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蝴蝶兰的组织培养研究.pdf

蝴蝶兰的组织培养研究

xjian88
2011-02-12 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《蝴蝶兰的组织培养研究pdf》,可适用于农林牧渔领域

第卷第期年月生物学杂志JoURNAI.oFBIOLoGYV.№.Jun文章编号:{)蝴蝶兰的组织培养研究秦凡周吉源(华中师范大学生命科学学院武汉)摘要:探讨蝴蝶兰的组织培养技术和方法。实验表明:改良型Ml培养基诱导原球茎有良好的效果MlBA.mg/L对花梗芽的诱导最合适MlBA.L对茎尖诱导原球茎最合适。降低分裂素浓度后原球茎可以分化成完整植株壮苗阶段以改良型MBA.m~/LNAAO.mg/L效果较佳。移栽基质选用水苔成活率高。关键词:蝴蝶兰组织培养原球茎中图分类号:Q.文献标识码:A蝴蝶兰phalaenopsis为兰科蝴蝶兰属植物它是一种热带气生兰俗称“洋兰”。蝴蝶兰花型似蝴蝶形态美妙、色彩丰富、花期长在热带兰中素有“兰花皇后”之美称uJ是近年来在国际花卉市场上最受欢迎的洋兰。蝴蝶兰是单茎气生兰植株极少发育侧枝因此对其进行常规的无性繁殖以及依靠种子萌发进行繁殖增殖速度极慢难以满足市场要求而组织培养是进行大量繁殖的最有效手段。目前我国进行蝴蝶兰组织培养研究大多集中在台湾地区以及沿海地区华中地区少见关于蝴蝶兰组织培养、移栽的报道。本实验室根据华中地区的气候特点开展了蝴蝶兰组织培养、移栽等方面的研究现报道如下:材料、方法.材料:供试材料取自湖北省林业局花卉大市场二年生成花取其花梗和幼茎其中花梗为天以前的全部幼嫩花序。.灭菌:将花梗从母体切下再将花梗切成带芽的小段同时将茎上面叶子和茎下面根部分别切去留带茎尖的茎段约lcm。首先将花梗段茎段分别放入%漂白粉溶液中漂洗分钟最后放入O.%升汞溶液和%酒精溶液中消毒备用。.培养基:/Vll、M、M三种基本培养基。附加活性炭.%蔗糖.O%琼脂.%pH值调至.O~.。不同的培养阶段附加不同种类和浓度的植物激素。然后配制分装经高压灭菌分钟后备用【引。.光照、温度:散射光照℃左右。.移栽基质:采用水苔作为移栽基质装盆前所有基质均经高压灭菌。结果分析.灭菌时间将进行漂洗后的花梗腋芽段和茎段分别剥离出腋芽和茎尖。然后放入到O.%的升汞溶液中消毒再放入%的酒精溶液中进行灭菌处理。其时间见表l表.%升汞溶液消毒灭菌时间及效率⋯.时间(秒)外植体注:污染比=污染数/接种总数*死亡收稿日期*'维普资讯http:wwwcqvipcom第卷第期年月生物学杂志JOI『RNAI.OFBIoIGY、ro.Nl.Jun上表可知茎尖以O.%升汞分钟酒精秒为最佳而花梗以O.%升汞Ol分钟酒精O秒为最佳。.以茎尖、花梗芽为外植体诱导..培养基的选择由于蝴蝶兰外植体接种后易褐变因此培养基的选择是关键部分为了找到诱导原球茎较好的培养基我们试用了种基本培养基(主要是无机盐含量不同)即:Ml、M、MEI。在这三种基本培养基中分别加BA.mg/L每种接瓶每瓶放人个花梗芽置于散射光温度cI=左右培养个月左右。三种培养基都能使花梗腋芽萌发。但不同培养基诱导效果不同(表)。表培养基对花梗腋芽萌发率注:萌发率=营养芽数/腋芽总数X%从表可以看出不同培养基对花梗腋芽诱导作用各不相同Ml效果最好最高达%M的诱导最差为%。本实验用蝴蝶兰茎尖为材料所得结果相似。因此Ml培养基有利于茎尖花梗腋芽的诱导。..花梗腋芽的诱导将带腋芽的花梗植于Ml培养基上附加不同浓度BA诱导花梗腋芽的萌发其中BA浓度为、l、、、、、(rag/L)种浓度梯度每处理三瓶共用花梗芽个。个半月后统计其萌发率(表)。表不同浓度BA对花梗腋芽的萌发率注g萌发率=营养芽数/腋芽总数x%由表可知BA在浓度为mg/L时效果最好然后随浓度升高降低。萌发后的营养芽周培养能长出叶幼苗。经过壮苗、生根等阶段培养即可长成试管苗。其无根苗去叶取其茎尖通过茎尖诱导原球茎可进行大量繁殖。..茎尖产生原球茎的诱导寰各种激素对茎尖原球茎诱导率激索接种数(个)原球茎数(个)诱导率通过茎尖进行原球茎的诱导关键在激素调节。众所周知激素是植物组织培养的重要组成部分为了确定较佳的激素作者配制一组BA、NAA以及D组合用于茎尖原球茎诱导其中BA浓度为O、.Om~/L、.Omg/L、.m~/L个梯度NAA、D都为.mg/L、~mg/L两个梯度均以Ml为培养基每个处理瓶共用茎尖lO个左右个月后统计原球茎数(表)。由表可知:MlMNAA、MlD系列均不能诱导原球茎。而茎尖诱导以MlBA.为最佳浓度。当BA浓度达到rng/L时出现褐化死亡这可能与高浓度BA刺激多酚氧化酶作用、引。.