义。 1．4 菌株 临床收集到的 7种临床常见致病菌包括 ：肺炎 链球 菌 1O株 ，甲 氧 西 林 敏 感 金 黄 色 葡 萄 球 菌 (MSSA)、甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)、 大肠埃希菌 、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌和鲍曼不 动杆菌各 2O株。质控菌为金黄色葡萄球菌 ATCC 25923、ATCC 29213，大肠 埃希菌 ATCC 25922和 铜绿假单胞菌 ATCC 27853。 1．5 RPHPLC-UV法测定血药浓度 1．5．1 仪器与色谱条件 岛津公司 LC一2010CHT 系列 HPLC仪 ，可变 波长紫外检 测器 ，ClassVP色 谱数据工作 站。选用 YMC C 8(150×4．6 mm，5 m)色谱柱，柱温 35℃，洗脱用流动相为 CHsCN： 0．025 mol／L NaAc(13：87)，HAc调 pH 至 2．6O， 流速为 1 mL／min，紫外检测波长为 249 nm。 1．5．2 样品处理 量取血浆 样品 0．2 mL，加入纯 水和内标液各 0．1 mL(含芦氟沙星 20 ng)，漩涡混 匀，加 入 0．2 mL 磷 酸 盐 缓 冲 液 (0．02 mol／L， pH8．O)，混匀后加入 3 mL二氯甲烷萃取液，漩涡 萃取8 min，离心10 min(2500 r／min)，抽弃上层液， 置 38℃水浴 中通空气流挥干 ，残渣溶 于 0．15 mL 流动相后混匀，进样 0．1 mL， 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 色谱图。 1．5．3 标准曲线的制备 用空 白血浆配制帕珠 沙 星浓度 分别为 0．078、0．156、0．313、0．625、1．25、 2．5、5．0、10、20 mg／L的系列工作液 。按前述样 品 处理方法处理后进样分析，记录帕珠沙星和内标的 色谱峰高，以两者峰高比对应帕珠沙星浓度进行线 性 回归。 1．6 体外抗菌活性研究 1．6．1 MIC测定 分纯的待测菌平板上挑取 4～5 个单菌落接种于 3 mL MH 肉汤，35℃振摇孵育 5 h至混浊 ，肺炎链球菌需用加血清的肉汤增菌并孵 育过夜。生长后的菌液用 3～5 mL生理盐水校正 浓度至0．5麦氏比浊标准单位后，用 MH肉汤 1： 1O稀 释。按 照美 国 临 床 实 验 室 标 准 化 委 员 会 (NCCLS)推荐的二倍琼脂稀释法测定 MIC。 1．6．2 MPC测定 将 0．2麦氏比浊标准单位浓度 菌液接种到抗菌药物系列浓度平板上，接种菌量约 为 1O9～1010个菌 ，以不出现菌落生长的最低抗菌 J Sichuan Univ(Med Sci Edi)Vo1．40 No．4 2009 药物浓度为 MPC[7]。 1．7 PK／PD参数计算 文献报道 ，帕珠沙星消除半衰期短[8]，根据临床 一 日用 药 两 次 的 特 点 ，本 研 究 以 达 稳 态 后 的 AUC。 ×2作 为 AUC。‘2 计算 AUC ／MIC，以稳 态峰浓度(C。 ) 作为 C⋯计算 C ／MIC。 1．8 统计学方法 采用中国药理学会数学药理专业委员会编制的 DAS1．0临床药代动力学模块处理经时血药浓度数 据 ，得到主要药代动力学参数。 根据研究 目的和资料的性质选用 x。检验，t检 验、方差分析等进行相应统计学处理与分析，所有的 检验水准均为 0．05。 2 结果 2．1 血药浓度测定方法学评价 2．1．1 色谱峰 在选定色谱条件下，帕珠沙星及 内标 的保 留时间分别为 4．3 min和 5．2 min，其血浆 色谱图见附图。 2．1．2 标准曲线 对帕珠沙星、内标色谱峰高 比和 附 图 帕珠沙星 HPLC检测结果 Fig HPLC chromatograms of pazufloxacin A：Blank plasma；B：Pazufloxaein standard(4．3 min)and internal standard(5．2 min)；C：Blank plasma with pazufloxacin standard(4．3 rain)and internal standard (5．2 rain)；D：Plasma sample with pazufloxacin(4．