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肺部接种鸡毒霉形体导致雏鸡气管上皮病变的扫描电镜观察.pdf

肺部接种鸡毒霉形体导致雏鸡气管上皮病变的扫描电镜观察

hscsw
2011-02-17 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《肺部接种鸡毒霉形体导致雏鸡气管上皮病变的扫描电镜观察pdf》,可适用于高等教育领域

©ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouseAllrightsreservedhttp:wwwcnkinet上海农业学报,肺部接种鸡毒霉形体导致雏鸡气管上皮病变的扫描电镜观察‘闻人楚陈培龙赵建华‘上海市农业科学院畜牧兽医研究所,上海。。。摘耍日龄雏鸡肺部接种后,连续周,取气管用扫描电镜观察粘膜上皮的变化。接种后第天和第天,见到各接种组均有气管粘膜水肿卡他性病变见于菌株接种后第天和第天时第天各接种组气管粘膜均处于上皮修复和纤毛再生状态。以纤毛退行与否的量化标准评价了粘膜上皮的病变程度,各接种组中菌株诱发的病变最为严重。电镜观察到的气管病变情况与其它实验检测结果相对应关锐词鸡慢性呼吸道病鸡毒霉形体气管粘膜纤毛退行上皮细胞病变扫描电镜鸡慢性呼吸道病的主要病变发生在呼吸系统,首当其冲的是气管。的病原体鸡毒霉形体对离体培养的鸡胚气管的致病作用我们已经观察过另文发表。为了解在活体上对气管粘膜形态结构的影响过程,增进对其致病机理的认识,在进行感染源雏鸡的致病性试验时,借助扫描电镜观察了感染后不同阶段气管粘膜的状态。本文报道该项观察结果。材料与方法本试验所用的试验鸡及其饲养方法、菌株的接种以及各项实验室检测的实施方法和检查结果已有专文报告。扫描电镜观察样本的制备日龄白羽莱亨鸡在双侧肺部接种后的第,,天,每组随机取羽鸡,心脏采血致死后,细致地,避免扭曲地分离出气管,迅速剪取位于胸骨前一长的一段气管,,立即浸入,戊二醛中,固定后,用洗次,每次。再用梯度乙醇逐级脱水,即”、、丙酮,每次脱水巧。然后用丙酮乙酸异戊酷一,,再用纯乙酸异戊醋次置换,每次。然后进行临界点干燥,干燥后样品用导电胶粘于样品台,镀金后置于一扫描电镜中以原物放大的倍率观察,拍片,记录结果。未接种的鸡同时作同样处理对照。扫描电镜反映的病变评分为获得气管上皮细胞病变的量化观察结果,每份气管均拍摄放大或倍,倍,倍张照片,参照等使用的一种简便的影像形态测量法闭,对放大倍、倍的张照片反映的气管上皮纤毛退行与否以及退行程度评分。方法如下制作一个透明框架,尺寸正好使其个相同的分格置于张扫描电镜照收稿日期一一初稿一一修改稿。上海市自然科学基金资助项目。二在上海市农业科学院测试中心工作©ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouseAllrightsreservedhttp:wwwcnkinet©ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouseAllrightsreservedhttp:wwwcnkinet©ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouseAllrightsreservedhttp:wwwcnkinet上海农业学报卷片上约,每个分格内有、无纤毛分别被记为分或分。于是,最大的分值为分,表明个分格内的纤毛均已脱落,而。分则表明纤毛均存在。每份气管取倍和倍放大的张照片的平均分,每组以羽鸡的气管平均分为最终结果。