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分枝杆菌属-医学微生物学ppt课件.ppt

分枝杆菌属-医学微生物学ppt课件

爱问超人
2019-04-23 0人阅读 举报 0 0 暂无简介

简介:本文档为《分枝杆菌属-医学微生物学ppt课件ppt》,可适用于医药卫生领域

主讲人:中华医学会临床微生物学组(~届)全国委员《中华医学检验全书》主编北华大学临床微生物学教授海南医学院客座教授李影林年月*掌握:分枝杆菌的共同特性和医学上重要的分枝杆菌结核分枝杆菌细胞壁脂类含量与其染色性、培养特性、抵抗力和致病性的关系结核分枝杆菌的致病机理结核菌素试验的原理、结果意义及应用价值结核分枝杆菌的微生物学检查原则及特异性预防。熟悉:结核分枝杆菌的生物学特性非结核分枝杆菌与结核分枝杆菌的区别麻风分枝杆菌的致病特点、微生物学诊断。了解:非结核分枝杆菌的致病情况麻风病防治原则。目的要求*分枝杆菌属概述一、概念分枝杆菌属(Mycobacterium)从形态上看是一类细长略弯曲的杆菌它在繁殖时有分枝生长的趋势故称为分枝杆菌。这类细菌用一般染色法不易着色但一经着色后有抵抗盐酸和酒精的脱色能力故又名为抗酸性细菌。*二、分类根据国际分枝杆菌分类研究组(IWGMT)的方案将本菌分为三类:缓慢生长菌迅速生长菌不能培养菌*分枝杆菌属的分类**三、共同特点细长略弯曲的杆菌有分枝生长的现象。无特殊构造,细胞壁含有大量脂质。不易着色可抵抗强酸的脱色作用(抗酸杆菌)。专性需氧致病性分枝杆菌营养要求高生长缓慢(~h一代)。致病性与菌体成分有关。均引起慢性疾病并都伴有肉芽肿。*mdashmdash引起结核病的病原菌人型和牛型结核分枝杆菌有致病作用。第一节*形态与染色形态:细长略弯曲的杆菌有分枝其特点是有时单独存在有时平行相聚排列。2染色性:G不易着色但用齐尼(ZiehlNeelsen)抗酸染色法染色后不易被盐酸酒精脱色呈阳性(红色)。非抗酸菌和背景被美蓝染成蓝色。4环境不利时(如慢性病灶、痰中或经过治疗产生耐药性后及陈旧培养物)菌体会出现串珠样颗粒状结构称为Much颗粒。3无芽胞、无鞭毛电镜下观察:菌外有一层薄的弹性膜膜外有一层较厚的粘液层mdashmdash荚膜。**结核分枝杆菌金胺ldquoOrdquo染色*培养特性1专性需氧。pH~。2营养要求特殊。常用LowensteinJensen固体培养基(分离用)和苏通液体培养基(多用于制造结核菌素等生物制剂)。馋3生长缓慢约h分裂代~周才见菌落生长。懒4典型菌落:粗糙型。菌落呈颗粒、结节或菜花状乳白色或米黄色、粗糙、不透明。癞5液体培养基:在表面形成菌膜有毒株在液体培养在中形成索状因子、无毒株则无此现象有毒菌株可呈索状生长。*结核分枝杆菌菌落特点(LJ培养基)*生化反应:不活跃.各型菌均不发酵糖类产生HO酶。结核分枝杆菌触酶()、热触酶()非结核分枝杆菌两种均为()。.人型结核分枝杆菌能合成烟酸还原硝酸盐耐受噻吩羧酸酰肼。而牛型结核分枝杆菌不能。.人型和牛型结核分枝菌中性红试验性无毒株则阴性亦失去索状生长现象。二者鉴别的依据二者鉴别的依据有毒株和无毒株的区别*结核分枝杆菌菌落特点(LJ培养基)*(四)抵抗力:较强*NaOH*丝四四丝丝*.形态变异:颗粒状(Moch颗粒)或丝状.菌落变异:由致病性R型rarr非致病性的S型。.毒力变异:变异性*什么叫卡介苗?年法国人Nocard从牛奶中分离出强毒的牛型结核分枝杆菌保存在培养基中。年法国学者Calmette和Guerin二氏用含甘油、牛胆汁和马铃薯的培养基上培养每隔~周掉换培养基一次积年累月如此更换年之久共代之多将有毒株变为对人无毒性的但抗原性不消失的活的牛型结核分枝杆菌称为ldquo卡介苗rdquo或BCG(BacilleCalmetteGuerin)以志二氏之名。用这种无毒的但具有抗原性的牛型结核分枝杆菌给人注射(或口服)后可预防结核病。*.耐药性变异()基因突变:单一突变较双重或多重突变多见。利福平mdashmdash是由结核分枝杆菌编码RNA聚合酶b亚基(YPOB)的基因突变。