原球茎的继代培养将初代培养所得到的原球茎可以在初代相同的培养基上继代增殖但是BA的浓度以.mg/L时最佳原球茎的增殖系数个月内能达到倍以上原球茎增殖后转接到新鲜培养基就会陆续出芽形成从生芽从而诱导出苗。.壮苗与生根将继代得到的小苗转人到各种壮苗生根Ml、M、M培养基上以M为最佳激素浓度以BA.mg/L.mg/LNAA组合较佳【BI。维普资讯http:wwwcqvipcom第卷第期年月生物学杂志JOI『RNAI.OFBIOLoGYV.№.Jun.炼苗与移栽..炼苗当蝴蝶兰试管苗长至cm高具有片叶时打开封口膜在室温下炼苗一周方法采用金玻方法出瓶时洗净根部培养基在.%的(IGl)高锰酸钾溶液中泡min后风干叶面上水分然后用高温灭菌的水草经过清水浸泡数小时挤干水分后将幼苗根包住栽于塑料盘中不要立即浇水可一周后开始浇水。武汉地区一般情况下夏季每天浇一次而春、秋、冬隔天一次为好温度应保持在℃以上温度达%左右。苗移栽一个月后用花宝系列肥结合浇水进行叶面施肥个月后即可上大盆。..大苗栽培及管理...温度光照由于蝴蝶兰主要分布于热带低海拔地区栽培对温度要求比较严格最适栽培温度为白天℃一℃夜间l℃一℃在这样环境中蝴蝶兰处于长期长生状态因此武汉地区从每年月一l月都可进行大规模的大苗栽培。蝴蝶兰不适于强烈阳光下生长在强阳光下要用遮阳网遮蔽阳光。冬季可少遮些。...栽培基质及方法基质选用水苔作基质的盆栽法主要适用多孔塑料盆盆高最好小于直径盆下部用小块泡沫填充以利排水上面用水苔填充将小苗栽植于盆中切不可压得太紧以防烂根。...施肥及花期管理蝴蝶兰在温度适宜条件下生长迅速全部都可以生长因此它需肥量比其它兰花稍多主要以液肥为主春天适当少施夏秋多施促进其生长每周次液肥主要用花宝号倍液春节前个月左右改用含磷、钾元素高的花宝号倍液喷施。蝴蝶兰形成花茎主要受温度影响短日照、低温利于花茎形成及生长武汉地区每年春节前后基本适合蝴蝶兰开花期生长但注意夜间温度一定要控制在l℃以上并且不能一直低温否则会延迟花期。讨论.蝴蝶兰的快繁技术近年来在我国沿海地区进行实验报道但文章有限本文通过选择不同的培养基及激素组合结合武汉地区气候环境对试管苗的培育及移栽进行尝试这对蝴蝶兰这种花卉推广有一定意义。.切取花梗对母株影响很小是比较理想的外植体来源。利用花梗不仅达到快繁目的而且还可避免伤害母株母株通过肥、温度控制又可产生新花梗也不会影响成株砚花等不良后果。.蝴蝶兰的组织培养过程中由于兰科植物易褐化⋯因此培养基的无机盐成分特别关键我们通过不断研究配制两种培养基(MI、M)对蝴蝶兰组织培养较适合。参考文献:谭文澄等.观赏植物组织培养技术M.北京:中国林业出版社。.加古舜治主编.教育因艺植物的器官与组织培养M郑州:河南科学技术出版社。l.金波等.养兰与赏兰M.北京:农村读物出版社:mOO.李浚明.植物组织培养教程M.北京:中国农业大学出版社。.郑宗坤.长春花碱的提取方法J.生物技术():.周吉源戴均贵.不同植物生长调节物质对华黄芪愈伤组织形成及器官发生的效应J.华中师大学报():.王永明.君子兰组织培养初探J.中国因林l:.AstudyontissueculureofPhalaenopsisQINFanZHOUJiyuan(CollegeofLifeScienceCentralChinaNormalUniversityWuhanChina)Abstract:ThepreliminaryresdtsoftissuecultureofPha/aenops/swerereported.TheresultsshowedthatMtmediumhasthepositiveeffectsoninducingthePLB(protocormlikebody).Thebestsuitablenlt~ulnforPLBinducementformstemopexwasmedifiednledi啪MlBA.ng/L.Thebestsuitablenl~liulnforbudinducementformrachiswasmodifiedmediumMtBA.Omg/L.ThePLBmaydifferentiateintoplantsafterthereducingofthecytokinin.AttheprimestagetheMmediumsupplementedwithBA.nw'LandNAA.mg/Ljuiceperformedwel.Theoptimaltransplantationmediumiswaterplantandthesurvivalratereachhigh.Keywords:Pha/aenops/stissuecultureprotoeomlikebody维普资讯http:wwwcqvipcom

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