玫瑰冠鸡IGF-I基因多态性与体重及屠体性状关系的研究

玫瑰冠鸡IGF-I基因多态性与体重及屠体性状关系的研究玫瑰冠鸡IGF-I基因多态性与体重及屠体性状关系的研究PAGE/NUMPAGES玫瑰冠鸡IGF-I基因多态性与体重及屠体性状关系的研究玫瑰冠鸡IGF-I基因多态性与体重及屠体性状关系的研究纲要采纳PCR-RFLP技术，对100只玫瑰冠鸡的胰岛素样生长因子一I（IGF-I）基因的5′端调控区进行遗传多态性研究，该调控区的扩增产物经PstI酶切后出现“-/-”“+/-”“+/+”3种基因型，其基因型频次分别是0.22、0.36和0.42。经x2查验，玫瑰冠鸡在IGF-I位点上处于哈代－温伯格均衡状态（P＞0.05）。剖析基因型与12周龄体重和部分屠体性状时发现：玫瑰冠鸡在12周龄体重、半净膛重和胸肌重上都存在“-/-”＞“+/-”＞“+/+”的趋向，且在半净膛重和胸肌重上，“-/-”型和“+/-”个体明显高于“+/+”型个体（P0.05）；在12周龄体重上，“-/-”型明显高于“+/+”型个体（P＜0.05）。重点词玫瑰冠鸡；胰岛素样生长因子-I；体重；屠体性状；PCR-RFLP巨型玫瑰冠鸡是我国古老的地方鸡种之一，其红色桑椹状的冠形好似新疆天山上的雪莲，娇艳醒目，并拥有耐粗饲、抗寒耐暑以及抗病力强等优秀生物学特征。现有的2000多只玫瑰冠土鸡拥有肉味鲜美、香气浓烈、细嫩爽口等优秀品质，这是我国以致世界上可贵的家禽种质资源和育种素材。在体重、屠体性状上，王金玉等[2]、Haberfeld等[3]、Lament等[4]用DNA指纹技术做过研究。颜炳学等[5]、欧阳建华等[6]分别对IGF-Ⅱ基因和IGF-I基因进行了多态性检测， 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 示基因与生长、屠体性状有关。孟和等[7]、赵建国等和顾志良等[9]分别对PPAR-a基因、解偶联蛋白基因和瘦蛋白受体（OBR）基因进行了单核苷酸多态性研究。Baker等[10]、Siddiqui等[11]、Goddard等[12]、Scanes等[13]和Kang等[14]研究了IGF-I浓度和经济性状之间的关系。Nagaraja等对采食量、体重、产蛋量和蛋重与IGF-I多态性进行了研究，并指出了IGF-I基因型可用于选择[15]。但迄今，罕有把IGF-I基因作为候选基因研究与屠体性状关系的报导。资料与方法1.1试验鸡选择和饲养试验鸡选自石河子152团玫瑰冠鸡保种群，依据系谱从每家系随机选3～4只，共100只，独自组群，以扩大试验群的遗传基础，提升其代表性。试验鸡一致饲养于玫瑰冠鸡保种场，采纳厚垫料饲养方式，免疫程序和饲养管理按一般管理方法进行，尽可能保证受试鸡的饲养管理条件同样。分0～3周、4～8周和8～12周三阶段饲养，所用颗粒料均购自天康饲料有限企业。1.2DNA多态性剖析1.2.1基因组DNA提取。翅静脉采血0.3mL放入1×STE470μL、10%SDS25μL，加入浓度为0.1mg/mL的Proteinasek5.25μL，55℃水浴留宿，充足消化蛋白质和RNA；加入等体积的饱和酚（约550μL），轻摇10min，离心（12000rmp）15min，汲取含DNA的上清液；加入500μL苯酚、氯仿、异戊醇（25∶24∶1）混淆液，轻摇10min，离心（12000rmp）15min，汲取含DNA的上清液，用氯仿、异戊醇（24∶1）再抽提1次，加入1/10体积的NH4AC（约60μL），混匀，再加入2倍体积的预冷无水乙醇，轻轻混匀，可见絮状积淀，4℃积淀1h，离心（10000rmp）10min后弃去上清液。将积淀搁置20～30min，使乙醇挥发洁净，而后加入100μLTE于4℃冰箱保留备用。1.2.2引物。所用引物参照Nagaraia等[15]供给的序列，序列以下：Forward5′-GACTATACAGAAAGAACCCAC-3'，Reverse5′-TATCACTCAAGTGGCTCAAGT-3′。引物由上海生物工程有限企业合成。1.2.3PCR扩增。采纳25μL反响系统，10xBufer2.5μL，MgCl2（25mmoL/L）1μL，dNTPs（2.5mmoL/L）1.5μL，前后引物（5pmoL/L）各1μL，DNATaq聚合酶（5U/μL）0.5μL，模板DNA1μL，去离子水16.5μL。