链霉素mdashmdash其作用机制是在核糖体水平干扰结核分枝杆菌蛋白质的合成。其耐药机制主要是结核分枝杆菌编码核糖体S蛋白的rPSL基因发生突变以及编码SrRNA的rrs基因突变。异烟肼mdashmdash其耐药机制与结核分枝杆菌过氧化氢酶和过氧化物酶的失活有关。()形成L型细菌。很可能系高效化学药物和强化治疗的产物。*致病物质()致病性荚膜:主要成分为多糖部分为脂质和蛋白质()与吞噬细胞表面的补体受体(CR)结合与菌的黏附和入侵有关。()荚膜中的多种酶可降解宿主组织中的大分子物质为结核分枝杆菌提供营养。()防止宿主的有害物质进入结核分枝杆菌(小分子的gLNaOH也不易进入)。()抑制吞噬体与溶酶体的融合。*脂质()磷脂:促使单核细胞增生引起结核结节形成与干酪样坏死。()索状因子:存在于有毒株的细胞壁中为分枝菌酸和海藻糖结合的糖脂。能破坏细胞线粒体膜抑制氧化磷酸化过程。抑制白细胞游走和引起慢性肉芽肿。与结核分枝杆菌毒力密切相关。()蜡质D:具有佐剂作用可激发机体产生迟发型变态反应。()硫酸脑苷脂:抑制吞噬细胞中吞噬体与溶酶体的结合使其能在吞噬细胞中长期存活。致病物质()*蛋白质(结核菌素):与蜡脂D结合使机体产生迟发型变态反应,参与结核结节的形成,蛋白质有抗原性,可刺激机体产生相应抗体。多糖:主要有阿拉伯半乳聚糖和阿拉伯甘露聚糖与脂质成分结合存在于细胞壁中。作用机制尚不清楚。分枝杆菌生长素:脂溶性的铁螯合剂,对铁有亲和力。可将环境中的铁转运到菌体内铁是结核分枝杆菌生长必要的微量元素即与宿主竞争铁故是一种毒力因子。致病物质()*所致疾病传染源:病人传播途径:呼吸道、消化道、破损的皮肤粘膜等途径。mdashmdash结核尤其以肺结核多见。肺部感染原发感染:多见于儿童继发感染:多见于成人有局限性肺外感染:脑、肾、肠结核结核性腹膜炎等。*继发性肺结核*肺结核的两种表现原发感染:原发综合征原发后感染:干酪样坏死、空洞原发综合征:原发灶、淋巴管炎、肺门淋巴结肿大呈哑铃形病损。病程呈慢性渐进性:病灶多局限呈干酪样坏死若结节破溃则可形成空洞排出大量病菌传染性强。感染免疫超敏反应同时存在空洞病损粟粒性(多发性)病损*致病机制()TB菌呼吸道消化道皮肤黏膜尿路易感机体吞噬细胞吞噬菌量少毒力低菌量多毒力强吞噬细胞的非特异性杀菌活力所杀灭细菌大量繁殖导致宿主细胞裂解释放细菌再次被其他巨噬细胞吞噬结核分枝杆菌及其宿主细胞产生的Ca等可吸引更多的巨噬细胞和中性粒细胞向局部聚集炎症早期病灶原发结核~W产生细胞免疫反应迟发性超敏反应导致代谢增加吞噬、消化、分泌处理抗原能力有效杀灭结核分枝杆菌*致病机制()细胞免疫反应结核分枝杆菌致敏CD细胞再次遇到相同抗原刺激产生释放多种淋巴因子激活巨噬细胞导致代谢增加,吞噬、消化、分泌,处理抗原能力有效杀灭结核分枝杆菌迟发型超敏反应T细胞介导巨噬细胞为效应细胞针对细菌及其代谢产物产生超常反应。由于淋巴细胞和巨噬细胞释放TNF和蛋白水解酶等产物的直接作用以及造成局部血管栓塞和缺血的间接作用引起细胞坏死和干酪样病变造成组织损伤和破坏形成空洞。结核分枝杆菌易大量繁殖并扩散。*传染免疫(有菌免疫)mdashmdash即只有当TB菌在体内存在时才有免疫力一旦体内的TB菌被杀灭免疫力也随之消失。伴有变态反应结核菌素蛋白、蜡质Dmdashmdash产生变态反应结核分枝杆菌核蛋白体RNAmdashmdash产生免疫免疫性mdashmdash细胞免疫为主*超敏反应何谓郭霍现象(Kochphenomenon)?将一定量结核分枝杆菌健康豚鼠第一次皮下注射局部发生坏死性溃疡不易愈合~d附近淋巴结肿大细菌扩散全身已感染过的豚鼠第二次皮下注射局部发生溃疡但较浅易愈合附近淋巴结不肿大细菌很少扩散迅速~d结核分枝杆菌核糖体RNA(rRNA)引起免疫反应结核菌素蛋白与蜡质D共同刺激产生迟发性超敏反应意义:因为在自然感染过程中细胞免疫与迟发性超敏反应同时存在。因此通过测定机体对结核分枝杆菌有无超敏反应可判定对结核有无免疫力常用结核菌素来测定。*结核菌素试验原理:迟发型变态反应应用结核菌素进行皮肤试验测定机体对结核分枝杆菌是否能引起变态反应。