江南大学微生物学课件2-6

null病毒 virus病毒 virus Any of various simple submicroscopic parasites of plants, animals, and bacteria that often cause disease and that consist essentially of a core of RNA or DNA surrounded by a protein coat. Unable to replicate without a host cell, viruses are typically not considered living organisms.null非细胞生物非细胞生物真病毒euvirus：至少含有核酸和蛋白质两种组分 亚病毒subvirus 类病毒viroid：只含具单独侵染性的RNA组分 拟病毒virusoid：只含不具单独侵染性的RNA组分 朊病毒prion：只含蛋白质一种组分 真病毒的定义 真病毒的定义 一类超显微的非细胞生物，每种病毒只含有一种核酸；它们只能在活细胞内营专性寄生，靠寄主代谢系统的协助来复制核酸、合成蛋白质等组分，然后进行装配而得以增殖；在离体条件下，它们能以无生命的化学大分子状态长期存在并保持其侵染活性。病毒的分类病毒的分类依据宿主范围 植物病毒 动物病毒 微生物病毒 噬菌体 是感染细菌和放线菌的病毒。null痘病毒 棒状病毒 腮腺炎病毒噬菌体 疱疹病毒 乳头状瘤病毒 AIDS病毒病毒的化学组成与构造病毒的化学组成与构造化学组成 核酸( DNA 或 RNA) 蛋白质 构造 基本构造 核衣壳 ：核酸、衣壳 非基本构造 包膜、刺突典型形态的病毒典型形态的病毒1、螺旋对称 TMV病毒 典型形态的病毒典型形态的病毒2、二十面体对称 腺病毒 典型形态的病毒典型形态的病毒3、复合对称 T偶数系列噬菌体 nullnullHIV 病毒第六节 噬菌体 Bacteriophage, phage第六节 噬菌体 Bacteriophage, phage噬菌体是一类感染细菌或放线菌的病毒。 一、噬菌体的特点 1、无细胞结构，仅含一种核酸； 2、不能进行独立的代谢作用； 3、严格的活细胞寄生； 4、个体极小，能通过细菌滤器 null 噬菌体是超显微的，没有细胞结构的，专性活细胞寄生的大分子微生物。它们在活体外具一般大分子的特征，一旦进入寄主细胞又具有生命特征。 二、噬菌体的形态与构造 二、噬菌体的形态与构造 1、形态 噬菌体的基本形态有蝌蚪形、微球形和丝状三种。具体可分为6种类型nullnull 噬菌体的类型 null2、构造 E. coliT4构造：头部（正二十面体）、颈环、尾鞘、尾髓、基片、刺突、尾丝nullT4 Bacteriophagenull3、大小 T4：头部 65 ×95nm，尾部20 ×95nm f2：f20~25nm 右图还少标了尾髓和刺突的结构 null4、化学组成 蛋白质 核酸：dsDNA, dsRNA, ssDNA, ssRNA 三、噬菌体的生长和繁殖三、噬菌体的生长和繁殖1、吸附 adsorption 噬菌体的吸附器官与受体细胞的特殊位点的接触与结合 吸附的专一性： 寄主专一性： 位点专一性：T3、T4、T7----脂多糖；T2、T6----脂蛋白；雄性专一噬菌体----性纤毛。 过程：尾丝散开，刺突固着于特异性位点nullT4吸附 对于T类噬菌体的吸附器官是尾丝和刺突，尾丝首先触及寄主细胞表面，然后刺突固定。null2、侵入penetration 噬菌体核酸物质进入受体细胞。 T4：尾部的酶水解细菌细胞壁肽聚糖层 产生一小孔,尾鞘收缩,尾髓伸入细胞中,头部的核酸被压进细菌细胞,蛋白质外壳留在细胞外。 M13, f1, fd：其DNA自性纤毛中空管侵入寄主 细胞。 nullnullM13nullM13null3、增殖replication 噬菌体核酸物质及蛋白质在寄主细胞内的合成 早期及次早期的转录与转译作用 细菌DNA被DNase破坏 噬菌体核酸的复制 后期的转录与转译作用null T4 DNA复制的特点： 一是由于T4DNA中的胞嘧啶被羟甲基 胞嘧啶取代，所以在其DNA复制之前，必须由噬菌体编码的酶合成羟甲基胞嘧啶，并且在T4DNA合成后，羟甲基胞嘧啶被葡萄糖基化，以保护T4DNA免遭E.coli核酸酶破坏。 二是在T4DNA复制过程中，由6—8个拷贝结合形成非常长的DNA链。(多连体)nullnull4．成熟maturity/(装配)（assembly） 在增殖期合成的噬菌体的核酸和蛋白质按一定的顺序装配成噬菌体颗粒 null5．释放 release 子代噬菌体脱离寄主细胞而得以释放 四、噬菌体一步生长曲线 One Step Growth Curve 四、噬菌体一步生长曲线 One Step Growth Curve T2null潜伏期 latent phase 从噬菌体吸附细菌细胞至细菌细胞释放出新的噬菌体的最短时间。 