第三章 脑脊液检验

脑脊液检验 第三章 脑脊液检验 脑脊液(CSF)是存在于脑室及蛛网膜下腔内的一种无色透明液体，主要是由血浆透过脑室中的脉络丛分泌产生的，经脑内静脉系统不断地进行交换和吸收，维持神经系统内环境的相对稳定。通过对脑脊液的检验，可反映出中枢神经系统的病理变化，如炎症、肿瘤、外伤、水肿、阻塞、缺血等，对神经系统疾病的诊断和治疗具有重要意义。 第一节 脑脊液的理化检验 一、脑脊液的采集与处理 1．​ 脑脊液标本由临床医生进行腰椎穿刺 采集，必要时可从小脑延脑池或侧脑室穿刺获得。穿刺应顺利，避免将血液混入标本。 2．​ 标本一般收集3管，每管1～2ml 第1管做细菌学检验，第2管做化学或免疫学检验，第3管做常规及细胞学检验。 3．​ 标本应及时送检、及时检验，一般在 1h内完成，防止细胞破坏、变性、自溶，糖分解，细菌溶解等影响检验结果。 4．细胞计数管，为避免高蛋白标本的凝固，必要时可加适量100g/L EDTA盐抗凝。 二、一般性状检验 1．颜色 正常脑脊液为无色，但无色的脑脊液并不能排除神经系统疾病，如结核性脑膜炎、病毒性脑膜炎等脑脊液常呈无色透明外观。颜色以无色、微黄、黄色、红色、白色等描述 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 。 （1）红色：常因出血所致，应鉴别新鲜出血与陈旧出血，可通过三管试验、离心试 验、隐血试验来区别，前者离心后上清液无色、清晰、隐血试验阴性。新鲜出血一般多为穿刺损伤所致，陈旧出血多为蛛网膜下腔出血。 （2）黄色：见于陈旧性出血、椎管梗阻、郁滞、黄疸等。 （3）白色或灰白色：多见于化脓性脑膜炎，因白细胞增多所致。 （4）绿色：见于铜绿假单胞菌、肺炎双球菌等所致的脑膜炎。 （5） 褐色或黑色：见于脑膜黑色素瘤等。 2．透明度 正常脑脊液清晰、透明。透明度以清晰、微混、混浊等描述报告。病理性微混或混浊多因细胞数增多（细胞数超过300×106/L）、蛋白质增加、细菌生长、异物等所致。 结核性脑膜炎时脑脊液可呈毛玻璃状，穿刺出血也可引起脑脊液轻度混浊。 3．凝块 正常脑脊液放置24h，无薄膜形成、无凝块。凝固性以无凝固、有凝固、有凝块、有薄膜等报告。当脑脊液蛋白质增多（ >10g/L）即出现凝固。各种脑膜炎时凝固出现的时间与性状是不同的。化脓性脑膜炎时的脑脊液可 在标本抽出后1～2h出现凝固（因纤维蛋白原及细胞增多）；结核性脑膜炎时的脑脊液，静置12～24h后，可形成薄膜，此膜涂片检结核菌阳性率较高。 4．比密 一般临床不做， 参考值为1.006～1.008，可通过折射仪测定，方法同尿液比密的检测。 三、化学检验 （一）蛋白质检验 正常脑脊液蛋白质含量明显低于血浆蛋 (1)​ 白，仅200～400mg/L，不同部位的蛋白含量有所不同（脑室 50～150mg/L，脑池 100～250 mg/L，蛛网膜下腔 150～400 mg/L），以白蛋白为主，球蛋白微量,低于50mg/L，没有优球蛋白和纤维蛋白原。 1.蛋白质定性试验（Pandy试验） [原理] CSF蛋白质遇饱和石炭酸溶液，生成不溶性蛋白盐而出现混浊或沉淀 。 [试剂] 饱和石炭酸（酚）溶液：取石炭酸10ml（有结晶时，先放入56℃水浴箱中加热融化），加蒸馏水至100ml，充分混匀，置入37℃温箱中数小时，见底层有石炭酸析出，上层即为饱和溶液。避光保存。 [操作] 取饱和石炭酸溶液约2ml于小试管内，加入离心后的脑脊液1～2滴，混匀，在黑色背景下观察有无混浊。 [结果判断] （-）：无混浊，清晰；（±）：稍呈白雾状，对光不易看到，黑色背景下才能看到；（+）：呈灰白色云雾状；（2+）：呈白色薄云状混浊；（3+）：呈白色絮状沉淀或白色浓云块状；（4+）：立即形成白色凝块。 [附注] （1）本法仅对球蛋白起反应，但过于敏感，一部分正常人（白蛋白超过0.25g/L）也呈弱阳性反应。 （2）脑脊液最好离心后取上清液检测。 （3）所有试管和滴管须十分清洁，以免出现假阳性。 （4）试剂纯度应高。 （5）最好在37℃水浴中进行，室温过 低，石炭酸饱和度低，易致假阴性。 [临床意义] 正常脑脊液蛋白定性试验呈阴性或极弱阳性。阳性常见于中枢神经系统的各种炎症，也可见于脑部肿瘤、脑和蛛网膜下腔出血、椎管内梗阻等。 2.蛋白质定量试验 脑脊液蛋白定性试验阳性标本需进行蛋白质定量检验。检验方法参阅第四篇蛋白质定量检验章节。 [参考值] （1）腰穿CSF蛋白质含量 0.2～0.4g/L （2）池穿CSF蛋白质含量 0.1～0.25g/L （3）侧脑室穿刺CSF蛋白质含量 0.05～0.15g/L 儿童脑脊液中蛋白质低于成人，老年人又比成年人高。 [临床意义] 脑脊液蛋白质含量增高，为血脑屏障被破坏的标志，常见于中枢神经系统的各种炎症，也可见于脑部肿瘤、脑和蛛网膜下腔出血、脊髓压迫征、退行性变、药物（乙醇、苯妥因）中毒、多发性硬化症等。脑脊液蛋白质含量减低少见，可见于硬脑膜创伤造成的CSF漏、气脑造影、甲亢等。 （二）葡萄糖定量检验 脑脊液葡萄糖定量测定方法与血液葡萄糖定量测定法相同。由于脑脊液葡萄糖含量仅为血糖的3/5，故为了提高测定的灵敏度，可将标本用量加倍，最后结果除以2即可。 [参考值] 成人 2.5～4.5 mmol/L 儿童 3.1～4.4 mmol/L [临床意义] （1）CSF葡萄糖降低见于：①脑部细菌性或霉菌性感染 ，其糖含量越低，则预后越差。②脑膜肿瘤。③神经梅毒。④脑寄生虫病。⑤低血糖。⑥其他：标本未加盖，暴露时间长，杂菌分解葡萄糖。 （2）CSF葡萄糖增高见于：①早产儿及新生儿。②血性CSF。③饱餐或静脉注射葡萄糖后。④影响到脑干的急性外伤或中毒。⑤糖尿病等，要注意因增高而掩盖了糖下降的征象。 （三）氯化物定量检验 CSF中的氯化物测定方法同血液氯化物的测定，操作参阅第四篇氯化物检验章节。 [参考值] 成人 120～130 mmol/L 儿童 111～123 mmol/L [临床意义] 脑脊液中的氯化物含量高于血中的氯化物（约1.2～1.3-倍）。对维持脑脊液渗透压的平衡有较大的作用，可受血液氯化物的浓度、脑脊液的酸碱度、脑膜的炎症渗出和粘连、垂体-间脑病变等因素的影响。CSF中氯化物的减低常见于脑部细菌性或霉菌性感染，也见于因严重呕吐、肾病等所致的低氯血症等。病毒感染及尿毒症、肾炎、心衰所致的高氯血症等使CSF中氯化物增高。 第二节 脑脊液的显微镜检验 [操作] 1.细胞计数 （1）细胞总数计数 直接计数法：将混匀CSF直接滴入计数池，静置2～3min，计数一定范围内的细胞数，换算为每升CSF中的此细胞数。 稀释计数法：如标本中细胞数过多，可用生理盐水稀释液，稀释一定倍数，再按以上方法计数，结果应乘以稀释倍数。 （2）白细胞计数 直接计数法：直接混匀充池根据形态计数白细胞。对红细胞多的标本，可用吸管吸取少量冰乙酸，使管内壁湿润有冰乙酸后全部吹出，然后吸取混匀的CSF，数分钟后其中红细胞完全溶解，再充入计数池，按上法计数。 稀释计数法：如白细胞数过多，用白细胞稀释液，稀释一定倍数，按上法计数，结果应乘以稀释倍数。 所有有核细胞（包括内皮细胞）都计在白细胞计数内。 也可将细胞总数减去红细胞数得白细胞数。 （3）红细胞计数 直接计数法：直接混匀充池根据形态计数红细胞。方法同上。 计算法：将细胞总数减去白细胞数即得红细胞数。 2.白细胞分类计数 （1）直接分类计数法：即细胞直接计数后，在高倍镜下根据白细胞形态，计数100个细胞，按单个核细胞与多个核细胞所占的百分比例报告。如细胞数不到100个，可直接写出具体数字。单个核细胞多为淋巴细胞、单核细胞或内皮细胞；多个核细胞以中性粒细胞为主。 （2）染色分类法：在细胞较多且无法识别时，将CSF标本离心，取沉淀物涂片，制成均匀薄膜，干燥后用瑞氏染色，油镜下进行分类计数。报告方式同外周血白细胞分类计数，如有内皮细胞或其他细胞，应另行描述报告。 3.病原体涂片检验 （1）细菌 脑脊液怀疑有细菌感染的，可对标本进 行离心，沉淀物涂片，作Gram染色或抗酸染色等，根据染色性质及其形态特征，加以描述报告，一般只报告“检出Gran阳性菌或Gran阴性菌” 、“检出抗酸杆菌”。如要明确细菌，则需作细菌培养。 （2）新型隐球菌 对疑有新型隐球菌性脑膜炎的脑脊液标 本，进行离心，沉淀物涂片，加优质墨汁染色先在低倍镜下观察，如发现黑色背景中有圆形透光小点，中间有一细胞大小圆形物质，即转高倍镜仔细检查其结构。新型隐球菌有明显的荚膜，周围有较宽阔的折光，并有出芽的球形孢子，直径5～20μm，菌体内有一个较大的或多个较小的反光颗粒。发现上述特征者，可报告“检出隐球菌”，需进一步作真菌培养，以确诊。 （3）寄生虫 如怀疑脑寄生虫病的，应对其脑脊液进 行离心，沉淀物涂片，在低倍镜下检查可发现血吸虫卵、肺吸虫卵、弓形体、阿米巴等，形态特征详见临床寄生虫学检验。 [注意事项] 1.收到标本应在1h内完成细胞计数，否则细胞退化变形、溶解。 2.损伤出血的CSF标本做细胞总数已无意义，白细胞应校正。 校正后CSF白细胞数=未校正CSF白细胞数-CSF红细胞数×外周血白细胞数/外周血红细胞数） 3.如发现较多红细胞形态异常如皱缩或肿胀要报告，以区别新鲜出血与陈旧出血。 4.应区别红细胞或淋巴细胞与新型隐球菌。后者有荚膜及出芽现象（墨汁染色可见），加酸不溶解。淋巴细胞加酸核更清楚。 5.细胞涂片固定时间不能太久，以免细胞皱缩，更不能高温固定。 [参考值] 正常人CSF中一般无红细胞。白细胞数极少， 成人为 （0～5）×106/L，儿童为（0～15）×106/L，主要是淋巴细胞，偶见内皮细胞，没有中性粒细胞。 [临床意义] 脑脊液中白细胞数超过10×106/L，视为有病理意义，是中枢神经系统炎症或受刺激所致，其增多的程度和细胞种类与疾病性质、病程有关。 1.中性粒细胞增高：主要见于感染性疾病，如细菌性感染明显增高、结核性感染早期中度增高、病毒性感染早期轻度增高；也可见于非感染性疾病，如出血、脑外伤、多次穿刺、转移性肿瘤、脑膜白血病以及脑血管栓塞等。 2.淋巴细胞增高：见于病毒性感染、细菌性感染的恢复期、梅毒性脑膜炎、钩端螺旋体脑膜炎、寄生虫感染等；也见于非感染性的多发性硬化症、多发性神经炎等。 3.嗜酸性粒细胞增高：少见，如脑寄生虫感染（脑囊虫病）、霉菌性感染等。 4.嗜碱性粒细胞增高：极少见，如脑膜白血病、寄生虫感染、异物反应等。 5.单核细胞增高：见于病毒性或细菌性感染、中枢神经系统变性疾病以及异物刺激等。 6.浆细胞：正常人不存在，出现浆细胞见于神经系统病毒感染、结核、寄生虫病、神经根炎、出血、早期恶性肿瘤等。CSF中的浆细胞形态与血液中浆细胞相似，圆形或椭圆形，核明显偏位，染色质呈紫红色，粗颗粒状，有时呈典型的车轮状，核仁为一个，胞浆丰富呈灰兰色，浆内可出现空泡。 7.巨噬细胞：病理情况下出现，常见于中枢神经系统的炎症、出血、外伤等疾病的 中、后期。该细胞是单核样细胞进一步激活而来，形态不一，浆内含有各种吞噬物（细胞、细菌、脂肪等），胞浆丰富，边缘不清，呈淡兰或灰兰色，核圆形或椭圆形，有时分叶状，居中或偏于一侧，染色质颗粒状，有1～2个核仁，常单个或成簇出现。 8.白血病细胞：可见于脑膜白血病的脑脊液中。形态相似于血或骨髓中的白血病细胞。 9.肿瘤细胞：见于中枢神经系统肿瘤以及脑转移肿瘤的脑脊液中。需进一步的检验确定细胞的性质，对疾病的诊断有重要的意义。 10.红细胞增高：见于脑出血、脑外伤、穿刺损伤等。 第3节​  第4节​ 脑脊液的特殊检验 一、脑脊液蛋白电泳 由于脑脊液中蛋白含量甚微，故作蛋白电泳需将标本浓缩（100～200倍），具体方法见第四篇血清蛋白电泳章节。 [参考值] 前白蛋白 2%～6% 白蛋白 44%～62% α1球蛋白 4%～8% α2球蛋白 5%～11% β球蛋白 13%～26% γ球蛋白 6%～13% [临床意义] 1.前白蛋白增高：见于脑积水、脑萎缩及中枢神经变性疾病。 2.α球蛋白增高：多见于急性细菌性脑膜炎、结核性脑膜炎急性期、脊髓灰质炎等；也见于脑膜白血病、脑转移瘤等。 3.β球蛋白增高：见于小脑萎缩、退行性病变（肌萎缩、多发性硬化症、手足搐动症等）、脂肪代谢障碍（动脉硬化症和脑血栓形成）等。 4.γ球蛋白增高：最常见于脱髓鞘 病，尤其是多发性硬化症、视神经脊髓炎等；也见于中枢神经系统感染、脑瘤、结节病等。 5.白蛋白增高：见于椎管梗阻，脑瘤、脑部血流郁滞所致脑血管通透性增加。 另外，可计算蛋白商。（蛋白商=球蛋白/白蛋白，正常为0.4～0.8） 蛋白商增高：提示球蛋白增高，见于神经梅毒，多发性硬化症等。 蛋白商减低：提示白蛋白增高，见于炎症早期，脑瘤，脊髓压迫症等。 二、脑脊液免疫球蛋白测定 采用免疫的方法检测，详见第五篇有关章节。 [参考值] 正常脑脊液免疫球蛋白含量极少，以IgG为主，约10～40mg/L，无IgM。 [临床意义] 脑脊液中IgM增高，常提示中枢神经系统感染，化脓性脑膜炎明显增高，病毒性脑膜炎轻度增高，多发性硬化症、肿瘤、锥体病等也可增高。脑脊液IgG增高，见于多发性硬化症、亚急性硬化性脑膜炎等。脑脊液IgG减少见于癫痫、X线照射等。脑脊液IgA增高，见于结核性脑膜炎、化脓性脑膜炎、病毒性脑膜炎等。脑脊液IgE增高，见于脑瘤等。 三、脑脊液中乳酸脱氢酶（LDH）的测定 测定的方法见第四篇有关章节。 [参考值] 8～32U（相当于血清的1/10）。 [临床意义] 凡有脑组织坏死时，脑脊液中LDH增高，如细菌性脑膜炎、脑血管病、脑瘤、脱髓鞘病等。也可以脑脊液LDH/血清LDH之比（<0.1）为判断 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 。 四、髓鞘碱性蛋白（MBP）测定 MBP是神经组织独有的蛋白质，占髓鞘蛋白总量的30%，在神经冲动的快速传导、对神经起一种绝缘作用，保护神经轴突起重要作用。MBP测定常采用免疫学方法。 [参考值] <4μg/L [临床意义] MBP是脑实质性损伤的特异标记，其含量的高低还可以反映损伤的范围及其严重程度。增高最多见于多发性硬化症，也见于神经性梅毒、脑血管意外等。 五、乳酸测定 CSF中乳酸定量测定的方法见第四篇有关章节。 [参考值] 1.0～2.8mmol/L。 [临床意义] CSF乳酸含量增高，易见于细菌性脑膜 炎、结核性脑膜炎化脑、结脑，而病毒性脑炎一般正常。 六、肌酸激酶（CK）测定 检测方法详见第四篇有关章节。 [参考值] 0.69～1.19U/L [临床意义] 脑脊液CK增高见于进行性脑积水，继发性癫痫，脱髓鞘疾病，脑梗死，化脓性及结核膜炎等脑缺氧所致的疾病。 七、C-反应蛋白（CRP）测定 采用免疫方法检测，详见有关章节。 [参考值] 正常CSF中不存在CRP。 [临床意义] CRP是一种急性时相蛋白，与血脑屏障有关。在炎症或组织破坏时增高，至恢复期又消失。 八、ß2-微球蛋白测定 检测用免疫学方法，详见第五篇有关章节。 [参考值] 1.3～1.8μg/L [临床意义] 增高见于急性白血病伴颅内侵润，淋巴瘤转移，细菌性脑膜炎等。 参考文献 1. 叶应妩等主编.全国临床检验操作规程.第二版,南京:东南大学出版社，1997.145～148 2．寇丽筠主编.临床基础检验学.第二版，北京:人民卫生出版社，2001.184～191 3．从玉隆等主编.当代体液分析技术与临床.北京:中国科学技术出版社，2001.35～67 （（黄小芳写）