3 rain)and internal standard(5．2 min) 帕株沙星工作液浓度进行 线性 回归 ，得标准曲线 回 归方程 ：Y一0．4135X一0．0409(r一0．9999)。帕珠 沙星浓度在 0．078~20 mg／L范围内与峰高 比有 良 好线性关系。 2．1．3 回收率及 精 密度 配 制 帕珠 沙星浓度 为 2O、5、0．625、0．156 mg／L的血浆样 品，每个浓度 日 内测 5次 ，连续测 5 d，得方法 回收率为97．85 ～ 110．94 ；日内精 密度 为 4．78 ～6．18 、日间精 密度为 5．12 ～9．91 。帕珠沙星 的萃取 回收率 为 66．76 ～72．76 ；内标芦氟沙星的萃取 回收率 为 88．21 。 2．2 帕珠沙星药代动力学研究 300 mg、500 mg剂量组各 12名受试者静滴 甲 磺酸帕珠沙星注射液后，其药代动力学均符合二室 模型。对首剂和末剂给药后的药代动力学参数进行 t检验，结果显示差异无统计学意义，说明多次给药 体内无蓄积现象 。见表 1。 2．3 帕珠沙星体外抗菌活性研究 帕珠 沙 星对 7种 130株 临 床 常 见致 病 菌 的 MIC及 5种 9O株菌的 MPC结果见表 2。MPC约 为 MIC的 4～16倍 。 2．4 PK／PD研究 甲磺酸帕珠沙星 300 mg和 500 mg Q12 h静滴 达稳态 血 药 浓 度 后 ，对 MSSA 和肺 炎 链 球 菌 的 AUC。_24／MIC50均大于 lOO、C ／MIC5o均大 于 10； 对 MRSA 的 AUCo_2 ／MIC 。仅 分 别 为 1．68和 2．42、C ／MIC5。仅分别为 0．45和 0．64；对大肠埃 希菌、鲍 曼不动 杆菌 的 AUC ／MIC和 C ／MIC 均明显小于 100和 1O，对肺炎克雷伯菌的 C ／MIC 虽然接近 1O，但是 AUC。 ／MIC5。远小于 100；其对 铜绿 假单胞菌 的 AUC ／MIC。。均大于 100、C⋯／ MIC5o均大于 10。见表 3。 2．5 帕珠沙星血药浓度与 MSW 研究 突 变 选 择 窗 (mutant selection window， MSW)是 MIC与 MPC之间的浓度范围，帕珠沙星 血药浓度在 MSW 内及高于 MPC的时问见表 4。 692 四川大学学报 (医学版)2009年第 4O卷第 4期 表 1 单次和多次静滴 300 mg、500 mg帕珠沙星药代动力学参烤("=I2) Table 1 1]he main pharmacokinetic parameters of single dose and multidoses of 300 mg or 500 mg pazufloxacin infusion intravenously(n--12) MSSA M RSA S．pneumoniae E．coli K．pneumoniae P．aeruginosa A．baumanii AUCo ／MIC(h) Cmax／MIC T> MIC(h) AUCo一24／MIC(h) C⋯ ／MIC T> MIC(h) AUCo-24／MIC(h) C √MIC T> MIC(h) AUCo ／MIC(h) C⋯ ／MIC T>MIC(h) AUCo ／MIC(h) C⋯ ／MIC T> MIC(h) AUC~z4／MIC(h) C⋯ ／MIC T> M1C(h) AUCo ／MIC(h) C ／MIC 215．36 57．52 24 1．68 0．45 0 107．68 28．76 l6 6．73 1．80 1．33 26．9Z 7．19 b 107．68 28．76 16 13．46 3．60 107．68 28．76 l6 0．84 0．22 O 53．84 14．38 10 0．84 0．22 O 3．37 O．90 0 6．73 1．8O 1．67 3．37 0．9O 309．60 81．28 24 2．42 0．64 O 154．80 40．64 24 9．86 2．54 2．5 38．70 10．16 10 154．80 40．64 24 19．35 5．O8 154．8O 40．64 24 1．21 0．32 0 77．40 20．32 16 1．2l 0．32 O 4．84 1．27 0．5 9．68 2．54 2．5 4．