裂解期 rise phase 从被感染的第一个细胞裂解至最后一个细胞裂解完毕所经历的时间。 平稳期 plateau 指被感染的宿主已全部裂解，溶液中噬菌体数达到最高点后的时期。 null裂解量 burst size 每个被感染的细菌释放新的噬菌体的平均数 不同的噬菌体的裂解量不同，T2为150左右（5~447），T4约100，fx174约1000，而f2则可高达10000。五、溶源性 lysogeny 五、溶源性 lysogeny 1．名词解释 (1)敏感细菌 sensitive bacteria (2)烈性噬菌体 virulent phage (3)温和性噬菌体 temperate phage (4)原噬菌体 prophage (5)溶源性细菌 lysogenic bacteria： E. coli B(l) (6)溶源化 lysogenization null2．溶源性细菌的基本特征 (1)具有遗传性 (2)能自发裂解 (3)能被诱发裂解 (4)具免疫性 (5)可以复愈 (6)可获得新的生理特性null3．温和性噬菌体的存在状态 (1)游离态：游离的具有感染性的噬菌体粒子 (2)整合态：整合或附着在细菌染色体上处于原噬菌体的状态 (3)营养态：在寄主细胞内处于复制和装配的状态六、噬菌体的生活史 六、噬菌体的生活史 1．烈性噬菌体的生活周期（lytic life cycle） null2．温和性噬菌体的生活周期 lytic and lysogenic life cycle 七、噬菌体的分离检查七、噬菌体的分离检查分离样品的制备 根据感染特征，选择所需采集的标本的种类 除去杂菌(离心或过滤) 诱导噬菌体的产生(uv或丝裂霉素C) 样品接种 噬菌体标本可接种于生长在培养液或营养琼脂平板中的细菌培养物。 噬菌体存在的表现 细菌培养液变清或细菌平板上出现噬菌斑null1．噬菌斑（plaque） 在细菌菌苔平板上，由于噬菌体感染，使寄主细胞不断裂解而形成的肉眼可见的空斑。空斑中的细菌被全部或部分裂解。 噬菌斑形成： 噬菌体 宿主细胞 培养基 nullnull2．噬菌体效价测定 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 效价（titer）：每毫升试样中所含有的具侵染性的噬菌体粒子数，又称噬菌斑形成单位（plaque-forming unit, PFU）。 (1)双层琼脂法： 方法：底层：2%营养琼脂， 上层：3~4ml 1%营养琼脂+0.2ml 宿主菌液+0.1ml 样品液；培养16~24hrs后观察。 优点：定量性好，结果清晰； 缺点：费时，麻烦。 (2)单层琼脂法 (3)载片快速法八、噬菌体的污染与防治八、噬菌体的污染与防治1.污染现象 2.污染原因 3.预防 措施 《全国民用建筑工程设计技术措施》规划•建筑•景观全国民用建筑工程设计技术措施》规划•建筑•景观软件质量保证措施下载工地伤害及预防措施下载关于贯彻落实的具体措施 (1)严格控制活菌体排放，使噬菌体在环境中得不到繁殖。 (2)选育和使用抗噬菌体的菌种。 (3)几株亲缘不同的菌种定期轮换使用。 (4)药物防治 4．污染后的补救九、酵母的病毒（Killer因子）九、酵母的病毒（Killer因子）1．杀伤因子：Saccharomyces cerevisiae killer是具有dsRNA作遗传物质的病毒样颗粒(virus-like particles，VLP)，其本质是酵母的拟病毒，需要辅助病毒L-A mycovirus (ds RNA)。 null2．有关酵母菌的类型： (1)毒性株：能分泌一种多肽毒素或糖蛋白毒素 (2)中性株：不分泌毒素，也不为毒性株所杀死 (3)敏感株：不分泌毒素，但能为毒性株所杀死nullnull十．亚病毒 subvirus 类病毒 viroid：是一类只含RNA一种成分、专性寄生在活细胞内的分子病原体。核酸为环状ssRNA，246~375核苷酸。所发现的类病毒都是植物病毒。 如马铃薯纺锤形块茎病类病毒 potato spindle tuber viroid, PSTVnull拟病毒 virusoid，又称类类病毒：是一类包裹在真病毒中的有缺陷的类病毒。 分子量1.2X105 ssRNA 复制依赖于辅助病毒。 朊病毒 prion：是一类不含核酸的传染性蛋白质分子。null十．亚病毒 subvirus 类病毒 viroid：是一类只含RNA一种成分、专性寄生在活细胞内的分子病原体。核酸为环状ssRNA，246~375核苷酸。所发现的类病毒都是植物病毒。 拟病毒 virusoid，又称类类病毒：是一类包裹在真病毒中的有缺陷的类病毒。其复制依赖于辅助病毒。 朊病毒 prion：是一类不含核酸的传染性蛋白质分子。