试剂:OT(oidtuberculinOT)旧结核菌素PPD(purifiedproteinderivativePPD)纯蛋白衍生物PPDC由人结核分枝杆菌提取BCGPPD由卡介苗制成方法:OT或PPDu(ml)前臂皮内注射~h观察结果。红肿硬结mm者为阳性gemm为强阳性红肿硬结<mm者为阴性。若两侧接种时两侧红肿中若PPDC侧>BCGPPD侧为感染。若PPDC侧<BCGPPD侧为卡介苗接种所致。PPD*方法*结果判定:ⅰ阴性():注射部位有针眼大的红点或稍有红肿硬结直径小于mm。ⅱ阳性():硬结直径超过mm,而在mm以下者。ⅲ强阳性():注射部位反应较强或硬结。直径超过mm以上。或有水泡发紫、淋巴管炎及全身反应。*结核菌素反应迟发型超敏反应(DTH):阳性者表现为红肿硬结①检验卡介苗的接种效果②衡量机体免疫状态。**菌对结核分枝杆菌有老年人或免疫功能低下者。ⅱ接种过卡介苗ⅲ*应用:⒈选择BCG接种对象和免疫效果的测定⒉作为婴幼儿结核病的辅助诊断⒊测定肿瘤患者的细胞免疫功能⒋在未接种BCG的人群中调查结核流行情况。*微生物学检查标本采集:根据感染部位不同直接涂片镜检:抗酸染色、金胺染色浓缩集菌:离心沉淀分离培养:~w观察菌落生化、药敏试验动物试验:豚鼠腹股沟皮下接种快速诊断:PCR、核酸探针、DNA、色谱分析技术、BactecTB系统等*防治原则预防()加强卫生管理改善营养条件。()早期发现和治疗病人()接种卡介苗(BCG)治疗:链霉素、利福平、异烟肼、对氨水杨酸、乙胺丁醇等强调联合、足程、合理用药*本菌引起牛的结核感染。人饮用被此菌污染的牛乳也可被感染。一般不引起肺部感染主要引起髋关节、膝关节及脊椎部骨髓病变及淋巴结感染。但由呼吸道吸入也可发生与结核分枝杆菌相同的感染。不易区别!本菌的生物学性状及毒力与结核分枝杆菌很相似。*mdashmdash是引起慢性传染病麻风的病原体第三节*生物学性状形态染色:.麻风分枝杆菌形态及大小均与结核分枝杆菌相似。但较结核分枝杆菌为短粗G菌。.长短不一常相聚成团如球形或平行束状排列如一捆柴或一束香烟。.多存在于麻风细胞(或泡沫细胞)内.经治疗后麻风分枝杆菌多呈不典型的形态呈破碎的菌体或似颗粒型。.无芽胞、无荚膜、无鞭毛不能运动。.抗酸性染色其性能较结核分枝杆菌略差。典型胞内菌。麻风细胞:胞浆呈泡沫状培养:人工体外培养迄今尚未成功仅建立动物感染模型*致病性与免疫性传播途径:破损的皮肤、粘膜呼吸道和接触传播传染源:患者(瘤型)免疫力:与结核分枝杆菌相似以细胞免疫为主所致疾病:麻风*分型瘤型结核样型界限型未定类mdashmdash细胞免疫缺陷巨噬细胞功能低下主要侵犯皮肤、粘膜传染性强麻风结节、狮子面容麻风菌素试验()mdashmdash细胞免疫正常发生于皮肤和外周神经表现为皮肤斑疹、周围神经细胞浸润变粗变硬感觉功能障碍。传染性弱良性麻风麻风菌素试验()mdashmdash过渡型mdashmdash麻风早期阶段*微生物学检查标本采集:鼻粘膜或皮损处取材涂片染色镜检:抗酸染色、金胺染色麻风菌素试验:不能用于诊断但可用于分型及了解麻风患者及接触者的预后。*防治原则目前尚无特异性预防方法普查、定期检查早期发现早期隔离BCG预防有一定效果预防:治疗:砜类(氨苯砜)、利福平、氯苯吩嗪、丙硫异烟胺等联合治疗防治耐药性产生。*概述:除上述人型结核分枝杆菌、牛分枝杆菌与麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌均称为非结核分枝杆菌。根据产生色素、生长速度和生化反应等分为组:光产色菌暗产色菌不产色菌快速生长菌非结核分枝杆菌有无致病性可采用抗煮沸实验!*分枝杆菌属的分类**三、共同特点细长略弯曲的杆菌有分枝生长的现象。无特殊构造,细胞壁含有大量脂质。不易着色可抵抗强酸的脱色作用(抗酸杆菌)。专性需氧致病性分枝杆菌营养要求高生长缓慢(~h一代)。致病性与菌体成分有关。均引起慢性疾病并都伴有肉芽肿。******************************************************

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