PCR反响循环参数为：94℃预变性5min，94℃变性60s，56℃退火120s，72℃延长90s，共34个循环，最后72℃延长8min，4℃保留。PCR扩增产物用1%的琼脂糖凝胶电泳，溴化乙锭（EB）染色后检测扩增结果。1.2.4酶切判定。取PCR产物12μL，PstI酶（10U/μL）1.5μL，10xBufer1.5μL，加双蒸水至20μL，37℃酶切留宿，酶切产物用2%琼脂糖凝胶电泳，EB染色，凝胶成像剖析系统摄影检测基因分型。1.3统计剖析全部数据均用SPSS11.0统计软件统计剖析，基因型散布用x2查验。结果2．1PCR及酶切结果依据鸡IGF-I基因前导序列计算，目标扩增片段长度为621bp。本试验所扩增的片段长度经0.8%的琼脂糖凝胶电泳检测与之符合，且没有杂带，能够进一步作酶切判定（见图1）。酶切产物用2%的琼脂糖凝胶电泳，EB染色，所摄影片见图2。由图2可见，1个PstI酶切变异点，即1平等位基因，不可以被酶切者标志为PstI“-”（621bp），能被酶切者标志为PstI“+”（364bp+257bp），有3种条带组合，即3种基因型（“+/+”“-/-”“+/-”）。这与S.C.Nagarala报导的结果一致。2.2基因频次和基因型频次玫瑰冠鸡群IGF-I基因PstI酶切位点的基因频次和基因型频次见表1，统计剖析发现基因频次和基因型频次在性别间散布差别不明显。两性中，“+”基因频次都大于“-”。不论公、母鸡仍是整个试验群，基因频次散布均切合哈代－温伯格定律，P＞0.05。2.3不一样基因型生长的关系依据最小二乘原理估出计线性模型中各要素、水平的效应值，用模型对原始数据进行校订，求得12周龄玫瑰冠鸡体重的最小二乘均数，并进行均数间的多重比较（见表2）。从表2能够看出：12周龄体重“-/-”型明显高于“+/+”（P＜0.05），且3种基因型间存在“-/-”＞“+/-”＞“+/+”的趋向，但“-/-”与“+/-”及“+/-”与“+/+”间差别不明显。议论本研究利用玫瑰冠鸡为研究对象，获得的IGF-I位点的基因型频次与Nagaraja等[15]和Seo等[17]分别利用白来航鸡和韩国当地鸡获得的结果稍有差别，这类差别可能存在于不同品种之间或许与鸡的不一样经济种类有关。可能是因为对白来航鸡蛋产量进行长久的选择，使之IGF-I等位基因频次发生了偏离的缘由。但在不一样的集体中等位基因“+”频次有较高的趋向。这能在必定程度上说明酶切位点的产生是点突变的结果。查验说明玫瑰冠鸡在该扩增位点上处于哈代－温格伯遗传均衡状态，这可能表示玫瑰冠鸡作为一种兼用的地方品种，在该位点上遇到的选择影响较小或作为纯种获得了保护。在本研究中12周龄体重和部分屠体形状表达的差别主要依靠于性别，而不是基因型，基因型仅在半净膛重和胸肌重上表现明显差别。这一点与闵令江等[16]、Seo等[17]的报导特别符合，也表示IGF-I对生长和肌肉发育的影响是复杂的。在白来航鸡中IGF-I基因型除了与蛋及蛋壳重有关外，与体重、摄食和产蛋率等性状没有关系[15]，在韩国公鸡中“+/+”基因型比其余基因型表达更高的体重[17]。而在本研究中却发现不论性别，“-/-”＞“+/-”＞“+/+”，“-/-”基因型比“+/-”和“+/+”基因型总能表达更高的体重（12周龄）和部分屠体性状。这些不一样可能反应了不一样品种之间的不一样遗传特征。对基因型与屠体性状的剖析发现，“+/+”基因型同“+/-”和“-/-”型在半净膛重和胸肌重差别明显（P＜0.05）。所以，依据这些结果能够初步以为，IGF-I基因可能是影响鸡的部分屠体性状的主基因或许与控制这些性状的主基因连锁，本研究成就可用于玫瑰冠鸡有关性状的标志协助选择。本文为全文原貌未安装PDF阅读器用户请先下载安装原版全文4参照文件廖和荣，赵宗胜，李岩，等.玫瑰冠鸡和不一样种类肉鸡肉质量的比较研究[J].中国家禽，2004，8（1）：176-178.王金玉，龚允陈，陈国宏，等．鸡的DNA指纹与屠宰性能的有关性研究[J]．遗传学报，1999，26（4）：324-328.HABERFELDA．HeterosisandDNAfingerprintinginchicken[J]．