84 1．27 T> MIC(h) 4 0 6 0．5 ； MIC—MPC5o J Sichuan Univ(Med Sci Edi)Vo1．40 No．4 2009 3 讨论 近年来，以 PK／PD参数作为预测抗菌药物临 床疗效的指标已越来越成为研究热点[g]。氟喹诺酮 类药物属浓度依赖性抗菌药物，评价其抗菌活性的 PK／PD参数主要为 AUC0_2 ／MIC和 C 。 ／MICL1引。 多数研究者认为，对于革兰阴性菌感染，抗菌药物的 AUCo ／MIC>100～125和／或 C ／MIC>8～1O 是取得 良好临床和细菌学疗效的必要保证 ；而对 于 革兰阳性菌感染，特别是肺炎链球菌，AUC ／MIC ≥4O即可有较好的临床和细菌学疗效口 。 本研究 探讨 了不 同给药剂 量 下 ，帕珠 沙 星 的 PK／PD参数特点。甲磺酸帕珠沙星 300 mg与 500 mg Q12 h静滴对 MSSA和肺炎链球菌的 AUC ／ MIC均 远 大 于 4O、C ／MIC 均 远 大 于 10；而 对 MRSA的 AUC。． ／MIC。。均远小于 40、C ／MIC均 远小于 1O。对肺炎克雷伯菌的 C ／MIC 。接近 1O， 但是 AUC 。／MC。。远小于 100。其对铜绿假单胞菌 的 AUC ／MIC 。和 C ／MIC5。均大于 100和 10， 高于 AUC。I24／MIC> 100～125和 C ／MIC>8～ 1O的 标 准 ；但 对 大 肠 埃 希 菌、鲍 曼 不 动 杆 菌 的 AUC ／MIC均明显小于 100，C ／MIC均远小于 1O。结果表 明甲磺 酸帕珠沙 星 300 mg和 500 mg Q12 h静滴治疗 MSSA、肺炎链球菌 和大部分铜绿 假单胞菌所致的感染，均可能取得 良好的疗效，但对 MRSA、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌 所致感染 ，则不易取得满意疗效 ，且未发现给药剂量 500 mg优于 300 mg。 1999年 Drlica等首先提出了 MPC和 MSW 的 概念 ，MPC是防止耐药突变株被选择性富集的最低 抗菌药物 浓度 ，MSW 即是 MPC与 MIC之 间的浓 度范围[7 。本研究探讨了帕珠沙星对临床常见致 病菌的防突变能力 ，结果显示 甲磺酸帕珠沙星 500 mg Q12 h静滴治疗 MSSA 感染 时，给药问期 内治 疗药物浓度大于 MPC 。的时间长达约 8 h，在 MSW 内的时间为 4 h，而甲磺 酸帕珠沙星 300 mg Q12 h 静滴治疗时药物浓度在 MSW 内的时间达 6～7 h。 甲磺酸帕珠沙星 300 mg和 500 mg Q12 h静滴治疗 肺炎链球菌感染时，药物浓度在 MSW 的时问均约 为 11 h；而治疗 MSRA、大肠 埃希菌和铜绿假单胞 菌感染 时 ，药 物浓 度几 乎 均 在 MSW 内。说 明仅 500 mg甲磺酸帕珠沙星治疗 MSSA具有较强的防 突变能力，甲磺酸帕珠沙星 300 mg和 500 mg对 MSRA、肺炎链球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌均 无防突变能力。 综上所述 ，甲磺酸帕珠沙星 300 mg和 500 mg Q12 h静滴的PK／PD研究结果显示，其治疗临床常 见致病菌所致急性感染疗效相似 ，500 mg甲磺 酸帕 珠沙星仅对 MSSA 的防突变能力较强。从 用药安 全性和药物经济学角度综合考虑，推荐临床用药方 案宜为 300 mg Q12h静滴。PK／PD研究将抗菌药 物体内浓度的动态变化与体外抗菌活性有机结合起 来，是预测抗菌药物体内抗菌活性和临床疗效 ，以及 是否产生 选择性 耐药 的重要 手段 ，但 目前 PK／PD 研究缺乏统一的研究技术指南 ，其研究 规范 编程规范下载gsp规范下载钢格栅规范下载警徽规范下载建设厅规范下载 性和推 广应用价值值得进一步深入研究 。 参 考 文 献 1 范 柏 ．喹诺酮类抗 菌药 的作用 机制及 细菌 耐药性 的研 究进 展．国外医药抗生素分册，2004；25(1)：27—29． 2 Nomura N，Mitsuyama J，Furuta Y，eta1．Invitro and invivo 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