结果间隔,连续周,用扫描电镜观察了羽感染和未感染的雏鸡气管上皮。见到的气管粘膜表面状态可归纳为正常、水肿、卡他和恢复状态种类型。正常状态粘膜组织有清楚的相邻气管环间的界限,在上皮细胞表面可见伸展的纤毛呈规则的形态,表面有短纤毛的细胞“补丁”,具有多边形清晰的细胞间分界图。这种情况见于从未感染的对照组所获取的气管。水肿状态气管环之间的界限不明显或消失,水肿使粘膜表面变得不平纤毛虽然多数还存在,但顶端肥大并呈相互沾粘状,细胞间分界消失图、。这种状况在接种后第天和第天的各感染组都观察到。卡他状态粘膜表面被不等数量的粘液和纤维蛋白覆盖上皮细胞部分剥落,纤毛局部消失图。这种状况见于菌株感染后第天和第天观察时。恢复状态表现为上皮的修复和纤毛的再生,细胞表面可见新生的微绒毛,细胞界限隐约可见图、。在接种后第天观察时,各感染组均以此状态为主。在感染后第夭和第天观察时,除对照组外,各组气管粘膜上均见到霉形体样微生物或其集落,第天观察时,感染组仍见有霉形体样微生物图、,其余各组未见到。根据所摄每份气管的倍、倍照片上纤毛病变评分的结果,反映出接种后第周、第周产生的纤毛病变比第周严重各感染组中以接种组病变评分最高,这些与上述各感染组的气管粘膜状态相符。详见附表,表中各组均以接种菌株为组名。表肺部接种后不同时间观索各组纤毛情况评分结果洛卜接种后天数接种菌株曰培养基是兹一⋯⋯丝日旦一一一上红一一一一一一丝匕乙一一一一一扫描电镜所摄气管表面状态照片的量化评价,见“材料与方法”“。羽鸡的气管平均分。讨论感染后,用扫描电镜观察到的气管粘膜病变情况与同一试验中雏鸡表现的临床症状和用其它实验方法检测所得的结果相对应。各感染组中以。菌株导致的气管粘膜病变最严重,除各组都见到的粘膜水肿外,该组气管粘膜还呈现卡他性炎症,纤毛病变程度也以该组为最甚。从而为该组试验鸡气囊炎发生率、死亡率均居各组之首〔‘〕提供了病理组织形态学依据,也表明扫描电镜观察到的气管粘膜病变与的发生、发展有密切的关系。选择纤毛退行作为评价气管粘膜病变程度的标准,目的是希望获得客观、量化的观察结果,本试验初步达到了此目的。由毒力菌株经气管感染所致的最明显和可见的细胞病变之一是上皮表面纤毛的退行〔卜‘〕。离体培养的气管环感染后,细胞病变也以纤毛停止运动©ChinaAcademicJournalElectronicPublishingHouseAllrightsreservedhttp:wwwcnkinet期闻人楚等肺部接种鸡毒霉形体导致雏鸡气管上皮病变的扫描电镜观察和脱落最明显图。本试验中,经肺部接种雏鸡,尝试用此标准衡量扫描电镜观察到的病变,发现纤毛退行同样是气管粘膜上皮病变的一项明显标志,据此评分的结果与观察到的整体情况以及其它实验检测所得结果相一致〔‘〕。表明该简便方法适用于客观地评价诱发的气管粘膜病变。用扫描电镜连续周观察接种后的雏鸡气管,发现粘膜病变在第、第周明显严重,而当第天观察时,粘膜处于恢复再生的状态,同时剖检雏鸡发现气囊炎的发生率也是感染后第、第周高于第周〔‘〕,初步勾勒出人工接种后宿主机体靶器官病变发生、发展、转归的轮廓,这样的过程在等闭和等川的实验中也反映了出来。各感染组广泛地存在粘膜水肿这一现象,是在扫描电镜下才观察到的,这些鸡在饲养时,并未发现有足以引起饲养者注意的呼吸道感染症状。这提示我们,作为一种方法,扫描电镜观察对鸡群呼吸道病的早期诊断,可能也是有用的。参考文献闻人楚,陈培龙,匾函画,等株鸡毒霉形体对源雏鸡的致病性试验上海农业学报,,一,,,场叻,,,,,几勿幼,,,,,场丫,斑切,,,,,,,一,,场丫,,加吵‘即勺,卿,,一一人勿邵一,人方,卯

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