PoultryScience，1996（75）：951-953.[4]LAMENTSJ．Geneticsmarkerslinkedtoquantitativetraitsinpoultry[J]．AnimalGenetics，1996（27）：1-8.[5]颜炳学，李宁，邓学梅，等．鸡类胰岛素生长因子-Ⅱ基因单核苷酸多态与生长、屠体性状有关性的研究[J]．遗传学报，2002，29（1）：30-33.欧阳建华，孙汉，李海华，等．鸡胰岛素样生长因子-I基因的遗传多态性与其体重的关系[J]．畜牧兽医学报，2003，34（6）：525-529.孟和，王桂华，王启贵，等．鸡PPAR基因单核苷酸多态与脂肪性状有关的研究[J]．遗传学报，2002，29（2）：119-123.赵建国，李辉，孟和，等．解偶联蛋白基因作为影响鸡脂肪性状候选基因的研究[J]．遗传学报，2002，29（6）：481-486.顾志良，赵建国，李辉，等．鸡瘦蛋白受体（OBR）基因外显子9单核苷酸多态性剖析[J]．遗传，2002，24（3）：259-262.[10]BAKERRL，PETERSONAJ，BASSNC，eta1．Replicatedselectionforinsulin-likegrowthfactor-Iandbodyweightinmice[J]．TheorApplGenet，1991（81）：685-692．[11]SIDDIQUIRA，MCCUTCHEONSN，BLAIRHT．Growthallometryoforgans，muscleandbonesinmicefromlinesdivergentlyselectedonthebasisofplasmainsulin-likegrowthfactor-I[J]．GrowthDevAging，1992（56）：53-60.GODDARDC，WILKIER，DUNNIC.herelationbetweeninsulin-likegrowthfactor，growthhormone，thyroidhormoneandinsulininchickensselectedforgrowth[J]．DomestAnimEndocrinnol，1988（5）：165-176.[13]SCANESCG，DUNNINGTONEA，BUONOMOFC，eta1．Plasmaconcentrationsofinsulin-likegrowthfactor-IAnd-Ⅱindwarfandnormalchickensofhighandlowweightselectedlines[J]．GrowthDevAging，1989（53）：151-157.KANGWJ，YUNJS，SEODS，eta1．Studyontheassociationofearlyeggproductionwithseruminsulinlikegrowthfactor-IinKoreanNativeOgolchicken[J]．JAnimSciTechnol，2000，42（6）：767-776.[15]NAGARAJASC，AGGREYSE，YAOJ，eta1．TraitassociationofageneticmarkerneartheIGF-Igeneinegglayingchickens[J]．JHeredity，2000，91：150-156.闵令江，潘庆杰，陈宏，等.寿光鸡IGF―I基因多态性与体重及屠体性状关系的研究[J].畜牧兽医学报，2005，36（7），645-648.[17]SEODS，YUNJS，KANGWJ，eta1．Associationofinsulin-likegrowthfactor-I（IGF-I）genepolymorphismwithserumIGF-IconcentrationandbodyweightinKoreanNativeOgolChicken[J]．Asian-austJAnimSci，2001，14（7）：915-921.王志跃，范刚，杨海明，等.新扬州鸡IGF-I基因多态性与初期生长速度关系的研究[J].中国家禽，2004，26（24）：9-12.本文为全文原貌未安装PDF阅读器用户请先下载安装原版全文